导读:本文包含了长期骨髓培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:骨髓,干细胞,细胞,基质,白血病,生物学,细胞系。
长期骨髓培养论文文献综述
章淑艳,倪德胜,王维戚[1]（2019）在《二甲双胍改善长期体外培养骨髓间充干细胞的增殖和分化功能》一文中研究指出目的:观察二甲双胍(metfomin, Met)能否改善体外长期培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的增殖和成骨分化功能。方法:分离小鼠BMMSCs进行体外培养,选取P1代和P6代细胞,P6代细胞用Met处理,检测细胞增殖,克隆形成,ALP活性、矿化结节和成骨基因mRNA表达水平。使用试剂盒检测细胞ROS水平,并检测抗氧化、干细胞属性(干性)及衰老相关基因的mRNA表达情况。结果:小鼠P6代BMMSCs的增殖和成骨分化功能明显低于P1代细胞,Met可以显着提高P6代细胞的增殖和成骨分化能力,并提高细胞的抗氧化功能和干性,降低衰老相关基因表达。结论:Met能够增强体外长期培养的小鼠BMMSCs的增殖和分化功能,这种作用可能是通过改善氧化应激和提高干性实现的。(本文来源于《实用口腔医学杂志》期刊2019年03期）
田蒙[2]（2013）在《体外长期培养人骨髓间充质干细胞不同时相生物学特性研究》一文中研究指出目的：探讨体外长期培养人骨髓间充质干细胞在不同时相的生物学特性的变化,为干细胞的体外安全性评估提供可靠的研究依据。方法：采用密度梯度离心、贴壁培养相结合的方法分离hBMSCs,进行长期体外培养。在不同培养时相,采用相差显微镜记录hBMSC的形态变化,并记录不同代数的细胞传代所需时间,同时应用流式细胞技术检测不同培养时相的细胞表面标志抗原表达变化和细胞周期变化。结果：采用密度梯度离心、贴壁培养相结合的方法成功分离出hBMSCs,体外长期培养并追踪观察了25代,共248天。原代细胞培养早期(第15代之前),细胞的各项指标相对稳定；而培养后期,细胞形态、增殖速度、细胞表面标志抗原表达均发生改变,表现为：生长速度减慢；CD44、CD90表达明显下降；处于静止期的细胞显着减少,处于活跃增殖期的细胞比例显着增加,凋亡细胞数量明显增加。结论：体外长期培养人骨髓间充质干细胞,随着体外培养时间的增加,细胞的生物学性状发生改变,逐步失去干细胞特性。本研究为干细胞体外安全性的评估提供了研究依据。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2013-04-01）
邹立津,张友来,辛国华,曾元临[3]（2012）在《体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞生物学特性变化》一文中研究指出目的观察体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的变化。方法将第1代MSCs(早期)和第35代MSCs(晚期)分别进行细胞形态学观察和染色体核型分析;钙沉积和细胞增殖测定,以及采用实时定量PCR定量分析成骨分化及成脂分化相关基因表达。结果早期培养的MSCs细胞形态为较大的纺锤形,晚期为小的梭形。第35代MSCs细胞Ki-67染色强阳性,染色体数目增加。成骨诱导条件下早期MSCs茜素红S染色呈强阳性,晚期MSCs未见明显染色且OC基因表达明显下调(P<0.01);成脂诱导条件下早期MSCs油红O染色阳性,晚期MSCs未见明显染色且PPARγ2基因表达明显下调(P<0.01)。结论体外长期培养的家猪晚期MSCs不适合作为组织工程种子细胞。(本文来源于《江西医药》期刊2012年11期）
李旭升,胡蕴玉[4]（2009）在《成年兔骨髓基质细胞之软骨细胞表型的诱导及体外长期培养时表型的维持》一文中研究指出目的探讨体外诱导成年兔骨髓基质细胞(M SCs)表达并长期保持软骨细胞表型的方法。方法原代骨髓基质细胞传代后,以含rhTGF-β1、地塞米松、维生素C等的成软骨培养液诱导培养,以倒置相差显微镜观察细胞形态变化,通过甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化检测诱导的M SCs的软骨细胞表型。诱导的M SCs在体外长期持续或间断以含1ng/m lrhTGF-β1诱导液培养,以单纯DM EM培养为对照,观察细胞传5代后的表型变化。结果原代培养的M SCs传代后,在成软骨诱导培养后,细胞逐渐由梭形变为多边形,诱导7d后即可表达Ⅱ型胶原,甲苯胺蓝染色阳性。具软骨细胞表型诱导后的M SCs在间断或持续以低浓度rhTGF-β1诱导下长期培养,仍可保持其软骨细胞表型,对照组则表现为成纤维样细胞。结论成年兔骨髓基质细胞可在体外培养条件现下诱导成软骨细胞,低浓度的TGF-β1可维持诱导的骨髓基质细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原。(本文来源于《中国中医急症》期刊2009年10期）
黄英华,韦瑛,蔡捷,朱名毅,李小平[5]（2009）在《人骨髓间充质干细胞体外长期传代培养及恶性转化趋势实验研究》一文中研究指出目的探讨人骨髓间充质干细胞体外长期传代培养、扩增及其生物学特性,观察其恶性转化趋势的可能性。方法采用密度梯度离心差速贴壁法对人骨髓来源的间充质干细胞进行分离纯化,并进行体外长期传代,观察细胞形态及生长方式;鉴定细胞分化能力;相关癌标志P53、Ki67的表达与成瘤性检测。结果经过长期体外培养的人间充质干细胞,至36代时,细胞逐渐老化;成骨分化诱导能力丧失;相关癌标志表达阴性;无成瘤性。结论人骨髓间充质干细胞在体外可以有限传代,无显着恶性转化趋势。(本文来源于《中国临床新医学》期刊2009年06期）
黄畅,朱文彪,朱海林,汪保和,王绮如[6]（2007）在《小鼠骨髓内皮细胞系的长期传代培养和生物学特性鉴定》一文中研究指出小鼠骨髓内皮细胞系建立、保存和传代培养已10年之久。本研究的目的是对该内皮细胞系的生物学特性进行新的鉴定,以便利用该内皮细胞系进行进一步研究。取经传代培养的该内皮细胞系细胞,进行显微光镜和电子显微镜观察、分子标志检测、吞噬实验、生长动力学分析以及核型鉴定等。结果表明:细胞在亚汇合贴壁层中多为椭圆形、圆形或梭形,部分可呈条索状排列,在汇合层中一般为鹅卵石状。CD31、vWF抗体染色阳性细胞占94%以上,摄取DiI-Ac-LDL的细胞达98.5%。在常规培养条件下,快速增殖期的细胞群体倍增时间约为54.6小时,分裂指数最高达到38‰。集落产率介于4.33%-7.40%。核型主要为超二倍体。结论:该细胞系保持了内皮细胞的基本特征,生长动力学和一些生物学行为与建系之初稍有差异。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2007年06期）
孙健,宋振岚[7]（2007）在《长期培养人急性髓系白血病骨髓基质上清液对早幼粒白血病细胞的影响》一文中研究指出目的:通过观察长期培养的白血病骨髓基质上清液对早幼粒白血病细胞体外的作用,寻求一种体外净化辅助方法。方法:实验于2002-04/2003-12在大连医科大学附属第二医院血液内科实验室完成。20例急性髓细胞白血病为初诊或复发病例。男11例,女9例,19～55岁,平均36.8岁,由大连医科大学附属第二医院血液内科、大连市友谊医院血液内科、铁路医院血液科、大连大学附属医院血液科提供。患者知情同意并签署知情同意书。诊断均符合张之南主编的“血液病诊断及疗效标准”,其中M12例,M28例,M34例,M42例,M54例。常规分离培养人骨髓基质细胞,收集14,28,35d的上清分别与早幼粒白血病细胞共孵育,以不加入急性髓细胞白血病基质上清液的早幼粒白血病细胞的培养体系作为阴性对照,通过形态、流式细胞术、DNA电泳来观察早幼粒白血病细胞有无分化及凋亡表现。结果:20例患者均进入结果分析。①急性髓细胞白血病骨髓基质细胞是由网状细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、脂肪细胞组成。②Wright-Giemsa染色可见阴性对照早幼粒白血病细胞为悬浮生长,胞体内含颗粒,增殖旺盛,镜下常见核分裂、增殖状态的早幼粒白血病细胞;14d及28d培养的急性髓细胞白血病基质上清液作用的早幼粒白血病细胞,形态未见明显变化,35d培养的急性髓细胞白血病基质上清液作用的早幼粒白血病细胞出现细胞变形,细胞核出现改变,部分细胞核仁减少或消失。NBT还原实验发现部分早幼粒白血病细胞胞奖内出现紫蓝色颗粒,并见到核碎解成染色质小体(凋亡小体)。③35d时相上清液孵育的早幼粒白血病细胞部分出现分化现象,部分出现凋亡小体,DNA电泳见梯形带,流式细胞术检测出凋亡峰。④培养35d的急性髓细胞白血病基质上清液对早幼粒白血病细胞的诱导分化及促凋亡作用明显强于培养14,28d的急性髓细胞白血病基质上清液及阴性对照组[分化细胞数:1.5±1.8,2.1±1.5,17.3±3.0,41.0±11.1;凋亡细胞数:5.2±1.7,7.3±1.9,10.1±2.2,35.2±13.9,P<0.05],其他组间差异不显着。结论:培养35d的白血病骨髓基质上清液对早幼粒白血病细胞具有诱导分化、促进凋亡的作用。可能为白血病体外净化提供一种辅助方法。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年15期）
孙健,宋振岚[8]（2007）在《长期培养自体骨髓基质上清中白细胞介素3、白细胞介素6及肿瘤坏死因子和干扰素水平的变化》一文中研究指出选择大连医科大学附属二院血液内科、大连市友谊医院血液科、铁路医院血液科、大连大学附属医院血液科初诊或复发的20例急性髓细胞白血病为实验对象,男11例,女9例,19～55岁,诊断均符合张之南的《血液病诊断及疗效标准》。长期培养白血病骨髓基质上清,取14,28,35d不同时间点的上清,应用ELISA法检测细胞因子水平。结果显示,培养14d的白细胞介素3含量低于28d及35d时间点(P<0.05),培养28d、35d其含量差异不显着(P>0.05);培养14d、28d的急性髓细胞白血病基质上清中白细胞介素6含量差异不显着(P>0.05),其含量均高于35d时间点(P<0.05);培养28d的肿瘤坏死因子α含量明显高于14d及35d时间点(P<0.05);14d与35d含量差异不显着;干扰素α含量随培养时间的延长而增高,各组间差异不显着。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年11期）
张明伟,于晓妉,郭子宽,吴英,江小霞[9]（2005）在《体外长期培养对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响》一文中研究指出间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)具有体外增殖能力强及多向分化潜能,是目前临床应用的重要组织工程种子细胞。MSC经体外培养后干细胞生物学特性是否发生改变,是临床应用中亟待了解的问题。本实验以正常成人骨髓源MSC为研究对象,应用流式细胞学、细胞化学和染色体显带技术,观察了体外不同传代次数的MSC表面表型、分化能力和核型改变。结果显示:随着传代次数的增加,培养的MSC向软骨细胞、成骨细胞和脂肪细胞分化的能力依次减弱,但并不伴有细胞表面标志和核型的改变。这一结果提示,尽管体外培养的MSC遗传稳定性好,但高度增殖使细胞多向分化能力非同步逐渐丧失。因此在以MSC作为种子细胞构建不同的组织时,应注意选择适宜的扩增培养代数以便获得理想的细胞数目扩增同时保留细胞最佳分化能力。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2005年01期）
文德敏,周燕,华平,谭文松[10]（2004）在《人胚胎骨髓基质干细胞的长期培养及体外成骨特性》一文中研究指出研究了人胚胎骨髓基质干细胞(hBMSCs)在体外长期培养时的基本特性和向成骨细胞的分化能力。结果表明:前叁代hBMSCs多数呈长梭形,生长快速,增殖能力强;而后几代细胞变得比较扁平,生长缓慢,增殖能力下降;至第六代,细胞已失去增殖能力。每一代细胞生长均分为延滞期、对数生长期和稳定期,延滞期一般为6～7d,对数生长期为4～5d,最后是稳定期。前叁代细胞对数生长期的群体倍增时间(PDT)基本相同,而第四代细胞的PDT略有上升,第五代细胞的PDT最大。在体外扩增能力方面,前叁代细胞均可以扩增18倍左右,而第四、第五代细胞则下降至11倍、5倍。实验结果表明扩增后的细胞经过诱导可以形成钙化小结,与未诱导细胞相比碱性磷酸脂酶(ALP)活性显着提高。(本文来源于《华东理工大学学报》期刊2004年03期）
长期骨髓培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：探讨体外长期培养人骨髓间充质干细胞在不同时相的生物学特性的变化,为干细胞的体外安全性评估提供可靠的研究依据。方法：采用密度梯度离心、贴壁培养相结合的方法分离hBMSCs,进行长期体外培养。在不同培养时相,采用相差显微镜记录hBMSC的形态变化,并记录不同代数的细胞传代所需时间,同时应用流式细胞技术检测不同培养时相的细胞表面标志抗原表达变化和细胞周期变化。结果：采用密度梯度离心、贴壁培养相结合的方法成功分离出hBMSCs,体外长期培养并追踪观察了25代,共248天。原代细胞培养早期(第15代之前),细胞的各项指标相对稳定；而培养后期,细胞形态、增殖速度、细胞表面标志抗原表达均发生改变,表现为：生长速度减慢；CD44、CD90表达明显下降；处于静止期的细胞显着减少,处于活跃增殖期的细胞比例显着增加,凋亡细胞数量明显增加。结论：体外长期培养人骨髓间充质干细胞,随着体外培养时间的增加,细胞的生物学性状发生改变,逐步失去干细胞特性。本研究为干细胞体外安全性的评估提供了研究依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
长期骨髓培养论文参考文献
[1].章淑艳,倪德胜,王维戚.二甲双胍改善长期体外培养骨髓间充干细胞的增殖和分化功能[J].实用口腔医学杂志.2019
[2].田蒙.体外长期培养人骨髓间充质干细胞不同时相生物学特性研究[D].北京协和医学院.2013
[3].邹立津,张友来,辛国华,曾元临.体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞生物学特性变化[J].江西医药.2012
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[5].黄英华,韦瑛,蔡捷,朱名毅,李小平.人骨髓间充质干细胞体外长期传代培养及恶性转化趋势实验研究[J].中国临床新医学.2009
[6].黄畅,朱文彪,朱海林,汪保和,王绮如.小鼠骨髓内皮细胞系的长期传代培养和生物学特性鉴定[J].中国实验血液学杂志.2007
[7].孙健,宋振岚.长期培养人急性髓系白血病骨髓基质上清液对早幼粒白血病细胞的影响[J].中国组织工程研究与临床康复.2007
[8].孙健,宋振岚.长期培养自体骨髓基质上清中白细胞介素3、白细胞介素6及肿瘤坏死因子和干扰素水平的变化[J].中国组织工程研究与临床康复.2007
[9].张明伟,于晓妉,郭子宽,吴英,江小霞.体外长期培养对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响[J].组织工程与重建外科杂志.2005
[10].文德敏,周燕,华平,谭文松.人胚胎骨髓基质干细胞的长期培养及体外成骨特性[J].华东理工大学学报.2004
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