circ-PTBP3对血肿瘤屏障通透性的影响

论文摘要

目的探讨环状RNA （circRNAs） circ-PTBP3 （hsacirc0088072）在胶质瘤微血管内皮细胞（GECs）中的表达,以及circ-PTBP3对血肿瘤屏障（BTB）通透性的调控作用。方法构建血脑屏障与BTB模型,应用q RT-PCR检测正常脑微血管内皮细胞（ECs）与GECs中circ-PTBP3的表达水平。RNase R验证circ-PTBP3对其的抵抗作用。建立circ-PTBP3稳定沉默的GECs,用跨内皮阻抗值（TEER）检测屏障的完整性,通透性测定检测屏障的通透性,Western blotting和免疫荧光实验检测紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin与claudin-5的表达与分布。结果 circ-PTBP3在GECs中高表达,沉默circ-PTBP3可显著降低BTB的TEER值,增加BTB的通透性,减少紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin与claudin-5的表达与分布。结论沉默circ-PTBP3可显著增加BTB的通透性,减少紧密连接相关蛋白的表达。circ-PTBP3可能成为开放BTB的分子靶标,有效提高胶质瘤的治疗效果。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 细胞：
•     1.1.2 试剂：
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞培养：
•     1.2.2 体外血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）与BTB模型的建立：
•     1.2.3 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）:
•     1.2.4 细胞转染：
•     1.2.5 跨内皮阻抗（transendothelial electric resistance,TEER）值的测量：
•     1.2.6 通透性检测：
•     1.2.7 Western blotting检测：
•     1.2.8 免疫荧光染色实验：
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 circ-PTBP3在GECs中高表达
•   2.2 RNase R处理后circ-PTBP3在GECs中高表达
•   2.3 沉默circ-PTBP3破坏BTB的完整性并增加其通透性
•   2.4 沉默circ-PTBP3降低GECs中紧密连接相关蛋白的表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 马珺,姚一龙,阮雪蕾,沈书园,邵连奇,薛一雪

关键词: 环状,血肿瘤屏障,通透性,胶质瘤

来源: 中国医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 神经病学,肿瘤学

单位: 中国医科大学生命科学学院神经生物学教研室,中国医科大学附属盛京医院神经外科

基金: 国家自然科学基金（81602725,81573010）,辽宁省自然科学基金重点项目（20170520441）,辽宁省博士科研启动基金（201601123,20170520047）,沈阳市科技计划（17-231-1-46）

分类号: R739.4

页码: 1057-1062

总页数: 6

文件大小: 1220K

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