骨骼退变再生过表达GDF-5人诱导多功能干细胞的体外髓核样细胞分化实验研究

骨骼退变再生过表达GDF-5人诱导多功能干细胞的体外髓核样细胞分化实验研究

论文摘要

目的:评估转染GDF-5基因人多功能诱导干细胞能否向髓核样细胞分化。方法:从大鼠腰椎椎间盘取材后进行大鼠髓核细胞的分离与培养,iPS细胞培养按照不同培养分化条件分为A、B、C、D、E以及对照组共6组进行,分别依次为iPS-GDF5与髓核细胞共培养组,温敏水凝胶包载iPS-GDF5与髓核细胞三维共培养组,iPS-GDF5培养组,温敏水凝胶载iPS-GDF-5三维培养组,iPS添加细胞因子GDF-5组,人多功能诱导干细胞使用iPS完全培养基进行正常培养作为对照组。各组细胞体外培养14天后,收集细胞行Real-time PCR检测Sox9、ColⅡ、Col I、Aggrecan基因表达情况,Western Blot检测检测Sox9、ColⅡ、Col I、Aggrecan蛋白表达情况。结果:成功培养出大鼠髓核细胞,各组细胞培养14天后,Real-time PCR、Western Blot结果显示三种髓核样细胞标记物Sox9、ColⅡ、Aggrecan的基因和蛋白表达水平,A、B组均明显高于空白对照组(P<0.05),而各组之间成骨标志物Col I表达无明显差异。结论:转染GDF5基因人诱导多功能细胞与髓核细胞共培养后可分化为髓核样细胞。

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文章来源

类型: 国内会议

作者: 李熙雷,幸嵘,周晓岗,林红,董健

关键词: 生长分化因子,髓核细胞,椎间盘

来源: 2019楚天骨科高峰论坛暨第二十六届中国中西医结合骨伤科学术年会 2019-09-10

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学,外科学

单位: 复旦大学附属中山医院骨科

分类号: R329.2;R68

DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.018986

页码: 290

总页数: 1

文件大小: 690k

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骨骼退变再生过表达GDF-5人诱导多功能干细胞的体外髓核样细胞分化实验研究
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