无血清论文_闫磊,王拥军,赵海波,王玮,贺亮

导读:本文包含了无血清论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:血清,培养基,细胞,病毒,干细胞,流感,载体。

无血清论文文献综述

闫磊,王拥军,赵海波,王玮,贺亮[1](2019)在《微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒的效果》一文中研究指出目的探讨利用生物反应器微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的效果。方法利用生物反应器,将人二倍体细胞2BS培养至在微载体上形成单层后,分别采用BD008无血清培养基及含有2%新生牛血清的MEM维持液按MOI为0. 004~0. 008感染VZV毒种;当细胞呈现70%细胞病变效应(cytopatho-genic effect,CPE)时,无血清培养的细胞沉淀经PBS洗涤1次,含血清培养基培养的细胞洗涤1~3次后收获,分别制备3批VZV原液;噬斑法检测病毒滴度,ELSIA法检测牛血清白蛋白残留量,并对制备的水痘减毒活疫苗(live attenuated varicella vaccine,VarV)进行热稳定性检测。结果洗涤1~3次获得的3批含血清培养VZV原液滴度从5. 00 lgPFU/mL降至4. 12 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为203. 2、120. 3和81. 2 ng/mL,前2批超出合格范围(≤100 ng/mL)。洗涤1次获得的3批无血清培养VZV原液滴度分别为4. 92、5. 00和5. 30 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为75. 2、82. 3和71. 9 ng/mL,均值低于洗涤1及2次含血清培养VZV原液(P <0. 05)。3批无血清培养的VarV热稳定性均符合要求。结论获得的无血清培养的VZV原液滴度及牛血清白蛋白残留量均符合《中国药典》叁部(2015版)标准,本研究为提高VarV质量及生物反应器微载体工艺改进提供了参考。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年12期)

王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺[2](2019)在《昆虫细胞无血清培养基的研究》一文中研究指出为开发昆虫细胞无血清悬浮培养基,以基础培养基Grace's Insect medium为基础,添加葡萄糖、水解乳蛋白、酵母粉和PF-68等组份后,分别接种Sf-21、Hi-five两种昆虫细胞进行无血清悬浮培养。结果显示:两株昆虫细胞生长均较好,均能够很好的全悬浮生长,Sf-21细胞最高密度可达(39.8±2.6)×105/ml,Hifive细胞最高密度可达(44.4±1.0)×105/ml。本研究为昆虫细胞培养提供一种无血清悬浮培养基配方,为我国利用昆虫细胞杆状病毒表达系统生产生物制品提供基础保障。(本文来源于《甘肃畜牧兽医》期刊2019年11期)

刘华敏,漆彦斌,雷志斌[3](2019)在《CHO-K1细胞的悬浮驯化及无血清培养》一文中研究指出以CHO-K1细胞为研究对象,首先对贴壁细胞进行了悬浮驯化,之后比较了自配无血清培养基CHO-SFM、Sigma Ex-CELL CD CHO培养基和Gibco CD CHO培养基驯化悬浮细胞CHO-K1-S的培养效果。在相同实验条件下,统计细胞的增长率和存活率。结果表明,自配无血清培养基CHO-SFM优于Sigma CD-CHO和Gibco CD-CHO两种商业化培养基。(本文来源于《顺德职业技术学院学报》期刊2019年04期)

魏金凤,侯蕾蕾,杨康利,王进产,李文龙[4](2019)在《无血清悬浮培养BHK21细胞增殖伪狂犬病毒的参数研究》一文中研究指出旨在筛选适合生物反应器悬浮培养BHK21细胞的无血清培养基,并利用该技术培养伪狂犬病毒。通过筛选市售的无血清培养基,以细胞形态、细胞活率和增殖倍数作为驯化指标,对BHK21细胞进行无血清驯化;对使用10 L和40 L生物反应器无血清悬浮培养BHK21细胞的参数进行研究;同时利用筛选的无血清培养基和悬浮细胞进行伪狂犬病毒增殖测试。结果表明,市售培养基Ⅰ符合筛选要求,其培养的细胞形态比较均一,结团少,细胞生长2 d的增殖倍数为3.5倍,细胞活率在95%以上;生物反应器悬浮培养BHK21细胞的最适参数为转速80 r/min、pH值7.2、DO 60%;利用该工艺技术培养伪狂犬病毒,当接种细胞密度为6×10~6 cells/mL,接毒剂量为0.3%时,48 h收获的病毒液滴度可达10~(9.5) TCID_(50)/mL。该试验实现了伪狂犬病毒的无血清悬浮生产,为其生产工艺的优化提供了可能。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2019年09期)

史文凤,刘海波[5](2019)在《无血清培养液流感病毒分离效果分析》一文中研究指出目的对比分析有无血清培养液流感病毒分离效果。方法收集流感哨点医院发病3天内流感样病例咽拭子720份,采用荧光定量PCR法检测流感病毒核酸及分型,犬肾细胞(MDCK)培养法进行病毒分离,细胞病变观察和微量血凝实验(HA)检测病毒是否分离成功并测定HA价。结果 720份标本中病毒核酸阳性130份,阳性率为18.06%。130份阳性标本,采用含血清培养液病毒分离阳性68份,阳性率为52.31%(68/130),其中H1N1亚型6份,H3N2亚型2份,BV亚型58份,BY亚型2份;无血清培养液病毒分离阳性100份,阳性率为76.92%(100/130),其中H1N1亚型12份,H3N2亚型21份,BV亚型63份,BY亚型4份。两种方法分离差异有统计学意义(χ2=17.23,P<0.01),其中含血清培养液培养后无血凝滴度标本32份,用无血清培养液培养后血凝滴度在11~1256,且BV和BY亚型血凝滴度较高。结论无血清培养液较有血清培养液流感病毒分离效果更好。(本文来源于《江苏预防医学》期刊2019年05期)

刘天伦,郎洪彬,孔飒[6](2019)在《PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究》一文中研究指出目前PK15细胞主要用于生产猪圆环病毒2型,传统的培养工艺为滚瓶系统或微载体系统,该两种培养系统都存在各自的劣势。驯化一株全悬浮的PK15细胞可推进工艺的进一步升级,降低成本的同时也简化了培养工艺且更易于产业化。经贴壁降血清培养、低血清悬浮优化传代、无血清悬浮传代培养,对一株贴壁的PK15细胞进行了无血清的全悬浮驯化。传代23次后,该株细胞无血清全悬浮培养初始密度为0. 5×106/m L,在72 h密度可增殖到4. 0×106/m L左右,形态良好,倍增时间稳定,且细胞活率达到95%以上,命名为PK15-S,为大规模培养PK15细胞提供了理论依据。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2019年09期)

段永娟,王文天,魏晓晶,杨洋,赵慧娟[7](2019)在《无血清培养体系对脐带血CD34~+细胞定向红系分化影响的比较》一文中研究指出目的:通过3种无血清红系定向诱导分化培养体系比较,优化培养体系诱导脐带血干/祖细胞(HSPC)体外红系定向分化,以满足基础研究与临床应用。方法:应用磁珠分选脐带血单个核细胞中的CD34~+细胞;分别接种到3种培养体系(1、2、3)中并采用3阶段培养法诱导CD34~+细胞红系定向分化,在分化不同阶段进行细胞计数,瑞氏吉姆萨染色,应用流式细胞术检测细胞表面CD71、CD235a的表达,集落形成能力检测鉴定红系分化的进程。结果:体系2促HSPC增殖能力最强,体系3促红系分化效果最佳。体系2培养的细胞增殖能力均明显高于体系1、2(P <0.05);FACS分析显示,红系表面分子CD71、CD235a在体系3培养的细胞表面表达最高,分化d 15 CD235a+百分率高达(92.23±3.89)%,体系2为(84.67±3.12)%,体系1为(72.17±6.83)%(P <0.05);细胞形态学染色显示,体系3培养的细胞在分化d 12的晚幼红细胞比例为(67.67±2.08)%,是体系2的10.69倍、体系1的25.34倍(P <0.05);造血集落形成实验发现在体系3中d 3-9形成的BFU-E比例逐渐升高(r=0.99, P <0.05),体系3中BFU-E形成比率明显高于体系1、2(P <0.05)。结论:通过比较3种培养体系,筛选出体系3是促进CD34~+细胞体外红系分化最有效的体系,体系2是促增殖最有效的体系。本研究为进一步提高HSPC体外红系增殖与诱导效率奠定了技术基础,也为研究红系分化调控机制提供了体外培养体系。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年03期)

缪亚娜,熊文典,万爱妮,张晶晶,蔡燕飞[8](2019)在《表达HSA/IL2的重组CHO细胞的无血清培养基优化研究》一文中研究指出优化适合重组CHO细胞生长及表达人血清白蛋白与白介素2(HSA/IL2)的低成本无血清悬浮培养基。以无血清悬浮培养基M1为基础,考察了3种不同质量浓度(1.0、2.5、5.0、10.0 g/L)的蛋白水解物(酵母提取物(YE)、大豆蛋白胨(Soy)及胰蛋白胨(Tyr))对CHO细胞生长、细胞周期、细胞凋亡及HSA/IL2融合蛋白表达的影响。5 g/L的YE促进细胞生长,提高HSA/IL2表达量的效果最佳。流加培养过程中,在含5.0 g/L YE的培养基中CHO细胞密度可达9.95×10~6cells/mL,HSA/IL2表达量提高至104.06 mg/L,分别是对照组的1.42倍和1.51倍。细胞对数生长期时,YE可以提高细胞周期进展而利于细胞生长;细胞表达期时,YE可以提高细胞G1期比例,延长细胞表达期时间而利于HSA/IL2表达。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2019年06期)

韩颢,白虹[9](2019)在《无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究》一文中研究指出目的:探讨无血清培养基对冻存后的间充质干细胞(HUC-MSCs)免疫调节功能的影响,明确其成脂成骨生物学特性,为临床应用奠定基础。方法:(1)分离脐带中的HUC-MSCs,传代纯化后深低温冻存。(2)冻融后的HUC-MSCs分别以含10%胎牛血清的培养基(SCM),无血清培养基两种培养条件培养。(3)观察两组细胞生长状态,革兰染色计数,计算细胞活率。(4)流式细胞术检测两组细胞的表面标志物。(5)成脂成骨诱导,茜红素染色和油红染色观察诱导情况。结果:(1)两组细胞均以漩涡状贴壁,无血清培养基培养的细胞体积略小。(2)在细胞总数及活性方面,两组细胞有些微差异,可忽略不计。(3)流式细胞术显示其对PE-CD34不表达,对PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表达。(4)对无血清培养基(SFM)所培养得到的HUC-MSCs历经约21 d的成骨细胞和脂肪细胞专向分化诱导,发现其具有可媲美SCM培养的HUC-MSCs的分化能力。结论:无血清培养基同有血清培养基相比,对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫调节功能无明显差异,可替代有血清培养基进行细胞培养。(本文来源于《天津医科大学学报》期刊2019年03期)

张童[10](2019)在《胚胎干细胞无血清培养过程的研究》一文中研究指出胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)具有自我更新和多向分化潜能,在科学研究和临床医学领域具有巨大的应用前景,但要实现其实际应用价值必须克服干细胞数量稀少的瓶颈问题,因此,亟需建立高效、可控的ESCs培养过程。为此,本文以鼠胚胎干细胞(Mouse embryonic stem cells,mESCs)为研究对象,首先考察了饲养层的制备方法、血清对mESCs扩增特性的影响。结果发现:采用丝裂霉素处理制备的饲养层支持mESCs扩增效果优于固定化饲养层;采用明胶代替饲养层同样能支持mESCs稳定扩增并维持未分化状态;培养基血清浓度达5%既能支持mESCs的扩增也能使其维持未分化状态,据此建立了以明胶为饲养层、血清替代物代替血清的mESCs的无血清培养体系,该体系中mESCs的扩增倍数可达到2.95±0.5倍,SSEA-1+细胞比例在80%以上。在此基础上,分别考察了GSK3、MEK及FGFR抑制剂叁类小分子化合物种类及相互作用对mESCs扩增及全能性维持的影响。结果发现:与对照组相比,GSK3抑制剂(BIO及SB-216763)都能促进总细胞增殖,但会明显降低SSEA-1+细胞的比例;MEK和FGFR抑制剂均有利于mESCs的扩增;GSK3抑制剂SB-216763与MEK抑制剂(PD184352、PD0325901)或FGFR抑制剂(SU5402)中的一种或二种组合均可以促进mESCs的扩增;特别是SB-216763+PD0325901+SU5402组合不仅能促进总细胞扩增,还能显着提高SSEA-1+细胞比例,培养3代后总细胞扩增倍数和SSEA-1+细胞的比例可达318.78±47.95和80%以上明显高于对照组的38.89±18.44和70%左右(p<0.05)。其次,采用转瓶在无血清培养体系中考察了mESCs在Cytodex3微载体上的扩增特性,培养到第5天时mESCs扩增倍数最大可达到31.68±7.74倍明显高于静态培养时的17.92±9.80(p<0.05),SSEA-1+细胞比例在85%以上,且AKP染色及Oct4免疫荧光染色均呈阳性,实现了mESCs无血清无饲养层的动态悬浮培养。以上研究结果为胚胎干细胞的规模化制备技术的开发提供了依据。(本文来源于《华东理工大学》期刊2019-05-08)

无血清论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为开发昆虫细胞无血清悬浮培养基,以基础培养基Grace's Insect medium为基础,添加葡萄糖、水解乳蛋白、酵母粉和PF-68等组份后,分别接种Sf-21、Hi-five两种昆虫细胞进行无血清悬浮培养。结果显示:两株昆虫细胞生长均较好,均能够很好的全悬浮生长,Sf-21细胞最高密度可达(39.8±2.6)×105/ml,Hifive细胞最高密度可达(44.4±1.0)×105/ml。本研究为昆虫细胞培养提供一种无血清悬浮培养基配方,为我国利用昆虫细胞杆状病毒表达系统生产生物制品提供基础保障。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

无血清论文参考文献

[1].闫磊,王拥军,赵海波,王玮,贺亮.微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒的效果[J].中国生物制品学杂志.2019

[2].王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺.昆虫细胞无血清培养基的研究[J].甘肃畜牧兽医.2019

[3].刘华敏,漆彦斌,雷志斌.CHO-K1细胞的悬浮驯化及无血清培养[J].顺德职业技术学院学报.2019

[4].魏金凤,侯蕾蕾,杨康利,王进产,李文龙.无血清悬浮培养BHK21细胞增殖伪狂犬病毒的参数研究[J].畜牧与饲料科学.2019

[5].史文凤,刘海波.无血清培养液流感病毒分离效果分析[J].江苏预防医学.2019

[6].刘天伦,郎洪彬,孔飒.PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究[J].中国兽药杂志.2019

[7].段永娟,王文天,魏晓晶,杨洋,赵慧娟.无血清培养体系对脐带血CD34~+细胞定向红系分化影响的比较[J].中国实验血液学杂志.2019

[8].缪亚娜,熊文典,万爱妮,张晶晶,蔡燕飞.表达HSA/IL2的重组CHO细胞的无血清培养基优化研究[J].食品与生物技术学报.2019

[9].韩颢,白虹.无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究[J].天津医科大学学报.2019

[10].张童.胚胎干细胞无血清培养过程的研究[D].华东理工大学.2019

论文知识图

转基因载体piggyantiIE-lef1-neo图谱、PD98059和AKTIIV抑制D...信号活化确实参与了Daintain/...卵巢癌A2780细胞于含10%牛血清1640培养...:ELISA检测血清中TNF-α,每组5只小...:第一部分研究示意图细胞随机分为两...

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