导读:本文包含了原核系统论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,分子,序列,品系,草鱼,基质,甜菜。
原核系统论文文献综述
吴惠惠,黄浩,易敏,杨爱芬,杜君卿[1]（2019）在《一种新的分子内可自剪切多肽介导的可视化原核蛋白质表达系统》一文中研究指出通过在目标蛋白和荧光蛋白等标签蛋白之间引入可引起分子内剪切的多肽是监测蛋白质表达的重要方法.通过将小鼠MYRF的介导其分子内自剪切的ICA结构域插入到目标蛋白和指示蛋白mCherry之间,既实现了对融合蛋白表达的直接观察,同时实现了融合蛋白的高效自剪切,并释放出游离的目标蛋白.实验证明,该可视化蛋白质表达系统可在原核细胞中有效的表达不携带标签序列的目标蛋白.(本文来源于《杭州师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
郭育,魏炳旭,栗慧超,李晅,王壹[2]（2019）在《原核分子伴侣素系统中关键“标签肽”的分子设计》一文中研究指出如何保持特定蛋白质的稳定性是蛋白质研究与应用中的关键问题。分子伴侣素chaperonin(Cpn)是稳定蛋白质的重要因子,大肠杆菌的GroEL/ES系统是研究最透彻的分子伴侣,被广泛用于稳定蛋白质。但该系统的蛋白质底物特异性低,因此对特定蛋白的辅助折迭效率低下。我们前期研究发现一类特殊的古细菌Cpn,(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
宋瑞滨,邵泽良,宋军[3]（2019）在《黄山头包包曲发酵过程中原核微生物群落16SrDNA基因系统发育解析》一文中研究指出曲为研究对象,通过提取各阶段包包曲的总DNA、16SrDNA扩增产物分析、DGGE图谱分析、DNA序列测定和系统发育关系分析,结果显示黄山头包包曲中优势种群结构变化较明显,且各阶段群落结构和优势菌种群呈现一定的动态规律性变化,原核微生物多样性较丰富,主要包括细菌和放线菌,其中细菌占绝大部分,以芽孢杆菌、杆菌、球菌为主,芽孢杆菌数量和种类较多,球菌和杆菌种类相对较少,放线菌以单一以链霉菌为主。(本文来源于《酿酒》期刊2019年02期）
于冰,刘祥,李海英[4]（2019）在《甜菜M14品系BvM14-STPK蛋白激酶在原核表达系统中的低温诱导表达及纯化》一文中研究指出为获得纯化的BvM14-STPK蛋白激酶,采用低温16℃,0.5 mmol/L IPTG对转Bv M14-STPK的大肠杆菌进行诱导,利用Ni2+亲和层析技术对菌液上清进行纯化,并利用SDS-PAGE对纯化蛋白进行检测。结果表明37℃,0.5 mmol/L IPTG诱导后,BvM14-STPK蛋白以包涵体形式存在,不能对目的蛋白进行纯化分析研究;通过优化诱导条件,在低温16℃,0.5 mmol/L IPTG过夜诱导,在上清中获得大量BvM14-STPK可溶性目的蛋白,对菌液上清纯化并经SDS-PAGE检测到BvM14-STPK目的蛋白。在目的蛋白纯化过程中,发现150 mmol/L咪唑洗脱液纯化BvM14-STPK目的蛋白效果最好。本研究成功纯化出目的蛋白BvM14-STPK。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年03期）
孟娇,刘丁玉,黄灿,韩北忠,陈晶瑜[5]（2019）在《CRISPR/Cas基因编辑系统在原核微生物细胞工厂构建中的开发与应用》一文中研究指出随着能源和环境问题的日益突出,化学品以及燃料的合成方式正逐渐由传统的化学法合成转变为以细菌为基础的生物炼制过程,其中最关键问题是需要开发出合适的基因工程工具用于构建相应的产品生产菌株。成簇的规律间隔短回文重复序列(Clusteredregularlyinterspacedshortpalindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)系统是一种存在于细菌和古细菌中的免疫系统,能够用于抵御病毒和外源质粒的入侵,近年来被开发成为一种高效、便捷、精确的基因编辑工具,显示出巨大的应用潜力。本文立足于CRISPR/Cas系统的原理与最新分类,结合实例综述了CRISPR/Cas基因编辑系统在原核微生物细胞工厂构建中的建立与优化策略,以及主要的应用方向,并探讨该系统所面临的主要问题并提出了一些可行的解决方案。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年10期）
韩少杰,柴同杰[6]（2018）在《重组鸡白细胞介素2原核表达系统的构建及对鸡叁联灭活苗免疫增强效果的研究》一文中研究指出引言白细胞介素2(Intcrleukcin-2,IL-2)是由淋巴细胞产生的一种淋巴因子,它能激活T细胞,促进B细胞分化及分泌抗体,诱导干扰素γ产生,增强单核细胞以及自然杀伤细胞的杀伤活性,在机体的免疫反应中发挥着十分重要的调节作用,是一种天然的免疫增强剂。本研究拟构建鸡白介素(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集》期刊2018-11-16）
李小余,任斌,张慧,周洪昌,李华[7]（2018）在《淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB原核表达系统的构建及其序列分析》一文中研究指出采用PCR技术扩增淋病奈瑟菌临床菌株的外膜蛋白PorB基因,并将其插入到原核表达载体pET42a多克隆位点中,构建重组表达载体.后经IPTG诱导,SDS-PAGE检测表达结果.结果表明,淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB基因的原核表达系统构建成功,将为淋球菌诊断试剂盒及淋球菌疫苗的研究提供依据.(本文来源于《湖州师范学院学报》期刊2018年08期）
盛佳璐,宗乾坤,喻飞,王浩,吕利群[8]（2018）在《利用原核及真核表达系统体外表达草鱼Ⅱ型呼肠孤病毒外突VP56蛋白的研究》一文中研究指出草鱼Ⅱ型呼肠孤病毒是当前引起我国草鱼出血病的主要流行毒株,VP56是其外层衣壳上的唯一突起蛋白并有可能在病毒入侵阶段发挥核心作用,但该蛋白的具体功能尚不清楚。为了探讨VP56的生物学功能,分别利用大肠杆菌原核表达系统和杆状病毒真核表达系统研究了VP56的体外表达特性。首先从GCRVJX02W株的细胞感染混合物中抽提总RNA,并通过RT-PCR方法获得目的基因VP56,分别克隆至pGEX-4T-3及pFastBacHTA载体上,将质粒pGEX-4T-3-VP56转化至BL21(DE3),经IPTG诱导后,成功表达融合蛋白GST-VP56,大小为83ku,以包涵体形式存在;蛋白经纯化后免疫老鼠,制备了VP56的多克隆抗体,可以和rVP56产生特异性免疫结合。将pFastBacHTA-VP56转化至DH10Bac,成功转座后,提取重组杆粒DNA并鉴定且测序正确后转染SF9昆虫细胞。结果表明,自转染96h起,转染杆粒的细胞生长停滞,不断裂解。Westernblot结果显示,细胞表达重组蛋白His-VP56,大小约为62ku,为可溶蛋白。本研究利用原核表达系统和真核表达系统体外表达了VP56蛋白,制备了抗VP56多克隆抗体,为深入研究VP56蛋白在病毒入侵时的生物学功能奠定了基础。(本文来源于《上海海洋大学学报》期刊2018年04期）
高永辉,肖斌,刘明,廖扬,唐荣芝[9]（2018）在《GRIK3胞内区蛋白在原核系统中的表达和纯化》一文中研究指出目的利用原核细胞体系表达、纯化GRIK3胞内区蛋白。方法构建带有His标签的GRIK3胞内区蛋白原核表达质粒p Czn1-GRIK3-intra,转化至大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达His-GRIK3-intra融合蛋白后,Ni柱亲和层析纯化获得的目的蛋白。结果成功构建插入序列正确的GRIK3胞内区原核表达质粒,该质粒能在E.coli中高效表达GRIK3胞内区蛋白;经Ni柱亲和层析后获得了纯化的目的蛋白。结论成功表达和纯化出GRIK3胞内区蛋白,为探索膜蛋白GRIK3的胞内信号转导机制奠定了基础。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2018年12期）
张钰[10]（2018）在《rhAm原核/真核表达系统的构建及其生物学活性研究》一文中研究指出目的:临床上牙周疾病治疗的终极目标在于恢复牙周组织原有的结构和功能—即牙周组织再生,形成牙周新附着。尽管从猪的牙胚中提取的釉基质蛋白(Enamel matrix proteins,EMPs)已经用于了被病变破坏的牙周组织的修复,实现牙周组织的功能性重建,但商品化的EMPs仍存在获取来源限制,获取方法耗时耗力等诸多问题。近年来,有研究者们提出釉原蛋白(amelogenin,Am)是EMPs促进牙周组织再生的主要活性成分,有望代替EMPs用于牙周组织再生。因此,本实验通过基因工程技术构建原核和真核表达系统,分别在E.coli WK6、毕赤酵母GS115以及HEK 293F中表达并纯化出rhAm,将hPDLFs与HS-5作为靶细胞,初步探究不同来源的rhAm对其生物学特性的影响,为rhAm后续开发应用奠定实验基础。方法:(1)利用基因克隆方法获取hAm-His基因,插入pET-22b载体,构建编码hAm-His重组蛋白的原核表达质粒pET-22b-Am-His。借助电转化技术将表达质粒导入大肠杆菌WK6中进行诱导表达,目的蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western Blotting对其进行鉴定。(2)利用基因克隆方法获取hAm-His基因,插入pCMV载体/pPIC9K载体,构建编码hAm-His重组蛋白的真核表达质粒pCMV-Am-His/pPIC9K-Am-His。借助瞬时基因转染技术将重组质粒pCMV-Am-His导入HEK 293F细胞,借助电转化技术将重组质粒pPIC9K-Am-His导入毕赤酵母GS115菌株。目的蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western Blotting检测对其进行鉴定。(3)用MTT检测,划痕实验,ALP检测试剂盒以及Western Blotting检测等方法比较不同来源的rhAm对hPDLFs和HS-5增殖、迁移、粘附以及细胞中ALP水平的影响和对HS-5中成骨分化标志物蛋白表达的影响。结果:(1)通过SDS-PAGE和Western Blotting检测的鉴定,在E.coli WK6及HEK293F细胞中获得了分子量约25kDa的rhAm。(2)大肠杆菌表达系统与哺乳动物细胞表达系统所表达的rhAm均能显着促进hPDLFs和HS-5的增殖、迁移、粘附和细胞内ALP水平的上调,还能促进HS-5中I型胶原、RunX2的表达,且二者的作用效果无显着性差异。结论:大肠杆菌表达系统与哺乳动物细胞表达系统所表达的rhAm都具有生物活性,且它们的生物活性相似。(本文来源于《暨南大学》期刊2018-06-30）
原核系统论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
如何保持特定蛋白质的稳定性是蛋白质研究与应用中的关键问题。分子伴侣素chaperonin(Cpn)是稳定蛋白质的重要因子,大肠杆菌的GroEL/ES系统是研究最透彻的分子伴侣,被广泛用于稳定蛋白质。但该系统的蛋白质底物特异性低,因此对特定蛋白的辅助折迭效率低下。我们前期研究发现一类特殊的古细菌Cpn,
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原核系统论文参考文献
[1].吴惠惠,黄浩,易敏,杨爱芬,杜君卿.一种新的分子内可自剪切多肽介导的可视化原核蛋白质表达系统[J].杭州师范大学学报(自然科学版).2019
[2].郭育,魏炳旭,栗慧超,李晅,王壹.原核分子伴侣素系统中关键“标签肽”的分子设计[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[3].宋瑞滨,邵泽良,宋军.黄山头包包曲发酵过程中原核微生物群落16SrDNA基因系统发育解析[J].酿酒.2019
[4].于冰,刘祥,李海英.甜菜M14品系BvM14-STPK蛋白激酶在原核表达系统中的低温诱导表达及纯化[J].中国农学通报.2019
[5].孟娇,刘丁玉,黄灿,韩北忠,陈晶瑜.CRISPR/Cas基因编辑系统在原核微生物细胞工厂构建中的开发与应用[J].微生物学通报.2019
[6].韩少杰,柴同杰.重组鸡白细胞介素2原核表达系统的构建及对鸡叁联灭活苗免疫增强效果的研究[C].中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集.2018
[7].李小余,任斌,张慧,周洪昌,李华.淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB原核表达系统的构建及其序列分析[J].湖州师范学院学报.2018
[8].盛佳璐,宗乾坤,喻飞,王浩,吕利群.利用原核及真核表达系统体外表达草鱼Ⅱ型呼肠孤病毒外突VP56蛋白的研究[J].上海海洋大学学报.2018
[9].高永辉,肖斌,刘明,廖扬,唐荣芝.GRIK3胞内区蛋白在原核系统中的表达和纯化[J].实用医学杂志.2018
[10].张钰.rhAm原核/真核表达系统的构建及其生物学活性研究[D].暨南大学.2018
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