导读:本文包含了噬菌体呈现文库论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:噬菌体,抗体,文库,肿瘤,基因,蛋白,表面。
噬菌体呈现文库论文文献综述
赵泽文,梁志清,史常旭,常青,李军[1]（2008）在《抗人Endoglin胞外段单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建/筛选及鉴定》一文中研究指出目的构建抗人Endoglin胞外段的特异性单链抗体(single chain variable fragment,scFv)噬菌体表面呈现文库。方法用重组人Endoglin(recombinant human Endoglin,rhEndoglin)胞外段蛋白免疫Balb/c小鼠,提取脾脏组织mRNA,经RT-PCR分别扩增出VH(heavy chain variable region)、VL(light chain variable region)基因,经Linker连接成scFv基因,再把scFv基因重组到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化到大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7拯救后建成噬菌体呈现文库。用rhEndoglin对文库进行5轮吸附-洗脱-富集panning淘筛,选择ELISA结果最强的克隆提取质粒并测序。结果经过筛选,随机挑取94个克隆进行ELISA检测,37个克隆呈阳性。序列分析表明,该scFv DNA全长738bp。其中VH基因366bp,编码122个氨基酸残基,VL基因327bp,编码109个氨基酸残基,它们之间通过(Gly4Ser)3组成的15肽连接。结论成功构建了抗人Endoglin胞外段scFv噬菌体表面呈现文库,并筛选获得一个能与Endoglin特异结合的重组噬菌体克隆。(本文来源于《华南国防医学杂志》期刊2008年04期）
杜辉,王建,辛晓燕,郑维国[2]（2003）在《抗人卵巢癌单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建、初步筛选及鉴定》一文中研究指出目的 :构建抗人卵巢癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库 .方法 :利用噬菌体表面呈现技术 ,构建基因文库 ,经过panning筛选富集后 ,用ELISA方法检验抗原结合活性 .结果 :从单个噬菌体克隆中筛选到 2 6个具有抗原结合活性的阳性克隆 .结论 :噬菌体表面呈现技术为构建抗人卵巢癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库提供了一条更为有效的新途径(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2003年06期）
韩者艺[3]（2001）在《胃癌相关抗原模拟表位的筛选鉴定及人源性抗体噬菌体表面呈现文库的构建》一文中研究指出肿瘤抗原和表位在诱导机体产生抗肿瘤免疫应答方面起着十分重要的作用。理想的表位疫苗应包含一组优化的CTL表位、Th表位和B细胞表位。因此，筛选并鉴定肿瘤B细胞表位对肿瘤疫苗设计具有重要意义。利用噬菌体表面呈现技术可构建含有大量的具有不同结构和组成信息的噬菌体呈现表位文库；这一技术以其高效的可筛性、有效的放大性和基因型与表型的相连性等几大特色在蛋白质的相互作用研究中占据了重要地位。由于可以用抗体作为筛选的配基通过噬菌体呈现的随机肽库来寻找相应的抗原或抗原表位，而且不需要预先知道抗原分子本身的结构及组成，因此近年来此项技术在肿瘤诊断试剂和疫苗研制方面的应用潜力日益受到重视。 本研究以MGb1-Ab为筛选配基，应用噬菌体随机肽库筛选技术，对胃癌相关抗原MGb1-Ag的模拟表位进行筛选，并检测筛选所得的噬菌体克隆与MGb1-Ab的结合活性，以及阻断MGb1-Ab与胃癌细胞系KATO-Ⅲ结合的能力，一 进而将所得的噬菌体免疫小鼠，检测噬菌体呈现多肽的免疫原性，旨在获得 MGb IAg的多肽模拟表位，为胃癌表位疫苗的设计提供依据。 本研究共进行叁轮生物淘洗，滴定每轮产出噬菌体的滴度，计算噬菌体 的产率。结果显示，噬菌体的产率富集了约200倍。 经ELISA初筛，从第叁轮淘洗的噬菌体中挑取10个克隆，经DNA测序 后推导出呈现随机肽的氨基酸序列。依据氨基酸序列同源程度，得到保守的 表位信息，结果提示：H（X）Q、LXS是出现频率较高的表位基序。 采用ELISA法检测阳性噬菌体呈现多肽与MGbl个 的结合活性，结果显 示阳性噬菌体呈现多肽均能与 MGb IAb发生特异性结合反应，而与无关单抗 的结合较弱。阻断实验的结果表明阳性噬菌体呈现多肽均能部分抑制 MGb IAb与 KATO—Ill细胞的结合，抑制率为 20％－40％。 用阳性噬菌体呈现多肽兔疫Babl八小鼠，研究了噬菌体呈现模拟表位 的免疫原性。经ELISA和 FACS检测，得到一株噬菌体呈现多肽，其诱导的 免疫血清可与胃癌细胞KATO｛ 发生特异性结合反应，为胃癌多肽疫苗的设 计奠定了初步基础。(本文来源于《第四军医大学》期刊2001-05-01）
高辉,杨安钢,高磊,任向荣,余宙耀[4]（2001）在《人源性抗HBsAg抗体Fab段噬菌体呈现文库的构建、筛选及阳性克隆核苷酸序列测定》一文中研究指出目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物克隆进载体pComb3H相应的位点 ,构建成噬菌体呈现库 ,并以HBsAg包被的 96孔板对抗体库进行 3轮淘筛 ,将所获克隆分别与HBsAg进行ELISA反应 ,挑取显色大于对照 2 0倍以上的阳性克隆进行DNA测序。结果 :lgG1的Fd段和κ轻链cDNA得到扩增 ,构建了一实际库容量为 1 8× 10 5 的噬菌体呈现文库。通过特异性淘筛 ,获得与HBsAg有较高新合力的 3株Fab抗体并测定其编码序列。DNA序列测定结果表明 ,3株抗体中两株的Fd段完全一样 ,且 3株的轻链完全一样。结论 :成功构建了一个经HBsAg抗原免疫的人源抗体Fab段噬菌体抗体库 ,筛选得到了 3株特异性抗体的Fab片段。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2001年04期）
白雪帆,Fack,F,杭长寿,Bautz,EKF[5]（1999）在《汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建》一文中研究指出目的：构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库，以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法：用DNaseI随机降解汉坦病毒76－118株S基因，回收50bp～300bp小的DNA片断，与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的噬菌体载体fuse5，电穿孔导入MC1061菌建库。转化菌培养扩增后提取重组噬菌体，感染K91细胞测定库容，并随机挑选若干克隆测序。结果：构建的S基因噬菌体文库库容（以转导单位TU表示）为3．375X1010。抽检的8个克隆中有5个含有4种大小和组成不同的正确插人的S基因片断，另外3个克隆均为野生型载体的回复突变。结论：所建文库有足够大的库容和较好的多样性，预计可以满足筛检汉坦病毒核衣壳蛋白抗原表位的需要。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊1999年01期）
杨丽娟,苏成芝[6]（1998）在《抗人胃癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库的构建、初步筛选及鉴定》一文中研究指出目的：构建抗人胃癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库．方法：利用噬菌体表面呈现技术，构建基因文库，经过ｐａｎｎｉｎｇ筛选富集后，用ＥＬＩＳＡ方法检测抗原结合活性．结果：从９４个单个噬菌体克隆中一次筛选到１８个具有抗原结合活性的阳性克隆．结论：我们所应用的方法为抗肿瘤基因工程抗体的制备提供了一条更为有效的新途径，同时为今后胃癌显像诊断和治疗的基础及临床研究奠定了基础(本文来源于《第四军医大学学报》期刊1998年01期）
邓健蓓,韩骅,苏成芝,陈常庆[7]（1996）在《抗人AFP抗体噬菌体呈现文库的构建筛选及基因序列测定》一文中研究指出从人ＡＦＰ免疫小鼠脾细胞ｍＲＮＡ中扩增出全套抗体Ｖ区基因并随机拼接为ＳｃＦｖ基因，构建全套ＳｃＦｖ基因噬菌体呈现文库，经两轮ｐａｎｎｉｎｇ筛选富集，一次从９４个单个重组噬菌体克隆中筛选到１４个具有ＡＦＰ结合活性的克隆，测定两个阳性克隆中ＳｃＦｖ基因的核苷酸序列，获得一个Ｖ＿Ｈ基因和两个Ｖ＿Ｋ基因，其基因序列分别与鼠ＩｇＶ＿ＨＪ５５８、Ｖ＿ｋ－ＯＸ１和Ｖ＿ｋ４／５家族同源性最高；推导出的氨基酸序列中均含有抗体Ｖ区特征性的两个恒定的半胱氨酸残基、具有明确的叁个ＣＤＲ和四个ＦＲ序列，表明这叁个基因均系新发现的功能性鼠抗体Ｖ区基因序列。(本文来源于《生物化学杂志》期刊1996年06期）
噬菌体呈现文库论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 :构建抗人卵巢癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库 .方法 :利用噬菌体表面呈现技术 ,构建基因文库 ,经过panning筛选富集后 ,用ELISA方法检验抗原结合活性 .结果 :从单个噬菌体克隆中筛选到 2 6个具有抗原结合活性的阳性克隆 .结论 :噬菌体表面呈现技术为构建抗人卵巢癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库提供了一条更为有效的新途径
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体呈现文库论文参考文献
[1].赵泽文,梁志清,史常旭,常青,李军.抗人Endoglin胞外段单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建/筛选及鉴定[J].华南国防医学杂志.2008
[2].杜辉,王建,辛晓燕,郑维国.抗人卵巢癌单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建、初步筛选及鉴定[J].第四军医大学学报.2003
[3].韩者艺.胃癌相关抗原模拟表位的筛选鉴定及人源性抗体噬菌体表面呈现文库的构建[D].第四军医大学.2001
[4].高辉,杨安钢,高磊,任向荣,余宙耀.人源性抗HBsAg抗体Fab段噬菌体呈现文库的构建、筛选及阳性克隆核苷酸序列测定[J].中国病理生理杂志.2001
[5].白雪帆,Fack,F,杭长寿,Bautz,EKF.汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建[J].细胞与分子免疫学杂志.1999
[6].杨丽娟,苏成芝.抗人胃癌全套单链抗体基因噬菌体表面呈现文库的构建、初步筛选及鉴定[J].第四军医大学学报.1998
[7].邓健蓓,韩骅,苏成芝,陈常庆.抗人AFP抗体噬菌体呈现文库的构建筛选及基因序列测定[J].生物化学杂志.1996
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