不同水解方法对藜麦皂苷抑菌活性及酪氨酸酶抑制作用的影响

论文摘要

本实验以藜麦麸皮为材料,通过双相酸水解法、直接酸解法、酶解法三种方法去处理藜麦麸皮,并利用正丁醇萃取获得藜麦低级性皂苷。经过最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）、最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）及纸片法测定抑菌活性;并用酪氨酸酶抑制实验推测其抑制黑色素作用。最后用液相色谱质谱/质谱联用法（liquid chromatography electrospray ionisation tandem mass spectrometry, LC-MS/MS）和高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）来对抑菌和抑制酪氨酸酶活性效果最好的化合物进行定性定量分析。结果表明:经过双相酸水解转化的化合物活性最好,对金黄色葡萄球菌和沙氏肠炎杆菌的MIC=0.60 mg/mL,MBC=1.20 mg/mL,对表皮葡萄球菌的MIC=0.30 mg/mL,MBC=1.20mg/mL;对铜绿假单胞菌有一定的抑制作用。0.5mg/mL的转化物对酪氨酸酶的抑制率达到68.09%。根据LC-MS/MS及HPLC可知,经正丁醇萃取的水解后的化合物为皂苷。经过两相酸解后,部分皂苷发生了水解反应,造成了化合物极性的降低。利用双相酸水解法从藜麦麸皮中萃取藜麦皂苷元提高了化合物的活性,增强了皂苷的抑菌和酪氨酸酶抑制作用,并且提取率明显高于直接酸解法和酶解法。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 藜麦麸皮前处理
•     1.3.2 藜麦总皂苷的提取
•     1.3.3 三种水解方法处理藜麦麸皮
•       1.3.3. 1 双相酸水解
•       1.3.3. 2 直接酸水解
•       1.3.3. 3 复合酶酶水解
•       1.3.3. 4 重量法计算粗提率
•     1.3.4 抑菌活性的测定
•       1.3.4. 1 菌种
•       1.3.4. 2 试剂配制
•       1.3.4. 3 细菌制备
•       1.3.4. 4 纸片法
•       1.3.4. 5 MIC、MBC的测定
•     1.3.5 酪氨酸酶抑制的测定
•       1.3.5. 1 试剂配制
•       1.3.5. 2 实验步骤
•     1.3.6 HPLC分析藜麦总皂苷及双相联合酸水解提取的皂苷元
•       1.3.6. 1 试验品配制
•       1.3.6. 2 化合物HPLC分析
•       1.3.6. 3 LC-MS/MS定性分析不同水解方法提取的藜麦皂苷元
•     1.3.7 数据统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 三种水解方法的提取率
•   2.2 藜麦麸皮各提取层的抑菌效果
•     2.2.1 抑菌圈实验结果
•     2.2.2 MIC、MBC测定结果
•   2.3 不同水解方法提取藜麦皂苷的酪氨酸酶抑制结果
•   2.4 HPLC分析
•     2.4.1 两相酸水解前后物质变化
•   2.5 LC-MS/MS定性分析萃取物结果
• 3 结果

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 嵇丽红,薛军,赵雷,丁葵英,徐方舟,李岳,史龙龙,王志新,薛鹏

关键词: 藜麦皂苷元,水解方法,抑菌,酪氨酸酶抑制

来源: 现代食品科技 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 潍坊医学院公共卫生与管理学院潍坊市食品营养与安全重点实验室,潍坊高新双语学校,中国海关潍坊出入境检验检疫局

基金: 山东省自然科学基金项目(ZR2019PH043)

分类号: TS210.9

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.10.027

页码: 196-204

总页数: 9

文件大小: 1532K

下载量: 359