一株I型犬腺病毒的分离与鉴定

论文摘要

为给I型犬腺病毒（CAV-I）后续研究提供基础材料,采集疑似犬传染性肝炎患犬粪便,用PCR方法进行CAV-I核酸检测,并运用犬肾传代细胞（MDCK）进行病毒分离培养,采用PCR和免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）检测病毒在细胞内的繁殖状态。结果显示:患犬粪便样品PCR检测为CAV-I核酸阳性,病料接种MDCK细胞培养24 h后出现明显的"葡萄串样"细胞病变效应（CPE）;培养物血清学鉴定为CAV抗原阳性,不同代次病毒培养物均为CAV-I核酸强阳性;第9代病毒核酸序列与Gen Bank中CAV-I毒株核苷酸相似性在99.0%以上,与CAV-Ⅱ相似性仅为65.3%;该病毒与CAV-I毒株处于同一遗传分支;病毒接种MDCK后8 h内均无抗原检出,12 h后细胞核中分布大量的CAV抗原,24 h后细胞出现典型的"葡萄串样"病变,抗原在细胞中呈弥散分布。上述结果表明,分离到的毒株为CAV-I,命名为CAV-ZY180711。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 病料采集与处理
•     1.2.2 DNA提取与PCR检测
•     1.2.3 MDCK细胞培养
•     1.2.4 病毒分离培养与血清学鉴定
•     1.2.5 不同代次CAV的PCR检测与序列测定
•     1.2.6 CAV在细胞中的增殖动态IPMA检测
• 2 结果
•   2.1 病料PCR检测
•   2.2 病毒分离培养与血清学鉴定
•   2.3 不同代次CAV的PCR检测与基因序列分析
•   2.4 CAV在细胞中的增殖动态IPMA检测
• 3 分析与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 易程,邓莉,唐青海,阳坤,滕威,谢璇,杨海,王芳宇,何丽芳

关键词: 犬腺病毒,分离鉴定

来源: 中国动物检疫 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 衡阳师范学院生命科学与环境学院衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所衡阳师范学院生物药物研究所

基金: 国家级大学生创新创业训练计划项目(201810546002,201710546001),湖南省教育厅优秀青年项目(17B041),校企合作项目(ZXXQ201701,18H03),衡阳师范学院引进人才专项项目(16D20)

分类号: S852.655

页码: 82-87

总页数: 6

文件大小: 1748K

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