微小毛霉凝乳酶蛋白质工程改造研究

论文摘要

微小毛霉凝乳酶(MPC)是微生物凝乳酶的主要来源之一。本研究将微小毛霉凝乳酶基因克隆到表达载体pET30a中并转化宿主BL21(DE3),使微小毛霉凝乳酶蛋白在大肠杆菌中表达。通过易错PCR技术对MPC进行随机突变建库,从中筛选出两株具有优良蛋白特性的突变体,为蛋白质结构与功能研究以及菌种改造奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 菌种
•     1.1.2 工具酶和试剂
•     1.1.3 培养基
•   1.2 方法
•     1.2.1 微小毛霉凝乳基因克隆构建
•     1.2.2 易错PCR基因文库构建
•     1.2.3 基因文库筛选
•     1.2.4 凝乳酶凝乳活力测定方法
•     1.2.5 突变体酶活性质研究
• 2 结果与讨论
•   2.1 微小毛霉基因克隆与易错PCR文库构建
•   2.2 MPC易错PCR文库筛选
•   2.3 突变体酶学性质研究
•     2.3.1 凝乳酶的最适反应温度
•     2.3.2 凝乳酶的热稳定性
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王兴吉,贾仁洁,张志来,刘文龙

关键词: 微小毛霉,凝乳酶,克隆,易错,蛋白质

来源: 江苏调味副食品 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 山东隆科特酶制剂有限公司

基金: 山东省科技创新项目(201510515007)

分类号: TS252.1

DOI: 10.16782/j.cnki.32-1235/ts.2019.01.010

页码: 31-33

总页数: 3

文件大小: 112K

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