双酶水解螺旋藻藻胆蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化

论文摘要

以螺旋藻为原料,采用反复冻融和超声波解冻结合法提取藻胆蛋白,利用等电点分离藻胆蛋白,采用SDS-PAGE电泳确定分离蛋白的种类。采用胃蛋白酶和胰蛋白酶双酶先后水解藻胆蛋白。通过单因素实验和正交实验优化胃蛋白酶和胰蛋白酶水解藻胆蛋白制备血管紧张素转换酶（ACE）抑制肽的工艺,研究表明:胃蛋白酶水解藻胆蛋白最佳酶解工艺条件是水解温度为37℃,底物质量浓度为6%（w/v）,酶与底物比为5220 U/g,此时ACE抑制率为82.07%。胰蛋白酶水解藻胆蛋白最佳酶解条件是温度为42℃,底物质量浓度为6%（w/v）,酶与底物比为5220 U/g,此时ACE抑制率为80.35%。利用超滤离心管获得分子量小于3 kDa的藻胆蛋白ACE抑制率94.30%。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 反复冻融法和超声波解冻结合法提取藻胆蛋白
•     1.2.2 等电点法分离蛋白
•     1.2.3 采用SDS-PAGE凝胶电泳法分析提取蛋白的种类
•     1.2.4 胃蛋白酶水解藻胆蛋白
•       1.2.4.1 水解工艺
•       1.2.4.2 温度对胃蛋白酶水解藻胆蛋白 ACE
•       1.2.4.3 酶与底物比对胃蛋白酶水解藻胆蛋白ACE抑制率的影响
•       1.2.4.4 底物质量分数对胃蛋白酶水解藻胆蛋白ACE抑制率的影响
•     1.2.5 胃蛋白酶水解正交试验
•     1.2.6 胰蛋白酶水解单因素实验
•       1.2.6.1 水解工艺
•       1.2.6.2 温度对胰蛋白酶水解藻胆蛋白 ACE
•       1.2.6.3 酶与底物比对胰蛋白酶水解藻胆蛋白ACE抑制率的影响
•       1.2.6.4 底物质量分数对胰蛋白酶水解藻胆蛋白ACE抑制率的影响
•     1.2.7 胰蛋白酶水解正交试验
•     1.2.8 水解液的超滤
•     1.2.9 ACE抑制肽体外活性检测方法
•   1.3 数据处理
• 2 结果与讨论
•   2.1 螺旋藻粉蛋白中含量测定
•   2.2 反复冻融法和超声波解冻结合法提取螺旋藻藻胆蛋白
•   2.3 等电点法分离蛋白
•   2.4 SDS-PAGE凝胶电泳法分析提取蛋白的种类
•   2.5 胃蛋白酶水解螺旋藻藻胆蛋白单因素实验
•     2.5.1 底物质量分数对水解产物ACE抑制率的影响
•     2.5.2 酶与底物比对水解产物ACE抑制率的影响
•     2.5.3 水解温度对水解产物ACE抑制率的影响
•   2.6 胃蛋白酶水解螺旋藻藻胆蛋白正交实验条件
•   2.7 胰蛋白酶水解藻胆蛋白的单因素试验
•     2.7.1 底物质量分数对水解产物的ACE抑制率的影响
•     2.7.2 酶与底物比对水解产物的ACE抑制率的影响
•     2.7.3 温度对水解产物ACE抑制率的影响
•   2.8 胰蛋白酶水解藻胆蛋白螺旋藻正交试验
•   2.9 螺旋藻藻胆蛋白ACE抑制肽的超滤分离
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 马莹,胡志和,薛璐,潘颖,周宝宏,贾蕴琴,王丽娟,吴子健

关键词: 螺旋藻,藻胆蛋白,酶解,血管紧张素转换酶,抑制率

来源: 食品工业科技 2019年12期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 天津商业大学生物技术与食品科学学院,天津市食品生物技术重点实验室

基金: 天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目(14JCZDJC34500),天津市科技支撑计划项目(14ZCZDNC00017),天津市大学生创新创业训练计划(201610069067)

分类号: TQ464.7

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.12.029

页码: 178-185

总页数: 8

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