一、宫颈癌中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的关系（论文文献综述）
魏金婴[1]（2021）在《miR-326调控SIRT1/HIF1α/VEGFA轴改善非小细胞肺癌化疗耐药的分子机制》文中研究指明背景:肺癌是世界上发病率和死亡率增长最快的肿瘤之一,是导致癌症相关死亡的主要原因,每年全世界有近200万人死于肺癌。其中,非小细胞肺癌占肺癌的80%。随着世界人口老龄化的进展,以及环境的改变,社会及生活心理压力的剧增,肺癌的发病率及死亡率逐年提升,且有年轻化的趋势。目前临床上已有多种可供选择的治疗方案,比如手术治疗,放疗、化疗,包括靶向治疗以及免疫治疗等方法。肺癌在基因层面的研究,已挖掘很多靶点,但是仍有很大空间未被发掘。化疗仍是肺癌治疗的基石。近年的研究表明,miRNAs在肺癌的治疗中显示了潜在的效用,在表观遗传学研究方面发现,miRNAs可能通过调控组蛋白从而影响和参与到肺癌的发生和发展中。SIRT1是一种III类组蛋白去乙酰化酶（HDAC）,是一种可调节许多涉及染色质结构、凋亡、自噬和线粒体转录调控的蛋白质。深度参与基因调控、基因组稳定性维持、凋亡、自噬、增殖、衰老和肿瘤发生,在癌症耐药性的多个方面发挥着关键作用。有研究报道,靶向SIRT1活性或基因表达可能是肺癌治疗的新策略之一。HIF1α（缺氧诱导因子1α）已被认为是一种重要的抗癌药物靶点,HIF1α在肿瘤转移、血管生成、患者预后差以及肿瘤耐药治疗方面有很强的相关性;VEGFA（血管内皮生长因子-A）驱动的肿瘤血管生成的高度冗余和复杂性可能解释了为什么肿瘤通常会对靶向VEGFA信号转导的抗血管生成治疗产生耐药性。VEGFA由体内大多数细胞产生,但在缺氧时上调。研究方法:生物信息学分析:通过挖掘GEO数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）检索获得肺癌microRNA相关表达芯片GSE51853,采用R语言“limma”包,设置|logFC|>1,p value<0.05为阈值,进行差异分析。利用Star Base数据库（http://starbase.sysu.edu.cn/）、RNAInter数据库（http://www.rna-society.org/rnainter/）和miRanda数据库（http://www.microrna.org/microrna/home.do）对micro RNA的靶向调控基因进行预测,三个网站使用不同的算法进行预测,取三个预测结果的交集增加预测结果的可信度。通过miRNA.org数据库预测miRNA靶向基因;通过UCSC（http://genome.ucsc.edu/）和JASPAR（http://jaspar.genereg.net/）两个网站分析得出HIF1α蛋白在VEGFA启动子有可能的结合位点,提出理论假设。细胞学实验:细胞培养:人肺癌细胞系H460和人胚肾细胞系HEK293购自中国科学院（中国上海）的典型培养物保藏委员会细胞库。H460细胞使用RPMI-1640+10%FBS培养基,HEK293在DMEM+10%FBS的培养基中培养,均置于37℃,5%CO2的培养箱中。化学抗性细胞H460-R由亲本细胞系H460开发,通过将化学疗法药物DDP（顺铂）浓度从0.05μg/ml增加至2μg/ml梯度暴露细胞约12个月,以获得化学抵抗性。质粒和si RNAs转染:MiR-326 mimic、MiR-326 inhibitor、过表达SIRT1（eo-SIRT1）、抗HIF1α（HIF1αsi RNA）的小干扰RNA（si RNA）、血管内皮生长因子A（VEGFA）si RNA和阴性对照（NCs）由Gene Chem有限公司（上海,中国）合成。将细胞接种于6孔板中过夜,将2μg质粒与X-treme GENE HP DNA转染试剂（Roche Applied Science,Basel,Switzerland）混合。根据制造商说明,使用Lipofectamine TM RNAi MAX转染试剂（Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA,USA）用上述质粒转染细胞。转染48小时后收集细胞用于后续实验。qRT-PCR实验检测miR-326和SIRT1在非小细胞肺癌细胞系H460及其耐药细胞H460-R中的表达情况;采用双荧光素酶报告基因试验和RIP试验验证和检测miR-326与SIRT1的结合及调控关系,以及SIRT1通过去乙酰化抑制HIF1α降解;ChIP实验及qRT-PCR从多角度验证了SIRT1与HIF1α的调控关系;ChIP实验及双荧光素酶截短实验检测转录因子HIF1α与VEGFA启动子位点的结合情况;MTS法和流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡情况,判断H460-R细胞的耐药改善;Western blot分析细胞中SIRT1、HIF1α、VEGFA、c-PARP1、c-Caspase-3和γ-H2AX的蛋白表达,荧光素酶检测γ-H2AX的阳性表达,MTS及流式细胞术监测耐药细胞的生存及凋亡情况。动物实验:以裸鼠肿瘤形成为指标,BALB/c裸鼠（Nu/Nu,雌性,4-6周,n=8只/组）,转染物皮下注射:NC agomir组,miR-326 agomir组,NC agomir+DDP组,miR-326 agomir+DDP组,所有小鼠在无病原体条件下维持生命活动;一周后,每3d用DDP（3.0mg/kg体重）处理小鼠,肿瘤体积检测持续4周。评价其成瘤能力评估耐药改善。实验结果:1、miR-326在非小细胞肺癌中差异表达;miR-326与SIRT1的3’UTR区结合,负调控SRIT1,改善非小细胞肺癌细胞的化疗耐药;2、miR-326改善细胞耐药,SIRT1促进细胞耐药;3、SIRT1通过去乙酰化作用调节转录因子HIF1α;沉默SIRT1通过抑制其去乙酰化作用来促进HIF1α的蛋白酶体降解;HIF1α降解改善NSCLC化疗耐药。沉默SIRT1的表达促进转录因子HIF1α的降解来改善NSCLC细胞的化疗耐药;4、HIF1α在VEGFA启动子上结合,SIRT1通过HIF1α促进VEGFA的表达;SIRT1促进VEGFA的表达;沉默VEGFA改善NSCLC化疗耐药;SIRT1通过转录因子HIF1α促进VEGFA的表达,调控化疗耐药;5、过表达miR-326在体内改善非小细胞肺癌细胞化学耐药性。结论:化疗仍是NSCLC治疗的基石。本文通过生物信息学预测结合实验证实研究是合理且高效的研究方法。大量查阅文献发现,miRNAs已作为肿瘤发生发展机制中的重要调节因子得到广泛研究,技术方法成熟,并且在表观遗传学方面也得到了大量研究。miR-326在肿瘤化疗耐药方法虽然已有研究,但并未进行机制的研究和探讨;SIRT1、HIF1α、VEGFA均有报道作为参与NSCLC的发生发展以及耐药过程,但他们直接是否有明确联系未见报道;因此本文从这一点入手进行探讨。本文通过生物信息学预测,文献检索,实验验证相结合的方法探讨机制,研究发现一条新的通路miR-326→SIRT1/HIF1α/VEGFA→NSCLC。然而miRNA与基因并不是一对一关系,单一通路研究不是唯一通路;细胞层面的研究较为局限,动物实验相对较少,在未来的研究中可结合临床标本做进一步研究增加可信度。miR-326通过介导SIRT1/HIF1α/VEGFA轴的表达,改善非小细胞肺癌的化疗耐药。这些结果表明miR-326是一个很有前途的肺癌治疗新靶点。
祁志勇[2]（2021）在《HIF-1、GLUT-1、CA9在结直肠癌中的表达及其临床意义》文中进行了进一步梳理背景与目的:缺氧是参与调节基因表达的重要因素,尤其缺氧诱导因子-1（hypoxiainduciblefactors-1,HIF-1）基因,是几乎所有哺乳类动物微环境氧稳态的重要调节因子。缺氧是改变肠道环境的重要因素,机体通过激活HIF-1触发对缺氧的适应性。HIF-1广泛表达于肿瘤细胞,并且在许多类型的细胞中作为氧稳态的调控亚基起关键作用。GLUT-1、CA9是受HIF-1调节的下游基因,GLUT-1参与调节葡萄糖在细胞膜上的转运,CA9主要维持机体酸碱平衡。由于肿瘤的生长先于其血管的发育,往往在肿瘤本身形成低氧区。这些区域既可以随其扩散能力发生子在肿瘤边缘,又可以因为血管穿透力的不足发生在肿瘤中心区域。本研究主要探索HIF-1、GLUT-1、CA9在结直肠癌中的表达及其与肿瘤患者临床特点的关系,为结直肠癌的诊疗提供参考。方法:样本来源于从2014年1月至2015年12月在吉林大学中日联谊医院胃肠外科被确诊为结直肠癌的石蜡包埋标本64例,分别切取肿瘤及其癌旁组织（距癌组织边缘5cm以上）。以癌旁组织作为对照采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中HIF-1、GLUT-1、CA9的表达情况。统计64例患者的临床资料,包括:性别、年龄、肿瘤最大直径、位置、分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、神经脉管侵犯、总体生存等10项指标,分析三种蛋白与临床病理特征之间的关系。结果:HIF-1、GLUT-1、CA9在64例患者中的表达率分别为79.7%,87.5%,84.3%;HIF-1与肿瘤分化程度有统计学差异,GLUT-1与肿瘤的浸润深度有统计学差异,CA9与肿瘤的位置有统计学差异;HIF-1、GLUT-1、CA9三者之间均有相关性,且为正相关;中/高表达的HIF-1与5年总体生存有统计学差异。结论:1.HIF-1、GLUT-1、CA9在64名结直肠癌肿瘤组织中都有较高程度的阳性表达情况,可作为肿瘤诊断的指标之一。2.HIF-1、GLUT-1、CA9表达与结直肠癌的临床病理特征有一定的相关性,可以指导肿瘤的预后和治疗。3.HIF-1、GLUT-1、CA9三者具有相关性,可以推测其在肿瘤发生、发展过程中有协同作用。4.中/高表达HIF-1的结直肠癌患者的预后生存较差。
吴贤建[3]（2021）在《缺氧微环境中HIF-1/RACGAP1调控人肝癌细胞发生发展的机制研究》文中研究说明目的:探究缺氧微环境下HIF-1α基因和RACGAP1基因对人肝癌细胞系Huh-7与Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其之间的调控关系。方法:构建人肝癌Huh-7与Hep3B细胞缺氧模型。实验设立空白对照组（control）、无义质粒组（LV-OE-NC、LV-RNAi-NC）、HIF-1α敲减组（LV-HIF-1α-RNAi）、RACGAP1敲减组（LV-RACGAP1-RNAi）、HIF-1α敲减+RACGAP1敲减组（LV-HIF-1α-RNAi+LV-RACGAP1-RNAi）;HIF-1α过表达组（LV-OE-HIF-1α）、RACGAP1过表达组（LV-OE-RACGAP1）。实验采用免疫荧光检测慢病毒转染效率;采用Western blot、q PCR检测HIF-1α和RACGAP1表达;采用CCK-8、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。结果:本研究构建的慢病毒转染细胞模型,转染成功率75%以上。与对照组及无义质粒组相比较,抑制HIF-1α的表达,RACGAP1基因的表达量降低（P<0.05）,细胞的增殖、迁移、侵袭能力降低（P均<0.05）,细胞凋亡增多（P<0.05）。相反,与对照组及无义质粒组相比较,过表达HIF-1α,RACGAP1基因的表达量升高（P<0.05）,细胞的增殖、迁移、侵袭能力增高（P均<0.05）,细胞凋亡减少（P<0.05）。与对照组及无义质粒组相比较,抑制RACGAP1的表达,HIF-1α的表达量降低（P<0.05）,过表达RACGAP1,HIF-1α基因的表达量升高（P<0.05）。抑制RACGAP1表达,细胞的增殖能力低于对照组（P<0.05）,细胞凋亡高于对照组（P<0.05）。抑制HIF-1α+RACGAP1表达,细胞的侵袭能力显着低于对照组及无义质粒组（P均<0.01）,细胞凋亡显着高于对照组及无义质粒组（P<0.01）。结论:（1）本研究成功构建了缺氧人肝癌Huh-7与Hep3B细胞系模型,并使用慢病毒成功转染人肝癌Huh-7与Hep3B细胞系。（2）缺氧微环境下,过表达HIF-1α促进肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,抑制细胞凋亡;过表达RACGAP1促进肝癌细胞的增殖,抑制细胞凋亡。（3）HIF-1α表达与RACGAP1表达呈正相关,并影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力及细胞凋亡的能力;RACGAP1与HIF-1α对肝癌细胞增殖、迁移/侵袭以及凋亡的调控存在协同作用。
孟永斌[4]（2020）在《熊去氧胆酸抑制缺氧诱导的原发性肝癌微环境中血管新生的作用和机制》文中指出研究背景:熊去氧胆酸（Ursodeoxycholic Acid,UDCA）是熊胆粉中的有效成分之一。研究表明UDCA对于缺氧引起细胞损伤具有保护作用。同时实验提示UDCA具有保护肝胆,促进肝胆管分泌的作用。经动脉化疗栓塞术（transcatheter arterial chemoembolization,TACE）是目前治疗不能手术切除肝癌患者或术后复发肝癌患者主要的治疗方法。然而由于TACE术后肿瘤坏死不彻底、促血管生长因子分泌增多促进血管新生等问题使TACE的远期效果欠佳。缺氧诱导因子（Hypoxia-inducible factor,HIF）-1α能够作用于下游靶基因,上调血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达,促进肿瘤血管的生成。因此,这些研究提示我们:TACE治疗肝癌后,肿瘤组织内部绝对缺氧的微环境中HIF-1α的高表达能够通过促进VEGF的表达与血管新生,进而促进肝癌的复发、浸润及转移密切。研究目的:明确UDCA是否能够抑制肝癌缺氧微环境中血管生成,并通过HIF-1α/VEGF等信号通路进一步探讨UDCA抑制血管生成的作用机制。研究方法:1、MTT法检测人HCC细胞系Huh 7和人内皮细胞系EA.hy 926细胞增殖情况。将Huh 7细胞或EA.hy 926细胞分别用25、50、100、200和400μM UDCA处理24 h或48 h,然后进行MTT分析以评估UDCA的抗增殖作用。EA.hy 926细胞与分别用50μM Co CL2和50μM UDCA处理的Huh 7细胞共培养,并进行MTT分析以评估EA.hy 926细胞的增殖。2、小管形成实验检测缺氧条件下UDCA对于Huh 7细胞的小管形成的影响。EA.hy 926细胞空白或与Huh 7细胞共培养,分别用50μM Co CL2和25、50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养,进行小管形成实验,用Image J计算结点数,总段长度和平均网格大小,以量化管的形成。3、RT-PCR检测检测缺氧条件下UDCA处理后Huh 7细胞IL-8和VEGF的m RNA表达。Huh 7细胞用25、50μM UDCA或50μM Co CL2,50μMCo CL2+25μM UDCA,50μM Co CL2+50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养24 h后,采用RT-PCR检测IL-8和VEGF的m RNA。4、酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）缺氧条件下UDCA处理的Huh 7细胞VEGF和IL-8浓度蛋白水平。Huh 7细胞用25、50μM UDCA或50μM Co CL2,50μM Co CL2+25μM UDCA,50μM Co CL2+50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养24 h后,使用ELISA测定VEGF和IL-8蛋白浓度水平。5、小管形成实验检测UDCA在体外对IL-8诱导小管形成的作用。用100 ng/m L IL-8和不同剂量的UDCA（25和50μM）处理EA.hy 926细胞,并用Image J计算管形成和连接数,总片段长度和均值网格尺寸。6、基质胶栓塞体内血管生成测定UDCA在体内对IL-8诱导的管形成中的作用。体内测定中各组基质胶塞的代表性图像,测定的基质胶塞的血红蛋白含量。显示了使用来自各组的CD31,VEGF和v WF抗体的HE染色和IHC染色的代表性图像。7、RT-PCR检测HIF-1α的m RNA。Huh 7细胞用25、50μM UDCA或50μM Co CL2,50μM Co CL2+25μM UDCA,50μM Co CL2+50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养24 h,应用RT-PCR检测HIF-1α的m RNA。8、Western Blot测定HIF-1α的蛋白水平。Huh 7细胞用25、50μM UDCA或50μM Co CL2,50μM Co CL2+25μM UDCA,50μM Co CL2+50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养24 h,Western Blot测定HIF-1α的蛋白水平。9、双重荧光素酶报告基因分析UDCA处理转染HIF质粒的Huh 7细胞或Huh 7细胞。用UDCA处理转染了HIF质粒的Huh 7细胞或Huh 7细胞,并进行双重荧光素酶报告基因分析,每组的相对荧光强度表示为萤火虫荧光强度/海肾荧光强度（DF）的比值。10、RT-PCR分析检测转染HIF质粒的Huh 7细胞或Huh 7细胞经UDCA处理后的IL-8和VEGF的m RNA。将Huh 7细胞用HIF质粒转染,并用50μM UDCA处理24 h,然后应用RT-PCR分析检测IL-8和VEGF的m RNA。11、ELISA测定缺氧条件下HIF过表达和UDCA干预的Huh 7细胞VEGF和IL-8浓度水平。确定HIF过表达和UDCA干预的Huh 7细胞的VEGF和IL-8浓度。12、小管形成实验检测缺氧条件下转染HIF质粒Huh 7细胞经UDCA处理后对于小管形成的影响。EA.hy 926细胞空白或与Huh 7细胞共培养,将其转染HIF质粒并在Co CL2存在下用25,50μM UDCA处理或在低氧培养箱中培养,进行小管形成实验,并使用Image J计算结点的数量,总段长度和平均网格大小以量化管形成。13、Western Blot法检测p-P65,p-ERK,ERK,p-AKT和AKT的表达。Huh 7细胞分别用25、50μM UDCA或50μM Co CL2,50μMCo CL2+25μMUDCA,50μMCo CL2+50μMUDCA处理或在低氧培养箱中培养24 h,然后用Western Blot法检测p-P65,p-ERK,ERK,p-AKT和AKT的表达。用IL-8或IL-8+UDCA处理2 h或4 h,检测细胞质P65（C-P65）和核P65（N-P65）。用IL-8或IL-8+UDCA处理15、30或60分钟,检测p-ERK,ERK-8。14、RT-PCR法检测在Co CL2或缺氧培养箱条件下转染P65质粒并经UDCA处理后的Huh 7细胞HIF-1α的m RNA表达。经Co CL2或缺氧培养箱处理,将P65质粒转染到Huh 7细胞中,经UDCA处理,通过RT-PCR检测HIF-1α的m RNA表达。研究结果:1、通过MTT法显示:UDCA在高剂量（>100μM）下显着抑制Huh 7和EA.hy926细胞的活力。在有或没有Co CL2（50μM）的情况下,用UDCA（50μM）处理24 h不会影响EA.hy 926细胞的生存能力。与Huh 7细胞共培养可显着提高EA.hy 926细胞的活力。在Huh 7细胞中,UDCA,Co CL2和Co CL2+UDCA也不会影响EA.hy 926细胞的生存能力。2、小管形成实验:在常氧条件下,与Huh 7细胞共培养不能促进EA.hy 926细胞的小管形成（P>0.05）。在Co CL2处理下或在低氧培养箱中,与Huh 7细胞共培养可显着增加EA.hy 926细胞的小管形成（P<0.05）。UDCA（25和50μM）在缺氧条件下拮抗Huh 7细胞对EA.hy 926细胞管形成的影响。3、通过RT-PCR检测IL-8和VEGF的m RNA表达表达。在正常氧条件下,对照组和UDCA组之间的Huh 7细胞中IL-8和VEGF m RNA没有显着变化。Co CL2处理明显上调IL-8和VEGF的m RNA表达。25和50μM的UDCA均抑制Co CL2诱导的IL-8和VEGF m RNA的上调。在缺氧条件下,与正常氧条件下相比,Huh 7细胞中IL-8和VEGF m RNA的表达也显着增加,这也受到UDCA的抑制。4、ELISA结果显示,在Co CL2或缺氧处理后,VEGF和IL-8的蛋白水平也显着升高,UDCA可以部分逆转VEGF和IL-8的蛋白水平升高。5、IL-8组中,与对照组相比,结点数,总节段长度和平均网格尺寸显着增加（P<0.05）。UDCA处理（25和50μM）在体外显着抑制IL-8诱导的小管形成。6、通过基质胶塞血管生成测定,在体内,IL-8组的血红蛋白含量高于对照组。UDCA治疗显着降低了血红蛋白含量（P<0.05）。此外,HE染色显示,IL-8组中新形成的血管比对照组多,而UDCA使新生血管减少。此外,IL-8组中CD31,VEGF和v WF的表达上调并被UDCA抑制。7、通过RT-PCR检测和Western Blot法检测,Co CL2和缺氧均上调HIF-1αm RNA和蛋白的表达,而UDCA能够抑制缺氧诱导的HIF-1αm RNA和蛋白的表达。相反,在常氧条件下用25和50μMUDCA处理时,HIF-1αm RNA没有变化。8、通过双重萤光素酶报告基因检测分析,在常氧条件下,UDCA处理后,Huh 7细胞的相对荧光素酶活性保持较低水平。在Co CL2和缺氧条件下,缺氧反应元件（hypoxia responseelements,HRE）活性显着提高,而UDCA则部分抑制了这种作用。在常氧与低氧条件下,用HIF-1α载体对照转染均没有明显改变HRE活性。当用Co CL2处理或在缺氧培养箱中孵育时,UDCA抑制Huh 7细胞的HRE活性（与对照或载体对照相比,P<0.05）。在缺氧条件下表达HIF-1α的细胞中荧光素酶活性增加了约13倍。用UDCA治疗后,HRE驱动的荧光素酶活性被显着抑制（P<0.05）。结果表明UDCA通过抑制HIF-1α表达进而抑制HRE活性。9、RT-PCR和ELISA结果显示,在常氧条件下,UDCA对IL-8或VEGF的表达影响很小。低氧状态下IL-8和VEGF均被显着上调（P<0.05）。用HIF质粒转染后,这种作用明显增强。缺氧条件下UDCA能够显着抑制Huh 7细胞中IL-8和VEGF的过表达。10、通过小管形成实验结果表明,常氧或缺氧条件下HIF-1α转染可显着促进管形成,在常氧或缺氧条件下,25和50μM UDCA均可抑制HIF-1α转染促管形成。UDCA对HIF-1α信号的抑制可通过下调IL-8和VEGF的表达来实现。11、通过Western Blot法检测发现Co CL2和低氧培养箱均可明显上调P65,ERK和ATK的磷酸化表达,而P65,ERK和ATK的总蛋白变化较小。在正常状态下,通过UDCA处理后,p-P65,p-ERK和p-AKT的变化较小。IL-8处理2 h或4小时后,IL-8会增加细胞核中P65的表达,但会减少细胞质中P65水平,并且这种作用能被UDCA抑制,IL-8干预4小时更为明显。IL-8处理15-60分钟能促进ERK的磷酸化,并呈时间依赖性。12、通过RT-PCR检测证实,在缺氧条件下,P65的过度表达进一步上调HIF-1α的m RNA的表达,这能被UDCA的抑制。结论:1、缺氧条件下UDCA抑制肝癌细胞诱导的血管生成。2、缺氧条件下UDCA抑制肝癌细胞诱导的IL-8和VEGF的上调。3、UDCA在体外和体内抑制IL-8诱导的管形成。4、缺氧条件下UDCA抑制HIF信号传导,并通过抑制HIF-1α表达抑制HRE活性。5、UDCA对血管生成的抑制作用是通过阻断HIF/IL-8和VEGF信号通路来介导的。6、缺氧条件下UDCA抑制NFκB和MAPK活化抑制肝癌血管生成。
刘岚[5]（2020）在《鼻咽癌磁共振动态增强参数与缺氧诱导因子-1α表达及临床分期的关系研究》文中提出目的鼻咽癌组织微环境中血管结构异常会导致肿瘤乏氧,乏氧及新生血管生成与鼻咽癌发生、侵袭及转移密切相关,并会降低肿瘤对各种治疗手段的敏感性。目前以抗血管生成靶向药物治疗鼻咽癌成为众多研究的热点,因此评估肿瘤乏氧及血管生成状态对于鼻咽癌治疗极为重要。缺氧诱导因子-1α是肿瘤适应缺氧微环境的重要转录因子,参与调节肿瘤的血管形成、能量代谢、侵袭转移、放化疗耐受等,是近年来临床应用最广泛的乏氧标志物之一。磁共振动态增强扫描技术借助血管内对比剂和磁共振快速采集技术,可反映鼻咽癌组织中血管生成活性及毛细血管通透性。本研究旨在探讨鼻咽癌影像、病理、临床三个不同学科指标评估肿瘤乏氧及血管生成状态的关系,为治疗前无创性预测鼻咽癌疗效及制定个体化治疗方案提供依据。方法收集2018年4月至2019年12月江西省肿瘤医院头颈部肿瘤放疗科经病理证实为鼻咽癌的42例初诊患者,男性29例,女性13例,年龄27岁-76岁,中位年龄58岁,平均年龄（53.2±13.6）岁;另外收集15例鼻咽慢性炎症患者为对照组。治疗前行常规磁共振（Magnetic resonance imaging,MRI）平扫及磁共振动态增强扫描（dynamic contrast enhanced-MRI,DCE-MRI）获取图像,将增强扫描原始数据传输到飞利浦公司星云工作站（Intelli Space Portal）,应用T1-Perfusion软件进行后处理。选择肿瘤最大层面沿病灶边缘（避开骨骼、坏死、血管等结构）勾画感兴趣区（Region of interest,ROI）,计算肿瘤的相对强化率（relative enhancement,RE）、最大相对强化率（maximun relative enhancement,MRE）、强化峰值（maximun enhancement,ME）、流入速率（wash in rate,WIR）、廓清速率（wash out rate,WOR）、达峰时间（time to peak,TTP）、曲线下面积（area under the curve,AUC）等动态增强参数。根据磁共振选择的感兴趣区部位指导电子鼻咽纤维镜活检,制备病理切片,HE染色确诊鼻咽癌,免疫组织化学法检测活检标本的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达情况。由经验丰富的一名影像科医生和一名临床放疗医生共同评定患者的临床分期。分析鼻咽癌磁共振动态增强参数与缺氧诱导因子-1α表达及临床分期的关系。结果1.临床分期情况42例鼻咽癌患者中临床Ⅰ期2例,Ⅱ期8例,Ⅲ期18例,Ⅳ期14例;其中T1分期6例,T2分期11例,T3分期18例,T4分期7例;N0分期12例,N1分期12例,N2分期10例,N3分期8例;M0分期38例,M1分期4例。2.DCE-MRI参数42例鼻咽癌组织DCE-MRI参数RE、MRE、ME、TTP、WIR、WOR、AUC分别为（128.98±9.89）%、（136.72±10.14）%、（1244.03±203.77）、（131.76±54.45）s、（21.72±9.31）s-1、（1.54±0.71）s-1、（298820.54±112728）。3.HIF-1α表达情况42例鼻咽癌活检标本中24例HIF-1α表达呈阳性,18例呈阴性;15例鼻咽慢性炎症HIF-1α均呈阴性,两组间差异有统计学意义（P<0.05）。4.DCE-MRI参数与鼻咽癌分期的关系42例鼻咽癌DCE-MRI各参数与不同患者年龄、性别组间差异无统计学意义（P>0.05）。但其中RE、ME、MRE值与临床分期（F=3.646,P=0.021;F=3.204,P=0.034,F=3.050,P=0.040）、与T分期（F=6.578,P=0.001;F=3.540,P=0.023;F=4.384,P=0.010）组间差异有统计学意义（P<0.05）,随着临床分期和T分期提高,RE、MRE、ME数值逐渐增大;而RE、ME、MRE值与N分期和M分期并无相关性（P>0.05）。TTP（s）、WIR（s-1）、WOR（s-1）、AUC与临床总分期、T分期、N分期及M分期各组间差异均无统计学意义（P>0.05）。5.HIF-1α表达与鼻咽癌分期的关系42例鼻咽癌HIF-1α表达与不同患者年龄、性别组间差异无统计学意义（P>0.05）,但其阳性表达率与患者临床分期和T分期显着相关,鼻咽癌临床分期和T分期越高,HIF-1α阳性表达率也越高:T1为16.7%（1/6）,T2为36.4%（4/11）,T3为72.2%（13/18）,T4为85.7%（6/7）;Ⅰ期为0（0/2）,Ⅱ期为12.5%（1/8）;Ⅲ期为55.6%（10/18）,Ⅳ期为92.9%（13/14）。32例中晚期鼻咽癌（Ⅲ期-Ⅳ期）HIF-1α表达阳性率为71.9%（23/32）,10例早期鼻咽癌（Ⅰ期-Ⅱ期）HIF-1α表达阳性率仅占10.0%（1/10）,中晚期患者肿瘤组织中HIF-1α阳性表达率显着高于早期患者,差异有统计学意义（P<0.01）。6.DCE-MRI参数与HIF-1α表达的关系鼻咽癌动态增强DCE-MRI参数RE、ME、MRE值与HIF-1α表达呈正相关,在HIF-1α表达阳性组中明显高于HIF-1α表达阴性组,两组间差异有统计学意义（F=5.281,P=0.027;F=11.923,P=0.001;F=6.228,P=0.017）,而TTP、WIR、WOR、AUC值在HIF-1α阳性组和阴性组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.HIF-1α与鼻咽癌分期有一定的关系,肿瘤分期越高,癌组织缺氧越严重,HIF-lα阳性率越高。2.DCE-MRI参数中RE、ME、MRE值与鼻咽癌乏氧标志物HIF-lα表达有一定的关系,能在活体状态下反映癌灶局部微环境中的乏氧状态。3.RE、ME、MRE值与鼻咽癌分期有一定的关系,肿瘤的血管通透性、血流灌注和微血管密度可以通过RE、ME、MRE值反映出来,这三个值可以作为评价鼻咽癌微循环灌注的重要参数。DCE-MRI作为一种无创性影像技术,对评价鼻咽癌乏氧及血管生成状态、疗效预测有一定的价值。
陆艳荣[6]（2017）在《HIF-1α通过调控与血管生成相关基因对食管癌组织血管生成及食管癌细胞放射敏感性的影响研究》文中研究说明目的:本研究拟探讨HIF-1α及其调控的血管生成相关基因对食管癌组织血管生成及预后的影响;同时探讨其对食管癌Eca109细胞放射敏感性的影响,并观察加用HIF-1α抑制剂2ME2后对食管癌Eca109细胞放射敏感性的影响。方法:1、收集共6例食管癌及癌旁组织标本,使用基因芯片技术检测食管癌（n=3）和癌旁组织（n=3）的m RNA表达,通过在线软件DAVID对差异基因进行基因本体论和信号通路富集分析,从中筛选与血管生成相关的差异表达基因,再通过q RT-PCR验证基因芯片数据。2、采用免疫组化SP法,研究的对象为2011年1月至2015年6月到新疆医科大学附属肿瘤医院接受治疗的70例食管癌患者和30例正常食管组织,检测其VEGF、HIF-1α以及AGGF1的表达,根据随访得到的资料以及临床病例特征进行研究分析。3、模拟食管癌细胞在体内的缺氧环境,在缺氧培养及缺氧合并照射以及2ME2干预情况下,分别用CCK-8观察细胞的增殖活性,RT-PCR方法检测HIF-1α、VEGF和AGGF1 m RNA的转录水平,Western blotting检测HIF-1α、VEGF和AGGF1蛋白表达情况,使用流式细胞仪检测细胞凋亡以及周期的变化规律,并用克隆形成试验观察食管癌细胞的放射敏感性变化。结果:1、与癌旁组织相比:1)食管癌显着差异表达基因共936个,其中上调的差异基因数目为306个,下调的差异基因数目为630个。2)基因本体论分析结果:差异表达基因的基因本体论富分析结果表明,细胞分裂、DNA修复,血管生成、细胞周期、DNA复制等为上调的差异表达基因生物学过程,肌肉收缩、血管收缩调控、信号传导、炎症反应等为下调的差异表达基因涉及的生物学过程。3)信号通路富集分析结果:上调基因Pathway主要富集于DNA复制、血管生成、Fanconi贫血通路、细胞周期等,下调基因Pathway富集于c GMP-PKG信号通路、血管平滑肌收缩、c AMP信号通路、MAPK信号通路等。2、70例食管鳞癌中AGGF1（χ2=8.129,P=0.004）、HIF-1α（χ2=21.212,P=0.000）和VEGF（χ2=4.116,P=0.042）的表达有所不同,从结果来看70位食管鳞癌患者中的AGGF1、HIF-1α、VEGF要明显高于正常食管组织。对于食管鳞患者而言,VEGF、HIF-1α和AGGF1的表达与分化程度、T分期、N分期、临床分期、放疗反应等均密切相关（P均<0.05）。食管鳞癌中的VEGF与AGGF1、HIF-1α的表达均呈现显着正相关,（r=0.333,P=0.003,r=0.290,P=0.015）。放疗近期疗效和VEGF、HIF-1α的表达均呈现显着负相关（r=-0.288、-0.241,P=0.016、0.044）。OS方面,HIF-1α阳性表达组要小于阴性组（P=0.022）。利用Cox多因素回归的方式进行分析,结果发现HIF-1α阳性表达（P=0.000）、浸润深度（P=0.049）和加用化疗（P=0.037）是食管鳞癌患者预后的影响因素。3、随着Co Cl2浓度的增加（0、50、100、150、200μmol/L）,Eca109细胞的增殖活性逐渐减慢（P<0.05）。缺氧可使G0/G1期阻滞,降低S期阻滞。缺氧处理24h及48h组的G0/G1及S期Eca109细胞比例与对照组及缺氧处理6h、12h组差异有统计学意义（P<0.05）。在缺氧状态下放疗+2ME2组中,Eca109存活细胞减少的更为明显,且各组比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。2ME2+放疗组细胞凋亡明显多于单纯放疗组（P<0.05）。经过给予0.5m M和1m M的2ME2后,升高的HIF-1α、VEGF和AGGF1的m RNA表达均有所下降（P<0.001）。当缺氧24h时给予2ME2后,升高的HIF-1α、VEGF和AGGF1的蛋白表达均明显下降（P<0.001）。结论:1、1)与癌旁组织相比,一共有936个差异表达基因,上调差异基因和下调差异基因数目分别为306个和630个。2)与食管癌血管生成相关的差异表达基因有:WNT5A,VEGFC,CHRNA7,ANG,ECM1,VEGFA,HOXB13,AGGF1,HIF1A,VEGFB,HEY1,HIF3A,MMP27等,其中HIF3A,MMP27为下调的差异基因,其余均为上调的差异基因。3)部分差异表达基因经过q RT-PCR验证后与基因芯片数据分析结果一致。2、食管鳞癌组织中HIF-1α、AGGF1以及VEGF表达明显高于正常食管组织,且与食管癌临床分期、分化程度等相关,若三者均为高表达,可能不利于食管鳞癌患者的治疗与预后。为以HIF-1α,VEGF及AGGF1为靶点的食管鳞癌的靶向治疗提供新的思路和方法。3、1)Co Cl2诱导Eca109细胞缺氧后,使HIF-1α、VEGF和AGGF1m RNA、蛋白表达将随之增加,蛋白表达量与缺氧呈时间依赖性。2)放疗能够使食管癌Eca109细胞在缺氧条件下HIF-1α、VEGF及AGGF1 m RNA的表达降低。缺氧引起Eca109细胞出现G0/G1期阻滞可能与食管癌Eca109细胞对放射线的敏感性降低有关。3)HIF-1α抑制剂2ME2可在体外提高Eca109细胞放射敏感性。
王芳,尹立勇,娄娟,顾涛,付占昭[7]（2017）在《HIF-1α及其靶基因在宫颈癌中的表达》文中研究指明目的检测缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）及其靶基因葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter protein-1,GLUT-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在宫颈癌组织中的表达并分析其临床病理意义。方法选取宫颈癌组织（54例）和正常宫颈上皮组织（10例）,采用免疫组织化学SP法检测其HIF-1α、GLUT-1及VEGF表达的阳性率,并分析HIF-1α与GLUT-1、VEGF表达的相关性。结果宫颈癌中HIF-1α、GLUT-1、VEGF阳性表达率高于对照组（P<0.05）。有淋巴结转移者宫颈癌组织HIF-1α、GLUT-1、VEGF表达阳性率高于无淋巴结转移者（P<0.05）;中低分化者宫颈癌组织GLUT-1表达阳性率高于高分化者;临床分期Ⅲ、Ⅳ期者宫颈癌组织GLUT-1表达阳性率高于临床分期Ⅰ期者（P<0.05）。HIF-1α与GLUT-1、VEGF的表达呈正相关（rs=0.280、0.320,P<0.05）。结论 HIF-1α、GLUT-1和VEGF高表达提示宫颈癌具有更高的侵袭性,联合检测可作为评估宫颈癌恶性程度以及预测临床放疗效果的可靠指标。
关涛,田晓予,张睿[8]（2014）在《缺氧诱导因子-1在宫颈癌发病机制中的作用》文中研究表明缺氧诱导基因所表达的中心调节为缺氧诱导因子-1（HIF-1）,HIF-1与肿瘤有密切关系,主要因其表达受多种因素的调节,尤其是缺氧、肿瘤基因等,其可调控多种靶基因的转录,如肿瘤血管生成、糖类代谢等,促进肿瘤的浸润、生长及转移。近年来,在肿瘤学研究中,HIF-1成为研究的一个热点。本文将妇科肿瘤——宫颈癌中HIF-1发病机制的作用及其与宫颈癌关系的研究现状作一概述。
李军丽[9]（2014）在《HIF-1α及CD105在子宫内膜癌中的表达及其临床意义》文中进行了进一步梳理子宫内膜癌是发生于子宫内膜上皮组织的恶性肿瘤，临床上诊断为子宫内膜癌的80%癌灶局限于子宫体，故又名为子宫体癌，其中以子宫内膜腺癌最常见，是女性生殖系统最常见的三大恶性肿瘤之一，且每年发生率有逐步上升的趋势，而且发病的年龄日趋年轻化，严重威胁着女性的生命和健康。目前早期内膜癌具有较高的治愈率，而伴发局部复发或远处转移的患者预后较差。由于取材的局限或误诊为月经不调，子宫内膜癌的早期诊断率低于宫颈癌，因此，探索采用新的检测指标，研究其在子宫内膜癌的发生、发展、浸润及转移中的作用机理，将对子宫内膜癌的临床诊断、预后评价及靶向治疗产生极大的指导价值。目前大多数人都认为恶性肿瘤的两大特点是细胞快速增殖和血管生成。同样子宫内膜癌也具有这两大特点，子宫内膜癌是实体肿瘤中的一种，对于实体恶性肿瘤细胞的特点是增殖极快。肿瘤微环境的一个基本特征是缺氧，所以使肿瘤细胞适应缺氧微环境同时新生血管生成为肿瘤组织提供氧分和营养是维持肿瘤增生和侵润生长的关键。HIF-1α（缺氧诱导因子-1α）是肿瘤细胞为了对缺氧微环境适应从而生成的一种蛋白即核转录调控因子，研究证明在多种癌前病变及恶性肿瘤中均有HIF-1α的过度表达，能调节缺氧反应基因产物的合成，在肿瘤细胞的能量代谢、细胞增殖转移及血管形成等方面有重要作用，同肿瘤血管生成、生长浸润转移密切相关。HIF-1α在多种恶性肿瘤中高表达，在肿瘤新生血管生成中起重要作用。CD105是一种新型的特异表达于新生血管内皮的标记物，是位于内皮细胞上的一种细胞膜抗原，与增生相关，在新生血管的生成中有重要作用，强烈表达于肿瘤相关的新生血管内皮细胞上，更能反映肿瘤的增殖状态和预后。目前国内外关于同时监测HIF-1α及CD105表达对子宫内膜癌发生发展、浸润及转移影响的相关研究报道较少。本实验研究对正常子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌中的HIF-1α与CD105表达水平进行检测，分析两种蛋白表达与子宫内膜腺癌的临床病理学特征关系及二者间相关性，来探讨HIF-1α与CD105在子宫内膜腺癌组织中表达及意义。将对子宫内膜癌的靶向治疗、预后判断以及关于恶性肿瘤的生物学行为的认识方面产生重要的临床指导意义。研究目的：实验通过检测HIF-1α及CD105在正常子宫内膜组织、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中的表达水平，以探讨两种蛋白与子宫内膜腺癌的发生、发展、侵袭及转移的关系，同时分析两种蛋白与子宫内膜腺癌的临床病理特征包括手术-病理分期、组织病理分级、肌层浸润深度、淋巴结有无转移的关系以及二者在子宫内膜腺癌中的相关性。从而探索HIF-1α与CD105在正常子宫内膜向子宫内膜癌转变过程中的作用和机制，为子宫内膜癌的临床诊断、预后判断、肿瘤靶向治疗提供重要的生物学检测指标。研究方法：应用免疫组织化学方法（S-P）检测HIF-1α与CD105蛋白在20例正常子宫内膜组织、20例子宫内膜不典型增生组织和50例子宫内膜腺癌组织石蜡标本中的表达情况，分析两种蛋白表达情况与子宫内膜腺癌的各临床病理特征的关系及两种蛋白间的相关性。实验结果应用SPSS19.0软件进行统计学数据分析。研究结果：HIF-1α蛋白在子宫内膜腺癌、子宫内膜不典型增生组织中的表达明显高于正常子宫内膜，三者两两间比较差异有统计学意义（P均＜0.05）。CD105在子宫内膜腺癌、子宫内膜不典型增生组织中表达明显高于正常子宫内膜，差别有高度的统计学意义（P＜0.001），而在子宫内膜不典型增生组与子宫内膜腺癌组中表达接近，无统计学意义。50例子宫内膜腺癌患者中，HIF-1α蛋白的表达与子宫内膜腺癌的手术-病理分期、肌层浸润深度和淋巴结转移都相关，P均＜0.05，而与子宫内膜癌的患者是否绝经、组织病理分级无关（P＞0.05）。CD105的表达与子宫内膜腺癌的手术-病理分期、肌层浸润深度和淋巴结转移都相关，P均＜0.05，而与子宫内膜腺癌的患者是否绝经、组织病理分级无相关性，在高（G1）、中（G2）、低（G3）分化程度三组中，任意两组间进行t检验比较，结果P均＞0.05，差异无统计学意义；在肌层浸润深度分组中可见，浸润深度＜1/2和浸润深度≥1/2之间比较，P＜0.01，差异有显着性意义；有无淋巴结转移分组中可见，有淋巴结转移组和无淋巴结转移组比较，P＜0.001，统计学分析差异有显着性。本实验研究结果显示HIF-1α蛋白阳性表达组的CD105-MVD值31.87±6.53显着高于HIF-1α蛋白阴性表达组的CD105-MVD值24.73±5.68，两者呈正相关（P＜0.001）。研究结论：1、HIF-1α在子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中的表达均较在正常子宫内膜中的表达增高，与子宫内膜腺癌的手术-病理分期、肌层浸润深度及淋巴结转移相关，而与是否绝经、组织病理分级无关。2、CD105在子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中的表达均较在正常子宫内膜中的表达明显增高，与子宫内膜腺癌的手术-病理分期、肌层浸润深度、淋巴结转移相关，而与是否绝经、组织病理分级无关。3、HIF-1α与CD105在子宫内膜腺癌中的阳性表达呈正相关。4、检测HIF-1α与CD105的表达可能对子宫内膜腺癌的靶向治疗、预后判断及关于恶性肿瘤的生物学行为的认识方面产生重要的临床指导意义。
薛同敏,张培建,刘霞,朱世春[10]（2013）在《低氧诱导因子在肿瘤中的表达及其意义》文中研究表明氧是哺乳动物新陈代谢所必需的,是细胞生存的必要条件之一。当缺氧到一定程度的时候就会诱导细胞产生低氧诱导因子（HIFs）,而HIFs可以引起影响细胞存活、生长、分化以及凋亡的基因表达,具有重要的生理和病理作用。一、HIF结构与功能HIF是细胞核抽提物中发现的一种DNA结合蛋白,是被公认的缺氧调节中的重要因子[1]。HIF-1为异源二聚体,含有一个α亚基（HIF-1α）和一个β亚基（HIF-1β）。生物活性由α亚基
二、宫颈癌中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、宫颈癌中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的关系（论文提纲范文）
（1）miR-326调控SIRT1/HIF1α/VEGFA轴改善非小细胞肺癌化疗耐药的分子机制（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略对照表 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 肺癌的概述 |
| 1.1.1 肺癌的流行病学和现状 |
| 1.1.2 肺癌的生物学 |
| 1.1.3 化疗仍是肺癌治疗的基石 |
| 1.1.4 肺癌新兴治疗 |
| 1.2 MicroRNAs的概述 |
| 1.2.1 MicroRNA的起源 |
| 1.2.2 MicroRNA的生物学功能 |
| 1.2.3 MicroRNA与肿瘤 |
| 1.2.4 MiRNAs作为诊断标志物 |
| 1.3 MicroRNA-326 的概述 |
| 1.3.1 MicroRNA-326 在肿瘤中的研究 |
| 1.3.2 MicroRNA-326 与生物标志物 |
| 1.3.3 MicroRNA-326 与治疗 |
| 1.4 SIRT1 的概述 |
| 1.4.1 SIRT1的生物学功能 |
| 1.4.2 SIRT1与肺癌 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要仪器设备 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 肺癌microRNA芯片差异分析与生信预测 |
| 2.2.2 细胞培养 |
| 2.2.3 质粒和siRNAs转染 |
| 2.2.4 RNA提取和qRT-PCR分析 |
| 2.2.5 Western blot |
| 2.2.6 细胞活力测定 |
| 2.2.7 流式细胞分析 |
| 2.2.8 免疫荧光试验 |
| 2.2.9 荧光素酶报告分析 |
| 2.2.10 RIP |
| 2.2.11 CHIP |
| 2.2.12 裸鼠成瘤 |
| 2.3 统计分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 生物信息学预测 |
| 3.1.1 miR-326在非小细胞肺癌中差异表达 |
| 3.1.2 miR-326靶向基因预测 |
| 3.1.3 HIF1α是SIRT1直接靶点 |
| 3.1.4 HIF1α在VEGFA启动子区靶向结合 |
| 3.1.5 提出理论假设 |
| 3.2 miR-326负调控SRIT1,改善NSCLC细胞的化疗耐药 |
| 3.2.1 miR-326、SIRT1在NSCLC及耐药细胞中的表达 |
| 3.2.2 miR-326与SIRT1的3’UTR区结合 |
| 3.2.3 miR-326改善细胞耐药,SIRT1促进细胞耐药 |
| 3.3 沉默SIRT1的表达促进转录因子HIF1α的降解来改善NSCLC细胞的化疗耐药 |
| 3.3.1 SIRT1通过去乙酰化作用调节转录因子HIF1α |
| 3.3.2 沉默SIRT1的表达促进转录因子HIF1α的降解 |
| 3.3.3 HIF1α降解改善NSCLC化疗耐药 |
| 3.4 SIRT1 通过HIF1α促进VEGFA的表达,调控化疗耐药 |
| 3.4.1 HIF1α在VEGFA启动子上结合,SIRT1通过HIF1α促进VEGFA的表达 |
| 3.4.2 SIRT1促进VEGFA的表达 |
| 3.4.3 沉默VEGFA改善NSCLC化疗耐药 |
| 3.5 过表达miR-326在体内改善NSCLC细胞化疗耐药 |
| 3.5.1 裸鼠成瘤实验 |
| 3.5.2 过表达miR-326改善NSCLC化疗耐药 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在校期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）HIF-1、GLUT-1、CA9在结直肠癌中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写对照表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 综述 肿瘤缺氧相关基因辅助治疗的研究进展 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 临床病理资料 |
| 3.1.1 病理资料及特征 |
| 3.1.2 纳入及排除标准 |
| 3.2 实验试剂及仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 组织玻片的制作 |
| 3.3.2 免疫组化学染色(SP法) |
| 3.3.3 结果判定 |
| 3.4 统计方法 |
| 第4章 实验结果 |
| 4.1 64例结直肠癌患者的一般资料 |
| 4.2 HIF-1、CA9、GLUT-1在64例结直肠癌患者中的表达 |
| 4.3 HIF-1、CA9、GLUT-1与结直肠癌患者临床特征的关系 |
| 4.4 HIF-1、CA9、GLUT-1在结直肠癌中相关性分析 |
| 4.5 64例结直肠癌患者的生存性分析 |
| 第5章 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 导师、作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）缺氧微环境中HIF-1/RACGAP1调控人肝癌细胞发生发展的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试剂和仪器 |
| 1.1.1 主要试剂及耗材 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 构建缺氧人肝癌细胞系培养模型 |
| 1.2.2 慢病毒转染Hep3B和Huh-7细胞 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR(qPCR)检测基因mRNA表达 |
| 1.2.4 Western Blot检测HIF-1α、RACGAP1在蛋白水平的表达量 |
| 1.2.5 免疫荧光检测HIF1α和RACGAP1蛋白表达水平 |
| 1.2.6 CCK-8检测细胞增殖能力 |
| 1.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡情况 |
| 1.2.8 划痕实验检测细胞迁移能力 |
| 1.2.9 Transwell检测细胞侵袭能力 |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 HIF1α和RACGAP1重组慢病毒分别成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.1 Western blot检测HIF-1α重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.2 免疫荧光检测HIF-1α重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.3 qPCR检测HIF-1α重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.4 RACGAP1干扰慢病毒转染Huh-7和Hep3B细胞筛选 |
| 2.1.5 Western blot检测RACGAP1重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.6 免疫荧光检测RACGAP1重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.1.7 qPCR检测RACGAP1重组慢病毒成功转染Huh-7和Hep3B细胞 |
| 2.2 HIF-1α基因诱导人肝癌细胞系增殖 |
| 2.3 HIF-1α基因抑制人肝癌细胞系凋亡 |
| 2.4 HIF-1α基因增加人肝癌细胞系迁移能力 |
| 2.5 HIF-1α基因提高人肝癌细胞侵袭能力 |
| 2.6 RACGAP1基因提高人肝癌细胞增殖能力 |
| 2.7 RACGAP1基因抑制人肝癌细胞凋亡 |
| 2.8 HIF-1α和RACGAP1协同促进人肝癌细胞凋亡 |
| 2.9 HIF-1α和RACGAP1协同促进人肝癌细胞侵袭 |
| 3 讨论 |
| 3.1 低氧与肿瘤 |
| 3.2 HIF-1α基因与肿瘤发展 |
| 3.3 RACGAP1基因与肿瘤发展 |
| 4 不足和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 缺氧诱导因子在原发性肝细胞癌中的作用机制综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及获得的科研成果 |
（4）熊去氧胆酸抑制缺氧诱导的原发性肝癌微环境中血管新生的作用和机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、小结 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 缺氧促进肝癌发生发展的机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（5）鼻咽癌磁共振动态增强参数与缺氧诱导因子-1α表达及临床分期的关系研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 研究设备及试剂 |
| 2.1.1 主要的仪器设备 |
| 2.1.2 主要的试剂和磁共振对比剂 |
| 2.2 临床资料 |
| 2.2.1 病例纳入标准 |
| 2.2.2 病例排除标准 |
| 2.3 磁共振扫描及后处理 |
| 2.3.1 常规MRI扫描 |
| 2.3.2 动态增强MRI扫描(DCE-MRI) |
| 2.3.3 工作站后处理 |
| 2.4 鼻咽癌临床分期及T、N、M分期标准 |
| 2.4.1 T分期 |
| 2.4.2 N分期 |
| 2.4.3.M分期 |
| 2.4.4.临床分期 |
| 2.5 病理及免疫组织化学 |
| 2.5.1 病理标本取材及处理 |
| 2.5.2 免疫组织化学法HIF-1α 检测 |
| 2.5.3 免疫组织化学法HIF-1α 表达结果判定 |
| 2.6 统计学处理与分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 患者的临床特征与分期 |
| 3.2 鼻咽癌DCE-MRI信号特征及参数 |
| 3.2.1 鼻咽癌DCE-MRI信号特征 |
| 3.2.2 鼻咽癌DCE-MRI参数 |
| 3.3 鼻咽癌组织病理诊断和和免疫组织化学检测HIF-1α 的表达 |
| 3.4 鼻咽癌DCE-MRI参数与临床特征及分期的关系 |
| 3.5 鼻咽癌HIF-1α 表达与临床特征及分期的关系 |
| 3.6 鼻咽癌DCE-MRI各参数与HIF-1α 表达的关系 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 鼻咽癌HIF-1α 表达与临床特征及肿瘤分期的关系 |
| 4.2 鼻咽癌DCE-MRI参数的临床意义及其与肿瘤分期的关系 |
| 4.3 鼻咽癌DCE-MRI参数与HIF-1α 表达的关系 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（6）HIF-1α通过调控与血管生成相关基因对食管癌组织血管生成及食管癌细胞放射敏感性的影响研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 基于基因芯片数据的食管癌血管生成相关基因生物信息学分析 |
| 1 研究内容和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 数据处理与统计学分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 食管癌组织中HIF-1α、VEGF和 AGGF1 的表达及其与食管癌放疗疗效的关系 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 治疗方法 |
| 1.3 检测方法 |
| 1.4 结果判定 |
| 1.5 随访 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 2ME2通过抑制HIF-1α表达增加Eca109 细胞放射敏感性的实验研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 缺氧诱导因子-1与肿瘤放射敏感性的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 新疆医科大学博士研究生学位论文 导师评阅表 |
（7）HIF-1α及其靶基因在宫颈癌中的表达（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果判定 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 2组HIF-1α、GLUT-1、VEGF表达阳性率比较 |
| 2.2 不同类型宫颈癌中HIF-1α、GLUT-1、VEGF表达阳性率比较 |
| 2.3 宫颈癌中HIF-1α与GLUT-1、VEGF表达的相关性 |
| 3 讨论 |
（8）缺氧诱导因子-1在宫颈癌发病机制中的作用（论文提纲范文）
| 1 HIF-1的结构特点 |
| 2 HIF-1的活性调节及功能 |
| 3 HIF-1α在肿瘤发生中的作用机制 |
| 4 HIF-1α在宫颈癌中的发病机制及研究进展 |
| 4.1 HIF-1α与HPV |
| 4.2 HIF-1α与p53 |
| 4.3 HIF-1α与VEGF |
| 5 HIF-1α与宫颈癌的关系 |
（9）HIF-1α及CD105在子宫内膜癌中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 提要 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 实验仪器主要包括 |
| 2.1.3 试剂主要有 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果判断 |
| 2.4 统计学数据分析方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 HIF-1α、CD105 蛋白分别在子宫内膜腺癌、不典型增生内膜组织、正常对照组中的表达 |
| 3.2 HIF-lα阳性表达与子宫内膜腺癌各临床病理学因素的关系 |
| 3.2.1 子宫内膜腺癌的患者是否绝经与 HIF-lα阳性表达的关系 |
| 3.2.2 子宫内膜腺癌的手术-病理分期与 HIF-lα阳性表达的关系 |
| 3.2.3 子宫内膜腺癌的组织病理分级与 HIF-lα阳性表达的关系 |
| 3.2.4 子宫内膜腺癌的浸润肌层深度与 HIF-lα阳性表达的关系 |
| 3.2.5 子宫内膜腺癌的淋巴结有无转移与 HIF-lα阳性表达的关系 |
| 3.3 CD105 阳性表达与子宫内膜腺癌各临床病理学因素的关系 |
| 3.3.1 子宫内膜腺癌的是否绝经与 CD105 阳性表达的关系 |
| 3.3.2 子宫内膜腺癌的手术-病理分期与 CD105 阳性表达的关系.. |
| 3.3.3 子宫内膜腺癌的组织学病理分级与 CD105 阳性表达的关系9 |
| 3.3.4 子宫内膜腺癌的肌层浸润深度与 CD105 阳性表达的关系 ... |
| 3.3.5 子宫内膜腺癌的淋巴结有无转移与 CD105 阳性表达的关系9 |
| 3.4 分析 HIF-1α、CD105 两种蛋白在子宫内膜腺癌中表达的相关性 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 简述 HIF-1α基因及作用 |
| 4.2 HIF-1α在子宫内膜癌中的表达及意义 |
| 4.3 简述 CD105 的构成及作用 |
| 4.4 CD105 在子宫内膜癌中的表达及意义 |
| 4.5 HIF-1α和 CD105 的关系及联合检测的意义 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（10）低氧诱导因子在肿瘤中的表达及其意义（论文提纲范文）
| 一、HIF结构与功能 |
| 二、HIF-1α在肿瘤的表达及其意义 |
| (一)HIF-1α在胰腺癌的表达及其意义 |
| (二)HIF-1α在子宫及附件癌症的表达及其意义 |
| 1. HIF-1α对子宫内膜癌发生、发展及预后的影响: |
| 2. HIF-1α对宫颈癌发生、发展及预后的影响: |
| 3. HIF-1α对卵巢癌发生、发展及预后的影响: |
| (三)HIF-1α与乳腺浸润性导管癌(IDC)的关系 |
| (四)HIF-1α与肺癌的关系 |
| (五)HIF-1α与膀胱移行细胞癌的关系 |
| (六)HIF-1α与肾癌的表达及临床意义 |
| (七)HIF-1α在其他肿瘤的表达及临床意义 |
| 三、展望 |
四、宫颈癌中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的关系（论文参考文献）
- [1]miR-326调控SIRT1/HIF1α/VEGFA轴改善非小细胞肺癌化疗耐药的分子机制[D]. 魏金婴. 吉林大学, 2021(01)
- [2]HIF-1、GLUT-1、CA9在结直肠癌中的表达及其临床意义[D]. 祁志勇. 吉林大学, 2021(01)
- [3]缺氧微环境中HIF-1/RACGAP1调控人肝癌细胞发生发展的机制研究[D]. 吴贤建. 右江民族医学院, 2021(01)
- [4]熊去氧胆酸抑制缺氧诱导的原发性肝癌微环境中血管新生的作用和机制[D]. 孟永斌. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(02)
- [5]鼻咽癌磁共振动态增强参数与缺氧诱导因子-1α表达及临床分期的关系研究[D]. 刘岚. 南昌大学, 2020(08)
- [6]HIF-1α通过调控与血管生成相关基因对食管癌组织血管生成及食管癌细胞放射敏感性的影响研究[D]. 陆艳荣. 新疆医科大学, 2017(08)
- [7]HIF-1α及其靶基因在宫颈癌中的表达[J]. 王芳,尹立勇,娄娟,顾涛,付占昭. 河北医科大学学报, 2017(07)
- [8]缺氧诱导因子-1在宫颈癌发病机制中的作用[J]. 关涛,田晓予,张睿. 中国当代医药, 2014(13)
- [9]HIF-1α及CD105在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[D]. 李军丽. 吉林大学, 2014(10)
- [10]低氧诱导因子在肿瘤中的表达及其意义[J]. 薛同敏,张培建,刘霞,朱世春. 中华临床医师杂志(电子版), 2013(10)