白花虎眼万年青OtDCAF8基因的克隆及功能分析

白花虎眼万年青OtDCAF8基因的克隆及功能分析

论文摘要

DCAF (DDB1-CUL4 Associated Factor)是以CUL4 (CULLIN4)蛋白为骨架的E3泛素-蛋白连接酶复合体,这类复合体通过一个共同的衔接蛋白DDB1 (UV-damaged DNA binding protein 1)连接不同的底物识别亚基DCAF,介导各自特定的蛋白底物的降解,从而参与调控了多种生物学过程。为分析DCAF基因在白花虎眼万年青叶上珠芽、叶片和鳞茎等器官的功能和作用,本研究首次从百合科植物白花虎眼万年青叶上珠芽中分离出DCAF基因家族重要成员,进行氨基酸保守序列比对及系统进化分析后,将其命名为OtDCAF8基因;将其置于UBI启动子下在烟草中超量表达,转基因烟草的叶片形状、叶脉等发生了明显的改变。结果表明,OtDCAF8基因对植物干细胞及器官再生发育具有明显调控作用,可能在白花虎眼万年青的珠芽和叶片等器官发育过程中发挥着重要作用。本研究为深入探讨白花虎眼万年青珠芽等器官发育的分子机制和DCAF基因的功能提供了参考和依据,为百合等花卉的分子育种提供了有价值的重要功能基因。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 白花虎眼万年青OtDCAF8基因的克隆
  •   1.2 白花虎眼万年青OtDCAF8基因的生物信息学分析
  •   1.3 将OtDCAF8基因置于泛素启动子下进行超量表达
  •   1.4 转基因烟草的获得与表型鉴定
  •   1.5 转基因烟草的分子鉴定
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 植物材料的培养与获得
  •   3.2 提取RNA及反转录为cDNA模板
  •   3.3 OtDCAF8基因编码区的扩增与获得
  •   3.4 OtDCAF8基因的生物信息学分析
  •   3.5 将OtDCAF8基因置于泛素启动子下进行超量表达
  •   3.6 转OtDCAF8基因烟草的获得
  •   3.7 转基因烟草的分子鉴定和表型分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 姜福星,黄远祥,周鹏,赵婕,文好雨,张浪

    关键词: 白花虎眼万年青,叶上珠芽,基因,干细胞,器官发育

    来源: 分子植物育种 2019年21期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,园艺

    单位: 四川农业大学园林研究所,四川天艺生态园林集团股份有限公司

    基金: 四川省教育厅重点项目(15ZA0023),四川农业大学学科建设双支计划(03572579),立体绿化品种选育项目(640H1000)共同资助

    分类号: Q943.2;S682.29

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.007010

    页码: 7010-7016

    总页数: 7

    文件大小: 1883K

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