导读:本文包含了柔性固定化酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:柔性,蛋白酶,淀粉,木瓜,聚苯乙烯,壳聚糖,菊粉。
柔性固定化酶论文文献综述
周蕊,张丽倩,潘鸣岐,曲伟光[1]（2019）在《梳状聚苯乙烯环氧载体的制备及其对Pseudomonas aeruginosa LX1脂肪酶的柔性固定化》一文中研究指出以氯磺化交联聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-SO_2Cl)树脂为基质,依次与壳聚糖(Chi)和环氧氯丙烷(ECH)反应,制得了具有柔性链的梳状聚苯乙烯环氧载体PS-SO_2-Chi-ECH,研究了缚酸剂用量和种类、反应时间、反应温度及ECH用量对载体制备的影响。结果表明,较优的制备条件为:用Na_2CO_3作缚酸剂,壳聚糖树脂、Na_2CO_3和ECH的物质的量比1∶5∶5.0,反应时间2 h,反应温度50℃。将该聚苯乙烯环氧载体用于Pseudomonas aeruginosa LX1脂肪酶的共价柔性固定化,固定化酶的热稳定性和贮藏稳定性均较游离酶明显提高。(本文来源于《化学与生物工程》期刊2019年03期）
曲伟光,魏荣卿,何冰芳,刘晓宁,仲玉[2]（2011）在《亲水梳状环氧聚合物载体柔性固定化脂肪酶》一文中研究指出以氯乙酰化聚苯乙烯微球载体为大分子引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和亲水性丙烯酰胺为共聚接枝单体,以氯化亚铜及2,2′-联吡啶为催化体系,采用原子转移自由基聚合法接枝合成了具有柔性链的亲水梳状环氧聚合物载体PS-acyl-P(AM-co-GMA),并将其用于耐有机溶剂YCJ01脂肪酶的共价柔性固定化.结果表明,固定化酶催化对硝基苯酚棕榈酸酯水解的最适温度为45~55oC,pH=8.5,此时酶活为16.6U/g;在80oC以下,pH=5~10时,酶的活性稳定;连续进行7次间歇操作,固定化酶保留初始活性的73.5%;于4oC保存60d,酶活仍剩余86.8%.经亲水梳状环氧载体柔性固定化后,该脂肪酶对有机溶剂的耐受性有所提高.(本文来源于《催化学报》期刊2011年12期）
陈忻,张俊敏,孙恢礼,杜健海,袁毅桦[3]（2010）在《柔性固定化木瓜蛋白酶的制备及在酶解波纹巴非蛤中的应用》一文中研究指出在壳聚糖膜的表面接上分子链较长的双醛淀粉作为柔性固定化酶的载体,将木瓜蛋白酶固定在该载体上制成柔性固定化木瓜蛋白酶,并应用于酶解波纹巴非蛤制备小分子肽。通过考察温度、pH值、加酶量和固定化时间等条件对柔性固定化木瓜蛋白酶的酶活、酶活回收率的影响,确定最优固定化条件。结果表明:双醛淀粉用量0.8mg/g壳聚糖、柔性固定化酶温度25℃、柔性固定化酶时间20h、加酶量40mg/g壳聚糖、pH8.0条件下所得的固定化酶酶活最高,酶活回收率63.35%。将该柔性固定化酶在酶解温度40℃、pH7.0、加酶量1.0%、酶解时间4h条件下制备波纹巴非蛤小分子肽,产率为3.4055%。(本文来源于《食品科学》期刊2010年22期）
胡秀沂[4]（2007）在《菊粉的制备及壳聚糖柔性固定化菊粉酶酶解菊粉的研究》一文中研究指出本论文研究了菊芋中多酚氧化酶(PPO)的酶学性质、新鲜菊芋的预处理、菊粉的微波技术辅助提取、菊粉的精制、超滤膜分离技术分级纯化菊粉、菊粉酶的壳聚糖柔性固定化、固定化菊粉酶酶学性质以及固定化菊粉酶连续酶解菊粉。采用0.1mol／L柠檬酸缓冲溶液匀浆法从菊芋中提取多酚氧化酶(PPO)，并对菊芋中多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。实验结果表明，以邻苯二酚为底物，该酶的最适pH值为7.4，最适温度为20℃，Km值为11.11mmol／L，Vm值为0.536 OD_(415)／min，90℃热处理2min可完全钝化PPO的活性，0.40g／L的抗坏血酸、0.520g／L的亚硫酸氢钠能有效抑制PPO的酶活性。通过均匀设计实验优化新鲜菊芋预处理工艺，得到最佳工艺条件为：在100℃条件下烫漂10min，再在50℃干制7h。采用微波辅助提取工艺可有效提取菊芋中的菊粉，通过正交实验得到微波辅助提取菊粉的最佳工艺条件是：菊芋干片与水固液比1：18，功率400w，微波作用270s，在95℃条件下提取40min，菊粉提取率高达99％。菊粉粗提液依次经过石灰乳—磷酸法、阴离子交换树脂、阳离子交换树脂处理后，得到菊粉精制溶液，其菊粉含量由原来的3.44g／100mL降低到2.94g／100mL，透射比由原来的0.6上升到96.1，菊粉保存率为85.46％，溶液得到澄清以及部分纯化。通过对菊粉精制溶液进行叁级超滤膜处理，得到菊粉的分子量分布情况：分子量大于10KDa的质量占25.3％，分子量在5KDa和10KDa之间的质量占10.7％，分子量在3KDa和5KDa之间的质量占11.2％，分子量少于3KDa的质量占31.6％。菊粉经膜处理后的总回收率为78.8％。3KDa膜浓缩液经乙醇沉淀低温干燥后的菊粉纯度为76.74％，远远大于国产菊粉的纯度，比进口菊粉的纯度(86.19％)仅低10％。采用壳聚糖载体柔性固定化的方法，实现了对菊粉酶的固定化；在双醛淀粉(DAS)的理论氧化度为1、加酶量为0.5 mL、固定化温度为15℃、pH5.8的磷酸缓冲液条件下，固定化24h，所得到的固定化菊粉酶酶活回收率高达95％以上。测得固定化菊粉酶最适反应温度为60℃、最适反应pH为4.6、Km值为1.95μmol／mL、Vm值为2.12μmol／min、I／S比值为1.04。固定化菊粉酶具有较好的温度稳定性和很好的pH稳定性。在固定化菊粉酶连续酶解菊粉的试验中，随着底物流速的增大，同一底物浓度下的底物降解率逐渐减少，而反应器的定容产率逐渐增大；随着底物浓度的增大，同一流速下的底物降解率逐渐下降，而定容产率逐渐上升。考虑到菊粉的溶解度及生产效率，实际生产宜采用10％菊粉浓度。操作稳定性是衡量固定化酶实用价值的主要指标。通过计算，得到固定化菊粉酶的衰减系数K_d=0.01521，操作半衰期t_(1/2)=45d。(本文来源于《贵州大学》期刊2007-05-01）
沈斌,魏荣卿,刘晓宁,朱建星,欧阳平凯[5]（2005）在《胺化聚苯乙烯载体柔性固定化木瓜蛋白酶》一文中研究指出提出酶的“柔性固定化”模型,并以Mannich反应得到担载量为0.4～6.0mmolNH2·g-1的胺化聚苯乙烯树脂为载体,以双醛淀粉为柔性链,对木瓜蛋白酶进行柔性固定化,酶活回收率可达40%～50%,相当于手臂固定化酶活力回收率的1.8～2.4倍,且柔性固定化酶稳定性较好.该结果说明,酶的“柔性固定化”模型可以改善传统共价结合固定化酶及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷.(本文来源于《化工学报》期刊2005年06期）
魏荣卿,沈斌,刘晓宁,汪海萍,王宇星[6]（2005）在《壳聚糖载体柔性固定化木瓜蛋白酶》一文中研究指出采用酶柔性固定化模型,以壳聚糖为载体,双醛淀粉为柔性链,对木瓜蛋白酶进行柔性固定化. 通过对固定化条件的优化,得出选用壳聚糖、双醛淀粉制得的柔性载体(Chitosan-DAS50)在酶用量为14.4 mg/g(酶/干球)、pH 8的条件下,固定木瓜蛋白酶18 h,所得的固定化酶活力回收率达72%,相当于采用壳聚糖-戊二醛(Chitosan-GA)手臂载体的3倍. 结果表明,酶的柔性固定化模型可以改善传统共价结合法固定化及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷.(本文来源于《过程工程学报》期刊2005年02期）
刘晓宁,沈斌,魏荣卿,韦萍,周华[7]（2004）在《木瓜蛋白酶的的柔性固定化研究》一文中研究指出共价结合法固定化的酶,酶与载体间的结合较牢固,不易脱落,可以长时间连续使用,所有共价固定已经成为当前最活跃的固定化方法之一。但这种固定化酶的方法也存在问题:固定化酶的酶活回收率低。其主要原因可能有叁点:一、在固定化过程中酶分子与载体的刚性碰撞,使活性降低;二、固定化的载体一般为疏水性物质,会导致酶蛋白构象发生折迭、失活;叁、酶与载体骨架相距太近,影响固定化酶的活性。为克服这些问题,人们对酶的固定化进行了深入的研究。(本文来源于《第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)》期刊2004-11-01）
刘晓宁,魏荣卿,沈斌[8]（2004）在《木瓜蛋白酶的柔性固定化研究》一文中研究指出以双醛淀粉为柔性接枝链,对不同载体表面进行修饰后对木瓜蛋白酶进行柔性固定化,通过对固定化条件的优化,得出:用此柔性载体固定木瓜蛋白酶所得到的固定化酶活力回收率达约相当于手臂固定化的2～3倍。结果说明,双醛淀粉作为接枝链具有维持酶蛋白构象的柔性作用,采用这种“柔性固定化”模型可以改善传统共价结合固定法及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷。另外对柔性固定化酶的稳定性考察发现其稳定性远好于游离酶。(本文来源于《2004年全国生物技术学术研讨会论文集》期刊2004-08-01）
沈斌[9]（2004）在《木瓜蛋白酶的柔性固定化研究》一文中研究指出传统共价结合法固定化酶的优势在于酶与载体结合牢固,不易发生酶脱落,可以长时间连续使用,所以成为目前研究最活跃的固定化方法之一。但共价结合法固定化酶的最大弱点在于酶活回收率低,其主要原因之一可能是:在共价偶联固定化的过程中,酶蛋白与载体表面之间所产生的碰撞力使酶蛋白的正常(天然)构象不能得以维持,所以,如果能从分子水平考虑改善载体表界面的特性,则有望提高固定化酶的性能。基于林思聪就生物材料表面性质、结构与其抗凝血性之间的关系提出的“维持正常构象”假说及 Bayer 在多肽合成技术的综述中阐述的柔性链的作用机理,本文提出了酶的“柔性固定化”模型,并通过柔性固定化载体的设计、制备及应用来证明柔性固定化模型的可行性。在第一部分中,本文概括了国内外酶固定化技术发展及应用状况,总结了传统的酶固定化方法、原则及优缺点。其中共价结合法是目前研究最为活跃的固定化方法之一,但该方法所得到的固定化酶活回收率偏低,本文在总结前人采用的刚性固定化及手臂固定化方法的基础上,提出了酶的“柔性固定化”模型。此模型的主旨是在酶蛋白与载体分子之间接入一段柔顺、亲水的大分子链(即柔性链),以使固定化载体分子表面的刚性及疏水性得到改善,并具有柔顺,亲水的性质。这样可以减少在酶固定化过程中因刚性碰撞造成的酶活损失,同时又可最大限度地保留酶游离态的均相催化活性。从而解决共价结合法固定化酶活力回收率偏低的问题。在第二部分中,本文考虑到淀粉分子具有柔顺、亲水以及良好的生物相容性的特性,故通过对其氧化活化制得含有多醛基的双醛淀粉柔性链。在双醛淀粉的制备过程中,本文改进了常规的非均相体系,采用一种拟均相体系法,并研究了此体系的作用机理。实验结果表明,在拟均相体系中制备双醛淀粉,可以在低温下(0℃)、近中性 pH(4.4)、用少量的氧化剂,获得更高的氧化反应速度,同时避免了副反应,产品性能得到改善。在第叁部分中,本文分别用双醛淀粉柔性链,戊二醛手臂链对多种载体(胺化聚苯乙烯微球、羧基化聚苯乙烯微球及壳聚糖载体)进行反应,制得各种柔性 Ⅰ<WP=5>南京工业大学硕士学位论文载体和手臂载体,再用其对木瓜蛋白酶进行柔性固定化和手臂固定化,并优化了柔性固定化的条件(包括固定化的方法,载体上的功能基团如胺基、羧基,柔性链的用量及其醛基含量,固定化时间,温度,pH,酶用量等)。实验结果表明,在最佳的固定化条件下,胺化、羧基化聚苯乙烯柔性固定化酶活力回收率为 40～50%,壳聚糖载体柔性固定化酶活力回收率可达 70%,而叁种载体的手臂固定化酶活力回收率只有 20～30%,这说明,酶的“柔性固定化”模型有效地克服了传统共价结合法固定化酶的不足,使酶活回收率提高到 2～3 倍。讨论认为:酶活回收率的提高,至少由叁个因素引起,一是,柔性载体减少了酶构象的改变;二是,柔性载体可提高酶的固定化速度;叁是,柔性固定化酶保留有较高的自由度。另外,通过对柔性固定化酶的稳定性的初步考察,发现柔性固定化酶使用 7～8 批次后仍保留有一半的活力,在室温下储存半衰期为 30～40d,在 70℃下育温 1h 后,仍有 60%以上的活力,经 50%(v/v)的有机试剂浸泡后,也仍有 50%以上的活力。可见柔性固定化酶的稳定性好于游离酶。最后,本文在总结前文的基础上,对今后的柔性固定化模型研究工作提出了一些建议和构想。(本文来源于《南京工业大学》期刊2004-05-01）
柔性固定化酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以氯乙酰化聚苯乙烯微球载体为大分子引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和亲水性丙烯酰胺为共聚接枝单体,以氯化亚铜及2,2′-联吡啶为催化体系,采用原子转移自由基聚合法接枝合成了具有柔性链的亲水梳状环氧聚合物载体PS-acyl-P(AM-co-GMA),并将其用于耐有机溶剂YCJ01脂肪酶的共价柔性固定化.结果表明,固定化酶催化对硝基苯酚棕榈酸酯水解的最适温度为45~55oC,pH=8.5,此时酶活为16.6U/g;在80oC以下,pH=5~10时,酶的活性稳定;连续进行7次间歇操作,固定化酶保留初始活性的73.5%;于4oC保存60d,酶活仍剩余86.8%.经亲水梳状环氧载体柔性固定化后,该脂肪酶对有机溶剂的耐受性有所提高.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
柔性固定化酶论文参考文献
[1].周蕊,张丽倩,潘鸣岐,曲伟光.梳状聚苯乙烯环氧载体的制备及其对PseudomonasaeruginosaLX1脂肪酶的柔性固定化[J].化学与生物工程.2019
[2].曲伟光,魏荣卿,何冰芳,刘晓宁,仲玉.亲水梳状环氧聚合物载体柔性固定化脂肪酶[J].催化学报.2011
[3].陈忻,张俊敏,孙恢礼,杜健海,袁毅桦.柔性固定化木瓜蛋白酶的制备及在酶解波纹巴非蛤中的应用[J].食品科学.2010
[4].胡秀沂.菊粉的制备及壳聚糖柔性固定化菊粉酶酶解菊粉的研究[D].贵州大学.2007
[5].沈斌,魏荣卿,刘晓宁,朱建星,欧阳平凯.胺化聚苯乙烯载体柔性固定化木瓜蛋白酶[J].化工学报.2005
[6].魏荣卿,沈斌,刘晓宁,汪海萍,王宇星.壳聚糖载体柔性固定化木瓜蛋白酶[J].过程工程学报.2005
[7].刘晓宁,沈斌,魏荣卿,韦萍,周华.木瓜蛋白酶的的柔性固定化研究[C].第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下).2004
[8].刘晓宁,魏荣卿,沈斌.木瓜蛋白酶的柔性固定化研究[C].2004年全国生物技术学术研讨会论文集.2004
[9].沈斌.木瓜蛋白酶的柔性固定化研究[D].南京工业大学.2004
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