一株具有噬菌体抗性的芽孢杆菌BS-2的鉴定及葡萄糖流加工艺优化

论文摘要

筛选噬菌体抗性菌株以解决枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）生产过程中噬菌体污染问题并提高抗性菌株的发酵水平。采用双层平板法从异常发酵液中分离并纯化以枯草芽孢杆菌为宿主的噬菌体,利用纯化得到的噬菌体筛选实验室芽孢杆菌库以得到抗性菌株,结合16S rDNA和gyrA基因序列进行系统发育分析确定其分类地位,以分批发酵的生长曲线及葡萄糖含量曲线作为基础,对发酵培养基的初糖浓度及葡萄糖的流加方式进行优化提高筛选到的噬菌体抗性菌株的发酵水平。从异常发酵液中分离到噬菌体S01及S02并在实验室芽孢杆菌库中筛选到一株噬菌体无法侵染的芽孢杆菌BS-2,结合16S rDNA及gyrA基因序列的系统发育分析将BS-2鉴定为枯草芽孢杆菌,按照葡萄糖初始浓度15 g/L,葡萄糖浓度低于5 g/L时以2 g/L·h的速度流加葡萄糖,补加量10 g/L的流加补料方法,可以将发酵水平提高至2.43×1010 CFU/mL。枯草芽孢杆菌BS-2具有较好的噬菌体抗性且经过工艺优化可以达到较高发酵水平,有较强工业化应用潜力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 噬菌体的分离纯化
•     1.2.2保藏菌株的噬菌体抗性筛选
•     1.2.3 噬菌体抗性菌株的分子鉴定
•     1.2.4 枯草芽孢杆菌发酵工艺优化
•       1.2.4. 1 发酵种子液的制备
•       1.2.4. 2 分批发酵工艺
•       1.2.4. 3 流加发酵工艺
•     1.2.5 发酵过程中生物量的测定
•     1.2.6 葡萄糖含量测定
• 2 结果
•   2.1 噬菌体分离及原液制备
•   2.2 噬菌体抗性菌株筛选
•   2.3 菌株BS-2的分子生物学鉴定
•     2.3.1基于16S rDNA序列比对结果的系统进化分析
•     2.3.2 基于gyrA基因序列BLAST结果的系统进化分析
•   2.4 葡萄糖流加方式对BS-2发酵的影响
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 戚家明,杨娜,孙杉杉,明艳超,郭亮,张东旭,徐志文

关键词: 噬菌体抗性,枯草芽孢杆菌,基因,流加发酵

来源: 生物技术通报 2019年03期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,一般化学工业

单位: 河北省农业生物技术工程技术研究中心,河北省农业厅植物营养与海洋功能肥料重点实验室,领先生物农业股份有限公司

基金: 河北省产业创新创业团队(169A76114H)

分类号: TQ920.1;Q93

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0670

页码: 210-216

总页数: 7

文件大小: 3312K

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