导读:本文包含了骨骼肌卫星细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:骨骼肌,细胞,哈萨克,内皮,病理学,挫伤,法医。
骨骼肌卫星细胞论文文献综述
黄子莹,李龙,李倩倩,刘向东,李长春[1]（2019）在《lncRNA TCONS_00815878对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响》一文中研究指出猪骨骼肌发育是一个复杂的生物学过程,其中骨骼肌卫星细胞分化是影响骨骼肌发育的重要环节。近年来发现长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)在骨骼肌卫星细胞分化中具有重要作用。为探究lncRNA TCONS_00815878对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,本研究利用qRT-PCR技术检测出生7 d内大白仔猪6种组织(心脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和腿肌)及从胚胎期到出生后5个不同时间点(35 d、45 d、55 d胚胎及产后第7 d和第200 d后腿肌肉组织) TCONS_00815878的表达情况;利用反义核苷酸(antisense oligonucleotides, ASO)在猪骨骼肌卫星细胞中敲低TCONS_00815878,检验分化标记基因MyoD、MyoG和MyHC表达情况;通过生物信息学分析预测TCONS_00815878靶基因,并利用DAVID软件在线预测其靶基因的功能与通路。结果表明:TCONS_00815878在猪心肌和腿肌中高表达;仔猪出生后7 d内,TCONS_00815878在猪肌肉组织中表达量不断升高,第7 d达到高峰;在猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程中,TCONS_00815878在分化期表达量不断上升,且在分化30 h表达量达到峰值;敲低TCONS_00815878后,MyoD、MyoG和MyHC基因表达量降低,其中MyoD表达量显着下降(P<0.05)。此外,功能预测结果发现,其靶基因富集到糖酵解和丙酮酸代谢等与骨骼肌卫星细胞分化相关的多个生物学过程。本研究推测,lncRNA TCONS_00815878可能对猪骨骼肌卫星细胞的分化起促进作用。(本文来源于《遗传》期刊2019年12期）
王轶敏,张蔚然,张俊星,刘新峰,郭宏[2]（2019）在《牛骨骼肌卫星细胞中miR-143互作lncRNA-HZ5的鉴定及其相互调控作用分析》一文中研究指出为探究miR-143与其互作lncRNA之间的关系及其在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的潜在作用机制,选取两个表达丰度较高mi R-143的预测互作lnc RNA(lnc RNA-HZ5和lnc RNA-HZ8)进行研究。采用双荧光素酶试验验证miR-143对预测互作lncRNA的靶向调控作用,采用qRT-PCR技术检测miR-143表达水平改变对预测互作lncRNA表达的影响,并采用qRT-PCR和westernblot技术检测干扰互作lncRNA表达后对miR-143表达水平及miR-143靶基因表达水平的影响。双荧光素酶试验结果表明,miR-143可直接调控lncRNA-HZ5的表达;在牛肌卫星细胞中过表达miR-143后,lncRNA-HZ5的表达水平显着下调,而抑制miR-143表达后,lncRNA-HZ5的表达水平显着上调;采用si RNA干扰lnc RNA-HZ5的表达,发现抑制lnc RNA-HZ5表达能够下调mi R-143表达,并上调miR-143靶基因IGFBP5的蛋白水平。研究结果表明,在牛骨骼肌卫星细胞中miR-143可以和lncRNA-HZ5发生相互调控作用,其对牛肌卫星细胞成肌分化的调控作用可能是通过互作来完成的。(本文来源于《天津农学院学报》期刊2019年03期）
解一凡,翟曼君,朱梦婷,牟健,赵宗胜[3]（2019）在《哈萨克羊骨骼肌卫星细胞的分离培养及鉴定》一文中研究指出为了建立可稳定传代的哈萨克羊骨骼肌卫星细胞培养体系,以90日龄的哈萨克羊胎羊后腿肌为试验材料,采用酶消化法(胶原酶与胰蛋白酶)对绵羊骨骼肌卫星细胞进行分离,差速贴壁法对细胞纯化;对得到的骨骼肌卫星细胞进行形态学鉴定;使用Pax7特异性标志蛋白进行免疫荧光鉴定。经过免疫荧光染色的Pax7基因的免疫阳性产物,呈明显的绿荧光,分布于细胞质中。本研究成功从哈萨克胎羊中分离出了具有良好增殖分化能力且便于传代的骨骼肌卫星细胞,为研究调控哈萨克羊肌肉生长发育的分子机制,为完善哈萨克羊肉品质的研究提供基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年09期）
金晶,冯祎中,黄伟,冯燕,陈彩珍[4]（2019）在《运动通过激活卫星细胞功能延缓和改善骨骼肌衰减症的研究进展》一文中研究指出阐述运动激活卫星细胞功能促进骨骼肌肥大的研究进展。骨骼肌衰减症(Sarcopenia)主要特征是骨骼肌肌力和质量的下降,然而Sarcopenia患者的卫星细胞出现严重"并发症":衰老增加卫星细胞激活难度,衰老下调卫星细胞数量,衰老弱化卫星细胞重塑能力。近期研究表明,运动可调控骨骼肌细胞外基质成分,促进骨骼肌细胞自噬的发生,降低骨骼肌氧化应激水平,运动可通过激活卫星细胞促进衰老骨骼肌的肥大和提升肌肉力量,从而延缓和改善Sarcopenia骨骼肌衰减进程。极度年老的动物和人类卫星细胞均发现失去活性,因此建议及早进行运动干预,可扭转卫星细胞功能。(本文来源于《体育科学》期刊2019年08期）
苏日娜[5]（2019）在《不同饲养方式对苏尼特羊宰后肉品质和骨骼肌卫星细胞分化的影响》一文中研究指出通过观察放牧、圈养苏尼特羊宰后屠宰性能、肉质品质以及骨骼肌肌纤维类型及卫星细胞的分化情况,分析骨骼肌卫星细胞增殖与多潜能分化在不同饲养方式下的变化规律,研究骨骼肌卫星细胞成肌、成脂分化改变肌肉组织结构对羊肉品质的影响。利用体外培养骨骼肌卫星细胞并进行单因素和多因素高糖、AICAR诱导实验,研究营养及运动量差异对肌源干细胞成肌、成脂分化的影响,从而探究不同饲养方式对骨骼肌组织结构、肌内脂肪含量的影响,从肌源干细胞角度解释分析饲养方式差异对羊肉品质的影响,从而为改善圈养苏尼特羊肉用品质提供数据支持与理论依据。研究以放牧组与圈养两组各12只、12月龄苏尼特羊为对象。比较两种饲养方式对苏尼特羊屠宰性能与肉品质的差异,并通过RT-PCR和western blotting检测与骨骼肌结构相关的基因与蛋白表达量,从骨骼肌卫星细胞增殖与分化的角度探究不同饲养方式对苏尼特羊肉品质的影响。研究结果如下:放牧组苏尼特羊宰前活体重、体长、体高以及胸围显着高于圈养组(P<0.05)。宰后的胴体重、胴体长、胴体深、肉骨比以及净肉重分别为放牧组苏尼特羊显着高于圈养组(P<0.05)。屠宰率、净肉率和产肉率是圈养苏尼特羊显着高于放牧羊(P<0.05)。取背最长肌测试宰后肉品质:圈养组pH l和pH24均显着大于放牧组(P<0.05)。红度值a*圈养组显着高于放牧组(P<0.05),黄度值b*放牧组显着高于圈养组(P<0.05),亮度值L在两组中没有显着差异(P>0.05)。蒸煮损失率、剪切力和肌内脂肪在放牧圈养组间差异均不显着(P>0.05)。肌肉中肌纤维分型在放牧圈养组中的差异变化结果为,MyHCI表达量在两组中差异不显着(P>0.05),MyHCⅡa在圈养组表达量显着高于放牧组(P<0.05),MyHCⅡb表达量在圈养组显着低于放牧组(P<0.05),MyHCⅡx在两组间差异不显着(P>0.05)。结果表明圈养使苏尼特羊背最长肌肌纤维类型由快速酵解型向快速氧化型肌纤维转化。取各组苏尼特羊背最长肌进行western blotting检测骨骼肌卫星细胞、成肌细胞、成脂细胞以及棕色脂肪组织特异性蛋白进行定量分析,结果显示:圈养条件下Pax7的表达量显着低于放牧条件(P<0.05),MyoD的表达量在圈养羊中显着低于放牧羊(P<0.05),PPARg表达量在两种饲养方式下没有显着差异(P>0.05),UCP-1的表达量在圈养羊中显着高于放牧羊(P<0.05)。说明饲养方式的改变能够改变骨骼肌卫星细胞的活性与分化方向。相关性分析苏尼特羊肉品质与骨骼肌生长相关基因与蛋白表达量得出:pHl、pH24值与黄度值b*显着负相关(P<0.05)。Pax7蛋白表达量与pHl、pH24极显着负相关(P<0.01),与黄度值显着正相关(P<0.05);MyHC Ⅰ基因表达量与亮度值成正比(P<0.05);MyHCⅡa基因表达量与黄度值显着负相关(P<0.05);MyHCⅡb基因表达量与pH1、pH2负相关(P<0.05),与红度值显着负相关(P<0.05),与黄度值显着正相关(P<0.05)。结合两种饲养方式的差异性分析可以得出:圈养组苏尼特羊由于缺乏运动引起的卫星细胞活性和成肌分化能力降低,使宰后背最长肌的pH升高从而降低了肉色的黄度;而圈养羊肌纤维类型由快速酵解型向氧化型转换也是宰后肉质pH升高以及黄度降低的原因。但本研究并未发现Pax7蛋白与MyHCⅡb基因表达量的显着相关性。为了进一步验证不同饲养方式能够通过改变运动量与营养水平来调控骨骼肌卫星细胞的自我更新与分化能力,体外分离培养大鼠骨骼肌卫星细胞并进行单因素高糖诱导实验、单因素AICAR诱导实验以及多因素高糖与AICAR协同诱导实验。通过western blotting、免疫荧光染色和油红O染色检测细胞分化过程中骨骼肌卫星细胞特异性蛋白Pax7、成肌细胞特异性蛋白MyoD、成脂细胞特异性蛋白PPARg以及棕色脂肪细胞特异性蛋白UCP-1的表达量,分析高血糖浓度以及运动对肌源干细胞分化的影响。结果表明:单因素15mM葡萄糖诱导卫星细胞向Myf5+细胞分化;25mM葡萄糖诱导卫星细胞向棕色脂肪细胞分化;35mM葡萄糖诱导卫星细胞向成脂细胞方向分化。由此证明,高浓度的血糖环境能够刺激体内肌源干细胞向脂肪细胞或者棕色脂肪细胞分化。单因素300μM AICAR显着激活骨骼肌卫星细胞的活性并向成肌细胞分化,从而证明运动激活的AMPK蛋白能够调控骨骼肌卫星细胞不断更新并向成肌细胞分化。25mM高糖与AICAR的协同诱导撤回了卫星细胞的多潜能分化途径,维持了卫星细胞的自我更新途径,可见运动训练能够抵消一定量高血糖浓度引起的肌源干细胞成脂分化作用。35mM高糖与AICAR协同作用能够快速的激活卫星细胞的多潜能分化能力,但不能持续到分化终期。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2019-06-01）
王升[6]（2019）在《组蛋白修饰调控猪骨骼肌卫星细胞成肌分化机制研究》一文中研究指出猪骨骼肌卫星细胞在猪的肌肉发育及再生过程中起到极为重要的作用。在猪肌肉生成过程中,骨骼肌卫星细胞作为肌肉干细胞,通过激活、增殖分化形成肌管参与肌肉的发育和修复过程。已有研究表明,成肌过程中卫星细胞的增殖和分化受信号通路、转录因子及表观修饰等一系列因素的调控。其中,表观修饰通过改变组蛋白和转录因子的共价修饰及相应的染色质构象,激活成肌特异基因的表达,调控成肌祖细胞命运及卫星细胞不同状态之间的准确转换。目前对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程的表观遗传机制研究仍较少。因此,本研究使用新生仔猪进行原代骨骼肌卫星细胞分离及培养研究。结合RNA-Seq和ChIP-Seq技术对增殖和分化的猪骨骼肌卫星细胞基因转录及叁种组蛋白(H3K4me3、H3K27ac和H3K27me3)和RNA聚合酶II(RNA polymorse II,RNAPII)的修饰模式进行综合分析,解析猪骨骼肌卫星细胞分化过程中组蛋白修饰调控基因差异表达的分子机制。主要取得了如下结果:(1)建立并优化猪骨骼肌卫星细胞原代分离及培养方法。本研究建立并比较两种骨骼肌卫星细胞分离方法,发现组织块消化法分离猪骨骼肌卫星细胞实验周期短,所获得细胞量大。且原代分离的猪骨骼肌卫星细胞增殖速度快,具有较强的肌源干细胞特性,诱导分化两天即可观察到大量明显的肌管形成。在培养基中添加白血病抑制因子、GSK3β和MEK1/2抑制物能够有效维持骨骼肌卫星细胞的干细胞特性,上调卫星细胞中PAX7的表达量。(2)鉴定了原代猪骨骼肌卫星细胞纯度、传代能力以及转染效率。研究表明,传代后的猪骨骼肌卫星细胞依然能够快速增殖,具有较强的肌源性分化能力。且转染后的GFP阳性卫星细胞统计结果表明,猪骨骼肌卫星细胞转染效率约为46%。此外,通过免疫荧光实验发现PAX7阳性的卫星细胞纯度约为93%,能够用于后期相关实验研究。(3)鉴定了成肌相关marker基因在猪骨骼肌卫星细胞分化过程中的表达模式。免疫荧光结果表明,PAX7和MYOD1均在增殖期卫星细胞中高表达,而MYOG和MYOSIN仅能够在分化的肌管中检测到。(4)深度挖掘并分析了猪骨骼肌卫星细胞基因表达图谱,构建了卫星细胞基因调控网络。转录组分析发现骨骼肌卫星细胞分化过程中有917个差异表达基因,其中上调表达基因511个,下调表达基因406个,主要富集在肌肉发育和细胞周期相关的生物学过程中,也发现部分组蛋白生成及染色质重塑相关的基因在细胞分化过程中差异表达。同时,5个上调表达基因和9个下调表达基因的qPCR结果表明卫星细胞中的基因表达差异与高通量测序数据分析结果相一致。(5)鉴定了叁种组蛋白修饰(H3K4me3、H3K27ac和H3K27me3)和转录因子RNAPII在全基因组范围内的表观修饰模式,并检测到组蛋白修饰在卫星细胞分化过程中修饰程度显着下调,其中H3K27me3组蛋白修饰程度降低约50%,组蛋白结合峰从22060减少至11573个。且RNAPII修饰水平在转录起始位点和基因区剧烈下降,减少了3958个信号结合峰,进一步调节基因表达模式,促进猪骨骼肌卫星细胞肌源性分化。(6)绘制了基因转录和表观修饰模式图谱,并分析基因表达与叁种组蛋白修饰及RNAPII之间的联系。H3K4me3和H3K27ac组蛋白修饰以及转录因子RNAPII主要标记活性基因的转录起始位点。而H3K27me3修饰则主要富集在染色质抑制区域,调节179个基因的转录表达。(7)解释了组蛋白修饰变化对基因差异表达的调控机制,表明在猪骨骼肌卫星细胞分化过程中,基因的上调表达伴随着明显的RNAPII和H3K27ac组蛋白修饰程度上升及H3K27me3组蛋白修饰降低。且H3K27me3组蛋白修饰与骨骼肌卫星细胞增殖相关基因的沉默密切相关。同时,H3K27me3修饰水平的降低促进139个成肌特异基因的上调表达,调控猪骨骼肌卫星细胞的成肌分化。综上所述,在猪骨骼肌卫星细胞分化过程中,成肌特异转录因子转录起始位点的H3K27me3组蛋白修饰程度下降,上调包括MYOG和MEF2C等基因的表达,进一步激活下游基因转录,促进卫星细胞分化及肌管形成。本研究结合转录组和组蛋白修饰模式分析猪骨骼肌卫星细胞成肌分化的分子机制,为阐明组蛋白修饰调控卫星细胞分化的表观遗传机制提供了新的线索。(本文来源于《华中农业大学》期刊2019-06-01）
王莉晓[7]（2019）在《经典Wnt通路相关基因在大鼠骨骼肌损伤后骨骼肌卫星细胞中的表达研究》一文中研究指出目的:通过检测大鼠损伤骨骼肌组织中卫星细胞内经典Wnt通路下游基因MRFs以及Pax7的表达水平,分析是否呈现一定的时间规律,能否应用于损伤时间的推断。方法:1.制备成年大鼠骨骼肌挫伤模型:购买健康成年雄性SD大鼠(体重200±5 g)258只,随机选取6只用作骨骼肌卫星细胞分离提取的纯度检测实验;其余动物进行随机分组:实验组和对照组,实验组再依据不同损伤时间(0 h、4 h、8h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d)分为13个亚组,共14组,每组18只。采用改良的自由落体法制备大鼠骨骼肌挫伤模型,依据设定的时间点腹腔注射2%戊巴比妥钠(30.0 mg/100 g)麻醉过量处死大鼠,之后提取损伤区域的骨骼肌组织;对照组大鼠采用相同的方式处死并取材。2.大鼠挫伤肌组织的形态学观察:将组织块固定于4%多聚甲醛溶液48h后,制作成石蜡切片,进行HE染色,观察骨骼肌损伤区域的病理组织学特点。3.骨骼肌卫星细胞提纯检测实验:采用两步酶消化法(Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶)并结合差速贴壁法从未损伤的大鼠右后肢骨骼肌中提取并纯化出静止期骨骼肌卫星细胞群,并进行Pax7免疫荧光染色,之后进行量化分析,优化实验条件,计算细胞提纯效率。4.依照相同的步骤从实验组及对照组大鼠骨骼肌中提取骨骼肌卫星细胞,所提取的6个细胞样本接种于24孔板中,以进行细胞免疫荧光染色;另6个细胞样本以细胞沉淀的方式储存于-80℃以进行PCR实验。5.细胞免疫荧光染色:对各组所提取的细胞分别进行Pax7、MyoD、Myogenin免疫荧光染色,并使用FL-StrataQuest软件对荧光结果进行量化分析。6.实时荧光定量PCR实验:应用双内参荧光实时定量RT-PCR技术检测各组卫星细胞中Pax7、MyoD、Myf5、MyoG、MRF4 mRNA的相对定量情况。结果:1.HE染色结果显示:大鼠骨骼肌损伤7d内,经历了出血、炎症反应、肌纤维坏死、胞核溶解消失和少量的新生肌纤维的形成,证实骨骼肌挫伤模型制备成功,可进行后续实验。2.通过对提取的卫星细胞进行鉴定,我们发现细胞呈圆形,并具有高度折光性,数据结果分析显示卫星细胞的提取纯度为89.29%。3.空白对照组及不同实验组所提取出的卫星细胞形态上有差异,从损伤后8h以内的骨骼肌中提取出的卫星细胞呈圆形,而损伤后12h的骨骼肌中提取出的细胞开始出现叁角形、多边形及梭形,随着损伤时间的延长,骨骼肌中提取出的叁角形细胞和梭形细胞的比例逐渐增高。细胞免疫荧光染色结果显示:单个细胞Pax7、MyoD平均荧光强度在损伤后12h开始增加直至伤后7d;而单个细胞myogenin平均荧光强度在损伤后36h组才有明显的增强,时间上稍有延迟;我们发现,从损伤后7d组提取出的细胞中,存在许多具有双核的短梭形细胞,胞核呈椭圆形,具有较强的myogenin荧光信号,状似成肌细胞的初步融合。4.通过PCR反应结果分析,骨骼肌损伤后24 h,Pax7 mRNA水平开始增加,之后维持在较高水平;MyoD和Myf5 mRNA水平均在损伤后48 h开始有一个增高的趋势,其中MyoD mRNA水平变化更加显着,MyoG mRNA也有相似的变化趋势,与MyoD mRNA相比,时间稍有延迟,这与蛋白的变化规律一致。MRF4mRNA水平没有明显的变化规律。结论:依据现有的实验条件,能够成功地提取出纯度较高的骨骼肌卫星细胞(89.29%);骨骼肌卫星细胞在成体骨骼肌损伤后再生修复阶段发挥不可或缺的作用;Pax7、MRFs基因和蛋白表达规律与损伤时间具有相关性,有望应用于推断损伤时间。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-06-01）
卜凡[8]（2019）在《耐力运动经AMPK介导的自噬维持老年小鼠骨骼肌卫星细胞干细胞属性》一文中研究指出目的探讨中等强度耐力运动对老年小鼠骨骼肌卫星细胞数量和功能的影响,以及AMPK信号介导的自噬在此过程中的作用,为探索肌肉衰减综合症的发病机制和防治方案提供理论依据。材料与方法将不同鼠龄的小鼠随机分为青年对照组(YC)、成年对照组(AC)、老年对照组(OC)、老年运动组(OE),每组各12只。老年运动组小鼠的训练方案参照Bellafiore的研究,经过6周训练后,采用以下方法进行研究。(1)流式细胞分选技术,分离检测小鼠骨骼肌静止卫星细胞数量;免疫荧光染色实验检测肌卫星细胞标志物Pax7等在分选细胞中的表达,成肌诱导分化培养分选细胞并采用eMHC染色观察其形成肌管的能力;(2)对分选细胞P-AMPK及自噬相关蛋白LC3A/B,ATG12进行免疫荧光染色,并对其平均荧光强度进行统计分析;(3)Western Blot法检测C2C12成肌细胞AMPK通路相关蛋白、自噬相关蛋白(ATG12,Beclin1)的表达;透射电镜观察C2C12成肌细胞自噬小体形态;(4)注射肌肉毒素(20μl/10μɡ)法建立胫前肌损伤模型,组织学观察采用HE染色,免疫荧光染色实验检测成肌调节因子Myod、胚胎肌球蛋白eMHC的表达。结果(1)骨骼肌中静止肌卫星细胞数量,OC组少于AC组(P<0.05),AC组少于YC组(P<0.05),OE组多于OC组(P<0.05);(2)OE组肌卫星细胞的AMPK磷酸化水平与OC组相比显着升高(P<0.05),ATG12表达增强(P<0.01),LC3A/B表达降低(P<0.01);(3)AICAR诱导后,离体培养C2C12成肌细胞的AMPK磷酸化水平显着升高(P<0.01)、mTOR蛋白表达降低(P<0.05)、细胞自噬小体数量增多(P<0.05)、细胞自噬蛋白(LC3、Beclin1、ATG12)表达均显着增强(P<0.01);(4)注射肌肉毒素造成骨骼肌损伤后,OE组的激活肌卫星细胞数量多于OC组(P<0.05),肌管数量多于OC组(P<0.05),胚胎肌球蛋白表达与OC组相比也显着增强(P<0.05)。结论(1)骨骼肌中静止肌卫星细胞的数量随着年龄的增长而减少,耐力运动能减少老年小鼠静止肌卫星细胞的丢失。(2)耐力运动、AMPK激动剂AICAR可上调AMPK及相关蛋白表达,改善肌卫星细胞的自噬能力,从而维持老年小鼠肌卫星细胞的干细胞属性。(3)老年运动小鼠骨骼肌损伤后修复能力的增强,原因可能与运动后老年小鼠骨骼肌较多的静止肌卫星细胞数量募集有关,即耐力运动可维持老年小鼠肌卫星细胞的干细胞属性,促进肌纤维再生。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
冯燕[9]（2019）在《有氧、抗阻运动对衰老小鼠骨骼肌毛细血管生成和卫星细胞的影响研究》一文中研究指出背景:人体衰老是一种自然现象,如何延缓衰老是学界和大众关注的问题。衰老引起的骨骼肌衰减主要表现在肌肉质量、力量和身体活动能力的下降,严重影响个人生活质量。骨骼肌的重塑依赖骨骼肌卫星细胞(也称为骨骼肌干细胞)激活、增殖、分化和融合。卫星细胞的激活与之所处的微环境有关。伴随着衰老,卫星细胞所处微环境的改变会对卫星细胞的激活产生不利影响,阻碍骨骼肌的重塑。研究指出,运动训练可激活肌卫星细胞促进肌肉的肥大和力量的增加,在衰老状态下,运动可否对骨骼肌毛细血管生成产生影响从而改善肌卫星细胞生存的微环境,激活卫星细胞促进骨骼肌重塑仍需要进一步探讨。目的:本研究旨在采用有氧、抗阻运动的训练方式对衰老小鼠进行运动干预,探讨有氧、抗阻运动对衰老小鼠骨骼肌毛细血管生成及卫星细胞激活之间的内在联系,以期为运动改善骨骼肌衰减症提供理论依据。方法:本研究选取4周龄BALB/C雄性小鼠21只,在标准条件下饲养达9月龄后随机分为3组,其中安静对照组(C组:n=7),正常进食、饮水,不参与运动训练;有氧运动组(A组:n=7),进行为期9周,每周3次的无负重跑台训练,跑台的速度为0.8km/h,运动时间为40min/次;抗阻运动组(R组:n=7)进行为期9周,每周3次的尾部负重爬梯训练,每次训练五组,每组分别训练3次、2次、1次、2次、3次的“金字塔”训练模式,其中组间间隔2min,次间间隔1min。在整个运动训练过程中,于每周固定时间对小鼠进行体重以及四肢抓握力的测量。最后一次训练结束后12小时,称量小鼠体重、测量四肢抓握力,随后即刻采取颈椎脱臼的方式处死小鼠,接着进行股四头肌的取材。采用Real-time PCR技术检测小鼠股四头肌CD31、VEGF、HIF-1α、ERR-α、Pax7、MMP2、MMP9的m RNA表达水平。Western blotting技术检测小鼠股四头肌CD31、VEGF、PGC-1α、HIF-1α、ERR-α、Pax7、MMP2、MMP9的蛋白表达水平。免疫荧光技术检测小鼠股四头肌VEGF和CD31的定位和表达情况。结果:(1)体重与股四头肌湿重/体重的变化:经过9周训练后,运动训练组小鼠的体重高于安静对照组(R组>A组>C组),且第7周R组显着高于C组(P<0.05),第8周开始有极显着性差异(P<0.01),其余各组间体重均无显着性差异。与体重变化相一致,R组小鼠的股四头肌湿重/体重显着高于C组(P<0.05),其他组间均无显着性差异。(2)小鼠四肢相对抓握力的变化:本研究中各组小鼠四肢相对抓握力随周数增多而增加,R组>A组>C组,且第8周开始R组显着高于C组(P<0.05)。(3)VEGF与毛细血管生成相关因子的变化:1)m RNA水平上的变化:R组小鼠股四头肌HIF-1α、ERR-αm RNA表达水平均显着高于C组(P<0.05),R组小鼠股四头肌VEGF m RNA表达水平极显着高于C组(P<0.01);A组小鼠股四头肌VEGF m RNA表达水平显着高于C组(P<0.05)且CD31 m RNA的表达水平也极显着高于C组(P<0.01)。2)蛋白水平上的变化:A组、R组小鼠股四头肌PGC-1α、ERR-α的蛋白表达水平均未见显著性差异,而HIF-1α和VEGF蛋白表达量均显着高于C组(P<0.05);A组VEGF的蛋白表达水平显着高于C组(P<0.05),CD31的蛋白表达水平极显着高于C组(P<0.01)。R组与A组之间各指标均未见显着性差异。(4)细胞外基质MMPs的变化:与C组相比,A组、R组小鼠股四头肌MMP2m RNA表达水平和蛋白表达水平均呈显着性升高(P<0.05)。A组小鼠股四头肌MMP9 m RNA表达水平较C组相比无显着性变化,但其蛋白表达水平显着高于C组(P<0.05)。与C组相比,R组小鼠股四头肌MMP9 m RNA表达水平呈显着性升高(P<0.05),但其蛋白表达水平未见显着性变化。(5)卫星细胞Pax7的变化:与C组相比,R组小鼠股四头肌Pax7 m RNA表达水平呈极显着性升高(P<0.01),而A组小鼠股四头肌Pax7 m RNA表达水平未见显着性差异。与C组相比,R组小鼠股四头肌Pax7的蛋白表达水平呈极显着性升高(P<0.01),而A组小鼠股四头肌Pax7 m RNA表达水平未见显着性差异。与A组相比,R组小鼠股四头肌Pax7的蛋白表达水平呈极显着性升高(P<0.01)。结论:(1)抗阻运动对骨骼肌质量、肌力和卫星细胞增殖的影响优于有氧运动。(2)抗阻运动和有氧运动对骨骼肌毛细血管生成相关因子和细胞外基质均具有积极的影响,但有氧运动的影响优于抗阻运动。(3)抗阻运动中,毛细血管密度对骨骼肌卫星细胞的增殖有一定的积极作用,但并非起主导作用,其机制有待深入探讨。(本文来源于《华东师范大学》期刊2019-05-01）
张俊星,朱菲菲,李燕,陈明明,刘新峰[10]（2019）在《干扰lnc4351对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响》一文中研究指出为探究长链非编码RNA(lncRNA)对牛骨骼肌卫星细胞增殖及分化的影响,本研究以牛骨骼肌卫星细胞及已建立的体外成肌诱导分化模型为基础,以前期高通量测序获得的牛骨骼肌卫星细胞分化前后表达差异倍数较大的一个预测lncRNA为靶标,对其进行生物信息学分析及亚细胞定位,命名为lnc4351。设计合成lnc4351的siRNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,采用EdU染色的方法检测干扰lnc4351对细胞增殖的影响;对转染siRNA的牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化,观察肌管的形成状态,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测分化标志因子MyoG和MHC基因的mRNA及蛋白水平的表达变化,研究干扰lnc4351对细胞分化的影响。结果显示,lnc4351位于牛的14号染色体,不具有蛋白编码潜能,是一个未报道过的lncRNA,在牛骨骼肌卫星细胞的细胞质和细胞核内均有分布,主要存在于细胞核;干扰lnc4351表达后,EdU阳性细胞比率显着下降(P<0.05),说明下调lnc4351表达显着抑制了牛骨骼肌卫星细胞的增殖;下调lnc4351表达后肌卫星细胞经诱导分化产生的肌管量呈现增多趋势,分化标志因子MyoG和MHC的蛋白水平显着或极显着上调(P<0.05;P<0.01),说明干扰lnc4351能够促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。本研究结果表明,干扰lnc4351表达可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的增殖并促进其成肌分化过程,为进一步开展lncRNA对牛骨骼肌发育的调控机制及肌肉发育相关研究提供参考。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年03期）
骨骼肌卫星细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为探究miR-143与其互作lncRNA之间的关系及其在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的潜在作用机制,选取两个表达丰度较高mi R-143的预测互作lnc RNA(lnc RNA-HZ5和lnc RNA-HZ8)进行研究。采用双荧光素酶试验验证miR-143对预测互作lncRNA的靶向调控作用,采用qRT-PCR技术检测miR-143表达水平改变对预测互作lncRNA表达的影响,并采用qRT-PCR和westernblot技术检测干扰互作lncRNA表达后对miR-143表达水平及miR-143靶基因表达水平的影响。双荧光素酶试验结果表明,miR-143可直接调控lncRNA-HZ5的表达;在牛肌卫星细胞中过表达miR-143后,lncRNA-HZ5的表达水平显着下调,而抑制miR-143表达后,lncRNA-HZ5的表达水平显着上调;采用si RNA干扰lnc RNA-HZ5的表达,发现抑制lnc RNA-HZ5表达能够下调mi R-143表达,并上调miR-143靶基因IGFBP5的蛋白水平。研究结果表明,在牛骨骼肌卫星细胞中miR-143可以和lncRNA-HZ5发生相互调控作用,其对牛肌卫星细胞成肌分化的调控作用可能是通过互作来完成的。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
骨骼肌卫星细胞论文参考文献
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