miR-130a-3p调控SOX4对骨关节炎软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响

论文摘要

目的:探讨miR-130a-3p对骨关节炎（osteoarthritis, OA）软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响及作用机制。方法:收集我院住院的40例半月板损伤患者和40例OA患者,采用RT-PCR检测半月板损伤患者和OA患者膝关节软骨组织中miR-130a-3p的表达。在OA软骨细胞中分别转染miR-NC、miR-130a-3p mimics、miR-130a-3p inhibitors、si RNA-SOX4（si-SOX4）或过表达SOX4的慢病毒载体（LV-SOX4）,采用CCK8法检测细胞增殖情况;RT-PCR和western blot检测细胞分化相关分子BMP2和BMP4;RT-PCR检测炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达。结果:半月板损伤患者软骨组织和软骨细胞中miR-130a-3p的表达明显高于OA患者（P均<0.05）,而SOX4的表达水平明显低于OA患者（P<0.05）。OA患者膝关节软骨组织中miR-130a-3p和SOX4的表达呈显著负相关（P<0.05）。miR-130a-3p mimics能够明显促进OA软骨细胞增殖（P<0.05）、增加分化相关分子BMP2和BMP4的表达（P均<0.05）以及抑制炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达（P均<0.05）。miR-130a-3p inhibitors能够明显抑制OA软骨细胞增殖（P<0.05）、分化相关分子BMP2和BMP4的表达（P均<0.05）以及促进炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达（P均<0.05）。OA软骨细胞在转染miR-130a-3p mimics后,SOX4 mRNA和蛋白的表达水平明显降低（P均<0.05）,在转染miR-130a-3p inhibitors后,SOX4 mRNA和蛋白的表达水平明显升高（P均<0.05）。双荧光素酶结果显示miR-130a-3p能够靶向结合SOX4。在OA软骨细胞中,采用si RNA低表达SOX4后,明显促进细胞增殖和分化以及抑制炎症因子的释放。共转染miR-130a-3p mimics和LV-SOX4能够逆转过表达miR-130a-3p对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响（P均>0.05）,而共转染miR-130a-3p inhibitors和LV-SOX4能够进一步加强低表达miR-130a-3p对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子的影响（P均<0.05）。结论:miR-130a-3p在OA中明显低表达,并能够通过靶向抑制SOX4促进OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放。

论文目录

• 前言
• 1 材料和方法
•   1.1 组织标本
•   1.2 主要试剂
•   1.3 方法
•     1.3.1 细胞培养与转染
•     1.3.2 qRT-PCR
•     1.3.3 CCK-8方法检测细胞增殖
•     1.3.4 Western blot法
•     1.3.5 双荧光素酶报告
•   1.4 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 OA软骨组织和细胞中mi R-130a-3p和SOX4的表达
•   2.2 mi R-130a-3p对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响
•   2.3 mi R-130a-3p能够靶向结合SOX4
•   2.4 SOX4对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响
•   2.5 mi R-130a-3p通过调控SOX4影响OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵轶男,孙强,毕龙,陈小超,程建岗

关键词: 骨关节炎,增殖,分化,炎症因子

来源: 现代生物医学进展 2019年22期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 外科学

单位: 空军军医大学西京医院骨科

基金: 国家自然科学基金项目(2016YFC1100304)

分类号: R684.3

DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.22.001

页码: 4201-4207

总页数: 7

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