导读:本文包含了金环蛇论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:抗菌肽,cathelicidin-BF,金黄色葡萄球菌,固有免疫
金环蛇论文文献综述
周延东,罗自为,杨佩佩,卫林,徐薇[1](2018)在《金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF通过激活固有免疫增强小鼠抵抗金黄色葡萄球菌感染》一文中研究指出Cathelicidin抗菌肽系多物种保守的具有天然广谱抗微生物活性的小分子多肽。本研究旨在探究金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF是否可以激活宿主抗金黄色葡萄球菌感染免疫。在金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S.aureus)感染前24、8和4h给C57BL/6小鼠腹腔注射抗菌肽cathelicidin-BF(10mg/kg),或等体积PBS为对照,0h经腹腔注射S.aureus或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus, MRSA),18h后计数小鼠腹水菌落形成单位(colony forming unit, CFU)。实验发现抗菌肽cathelicidin-BF注射组小鼠腹水细菌CFU显着低于对照组,表明预注射cathelicidin-BF能显着增强小鼠抗S.aureus感染。为明确抗菌肽是否通过调节小鼠固有免疫应答而达到抗菌效果,流式分析注射抗菌肽后小鼠腹水中各免疫细胞亚群发现:cathelicidin-BF显着促进了单核/巨噬细胞和中性粒细胞在腹腔的富集。进一步分析发现,抗菌肽在体内可促进小鼠腹腔中单核细胞及中性粒细胞趋化因子CCL2、CXCL1、CXCL2表达;体外则以剂量依赖方式促进小鼠巨噬细胞分泌趋化因子。Cathelicidin-BF还能激活小鼠腹腔巨噬细胞MAPK和NF-κB信号通路。以上结果表明,抗菌肽cathelicidin-BF可通过增强小鼠巨噬细胞/中性粒细胞固有免疫加强小鼠抗S.aureus感染。(本文来源于《现代免疫学》期刊2018年06期)
杨直[2](2017)在《我的金环蛇灯还亮,但微动却坏了》一文中研究指出先是IPO,后是做手机,最近的雷蛇可谓是动作颇多,好不热闹。但热闹背后却隐藏着一丝尴尬,而这种尴尬也许是整个电竞行业都难以回避的。我们先看雷蛇的IPO。11月1日,雷蛇在港启动IPO招股。尽管受到阅文申购冻资的影响,但截至上周五,雷蛇仍然获得了接近百倍的超额认购,冻资规模超过360亿。看似第一只电竞概念股很受追捧,但真的是这么回事(本文来源于《电子竞技》期刊2017年21期)
郑颖,刘桃云,朱晓霞,甘慧,顾若兰[3](2016)在《化学发光免疫法测定大鼠血清中金环蛇抗菌肽的含量》一文中研究指出目的采用化学发光免疫法测定大鼠血清金环蛇抗菌肽(BF-30)的含量,为药代动力学研究提供简单快速的检测手段,初步探讨BF-30体内药代动力学特征。方法建立化学发光免疫分析方法并对方法的基质效应、精密度、准确度、稳定性和稀释效应进行确证,应用该法检测Wistar大鼠血清中BF-30的浓度。结果在大鼠血清中,BF-30在0.5~40 ng/ml浓度范围内Logistic曲线拟合良好,最低定量限为0.5 ng/ml;该法不存在基质效应;日内精密度为8.76%~14.15%、日间精密度为4.91%~11.11%,准确度为-1.27%~-7.71%;样品在-20℃放置13 d、反复冻融2次稳定性良好;储备液在-20℃放置30 d稳定性良好;样品在稀释40倍后无稀释效应。结论该分析方法简便、准确、可靠,能满足大鼠血清中BF-30含量的测定及其临床前药代动力学研究。(本文来源于《国际药学研究杂志》期刊2016年05期)
郝思怡,姚远航,郭土敬,张鸿,李黄金[4](2015)在《金环蛇抗菌肽在毕赤酵母中的组成型表达》一文中研究指出[目的]建立金环蛇抗菌肽Cath-BF的毕赤酵母高效分泌表达系统。[方法]Cath-BF基因用引物重迭延伸法合成,克隆于p GAPZa-A,电转化毕赤酵母SMD1168,博莱霉素筛选高抗性转化子,以痤疮丙酸杆菌筛选抗菌肽高效分泌株,摇瓶培养确定分泌表达最适p H值。[结果]获得Cath-BF的毕赤酵母高效组成型分泌表达株,表达产物可有效抑制痤疮丙酸杆菌的生长,抗菌肽分泌水平与培养基p H值高度相关。[结论]成功构建金环蛇抗菌肽Cath-BF组成型高效分泌表达系统。(本文来源于《生物技术》期刊2015年02期)
郝思怡[5](2015)在《金环蛇抗菌肽Cath-BF在毕赤酵母中的组成型分泌表达》一文中研究指出痤疮是一种常见的毛囊皮脂腺炎症性皮肤病,主要由厌氧性座疮丙酸杆菌所致,目前主要采用抗生素治疗,但疗效不理想,并且可导致抗性菌的产生和超敏反应。新近从金环蛇蛇毒中分离的抗菌肽Cath-BF属于第一个被报道的脊椎动物来源抗菌肽,该抗菌肽可在小鼠模型中有效抑制痤疮丙酸杆菌及其它痤疮感染菌的生长,并抑制相关炎性增生,因此在痤疮防治中具有重要的应用价值。天然分离的Cath-BF为30个氨基酸残基组成的多肽,而根据其c DNA编码产物推断的该抗菌肽在N端应该还有4个氨基酸残基,即天然长度应该为34个氨基酸残基,,但目前尚未有实验证明该结构形式的抗菌肽是否存在及有无抑菌活性。蛇毒来源有限,从中制备抗菌肽得率低,成本高,化学合成抗菌肽同样存在成本高的问题,因此,采用基因工程手段建立高效生产方法对于Cath-BF的推广应用具有现实意义。毕赤酵母(Pichia pastoris)系统是最成熟的外源基因高效表达系统,遗传背景清楚、可高密度发酵,因而具有良好的工业化性能。其组成型表达系统是基于磷酸甘油醛脱氢酶的强启动子p GAP,无需像AOX1启动子那样采用甲醇诱导,用于人用产品的生产更安全。另外,Cath-BF作为小分子多肽,很难独立表达,分泌表达可以避免小肽被胞内蛋白酶降解,并且产物容易纯化。本研究采用毕赤酵母组成型分泌表达系统构建两种长度Cath-BF的高效表达工程菌,体外研究二种长度重组抗菌肽抑菌活性,并建立高效发酵工艺和分离纯化方法,为Cath-BF的进一步开发应用打下坚实基础。方法1.Cath-BF30与Cath-BF34目的基因合成采用毕赤酵母偏好密码子设计30肽与34肽Cath-BF的编码序列,首尾分别加上酶切位点、终止密码子等,采用引物重迭延伸PCR法(Overlap extension PCR)合成目的基因。2.Cath-BF30与Cath-BF34表达载体的构建以毕赤酵母系统p GAPZα载体为基础,目的片段与分泌信号肽MF-α融合后克隆于启动子GAP的下游,以便在葡萄糖做基础碳源的条件下组成型分泌表达N端为天然序列的抗菌肽。3.Cath-BF30与Cath-BF34毕赤酵母工程菌高效表达株的构建将目的基因表达载体质粒线性化后电转化蛋白酶缺陷型宿主毕赤酵母SMD1168细胞,筛选博来霉素高抗性转化子,取高抗性转化子培养上清进行丙酸杆菌抑菌斑筛选,选取上清抑菌活性强的转化子作为抗菌肽工程菌。4.Cath-BF30与Cath-BF34表达产物活性分析工程菌在摇瓶水平上培养,收集培养上清,96孔板法观察上清对痤疮丙酸杆菌厌氧培养物的生长抑制作用。5.培养基p H和发酵时间对Cath-BF30与Cath-BF34分泌水平的影响分别设立p H4.0,p H5.0,p H6.0和p H7.0等四种培养基,观察不同p H培养条件和培养时间下所获培养上清的抑菌活性。6.Cath-BF34毕赤酵母工程菌的发酵工程菌在最适p H和温度条件下于5L发酵罐中发酵,发酵周期为72h,收集发酵上清。7.Cath-BF34毕赤酵母工程菌发酵产物的纯化根据Cath-BF等电点为强碱性(p I=11.2)这一特性,采用强阳离子SP Sepharose FF柱将表达产物进行分离纯化。结果:1.成功克隆Cath-BF30与Cath-BF34编码序列,该序列基于毕赤酵母偏爱密码子设计,N端与分泌信号肽MFα下游无缝融合,可保证分泌产物为天然N端序列。2.获得了Cath-BF30与Cath-BF34的毕赤酵母高效分泌表达菌株,二者的分泌表达产物都具有抑制痤疮杆菌的活性。3.Cath-BF工程菌在培养基p H4.0条件下分泌水平最高,产物最稳定,当p H为5以上时培养上清抗菌活性低,且在培养后期几乎检测不到抗菌活性,表明需要在较低p H条件下培养才能有效抵抗宿主细胞蛋白酶的降解作用。4.Cath-BF工程菌在以葡萄糖做碳源的完全培养基中连续培养,并采取碳源控制手段时,可实现较高密度的生长和高效分泌表达,最终细胞密度达到160g/L(湿重)以上,抗菌肽分泌水平达到100mg/L以上。5.发酵上清经过SP Sepharose FF柱一步纯化可获得纯度95%以上的Cath-BF。结论:成功构建了金环蛇抗菌肽Cath-BF30与Cath-BF34的毕赤酵母高效组成型分泌表达系统和表达产物分离纯化方法,并实验证明了30肽和34肽的Cath-BF均具有座疮杆菌抑制活性。(本文来源于《广东药学院》期刊2015-04-01)
张海文,夏溪,韩菲菲,汪以真[6](2014)在《源于金环蛇的一种抗菌肽Cathelicidin-BF对溃疡性结肠炎小鼠的保护作用研究》一文中研究指出抗菌肽作为一种重要的先天免疫分子,具有促进损伤修复,调节微生物生长与炎症,抗肿瘤等功能。Cathelicidin-BF(C-BF)是从金环蛇毒液中分离提取出来的一种抗菌肽,具有广谱抗菌活性。溃疡性结肠炎是一种常见的肠道炎性疾病,其发病机制尚不清楚。本实验的目的是研究抗菌肽C-BF对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护作用。实验分为四组:对照组,DSS组,C-BF组,C-BF+DSS组,通过自由饮用3%DSS溶液建立结肠炎模型,通过直肠注射C-BF的方式予以给药,实验期为7天。实验通过HE染色,免疫组化,流式分析等方法,分析C-BF是否对溃疡性结肠炎小鼠具有保护作用。实验成功建立溃疡性结肠炎症模型,进一步研究结果发现,与DSS组比,C-BF+DSS组的疾病活动指数显着下降,组织切片的结果表明,C-BF+DSS组回肠和结肠段肠上皮形态结构得到显着改善,同时通过流式细胞术分析发现与DSS组相比,CBF+DSS组显着提高了血液中B,T淋巴细胞和巨噬细胞的比例(P<0.05),且分别通过ELISA和荧光定量PCR分析发现,C-BF+DSS组显着降低了促炎因子TNF-α,IL-6,IL-8和抑炎因子IL-10在血清中的蛋白表达及在结肠处的基因表达水平(P<0.05)。通过免疫组化分析,发现与DSS组相比,C-BF+DSS组显着缓解了噬中性粒细胞和巨噬细胞对结肠黏膜层的入侵,Tunnel分析结肠上皮细胞凋亡情况,发现C-BF+DSS组与DSS组比较,其结肠上皮细胞凋亡程度得到显着缓解(P<0.05)。检测结肠处的炎性相关酶COX-2和INOS的酶活发现,C-BF+DSS组与DSS组比其炎性相关酶活显着降低(P<0.05),同时,通过Western-blot检测经典炎性相关信号通路,发现加入C-BF后,可以缓解NF-κB(p65)的磷酸化水平,提示抗菌肽C-BF可能是通过NF-κB(p65)相关信号通路缓解溃疡性结肠炎性症状。本试验结果显示:抗菌肽C-BF可通过免疫调节途径缓解DSS诱导的溃疡性结肠炎,且初步的研究结果表明其缓解炎症的机制为通过降低NF-κB的磷酸化水平实现。(本文来源于《第七届中国饲料营养学术研讨会论文集》期刊2014-10-16)
周慧敏,陈莉莉,王晶,窦洁,王慧[7](2011)在《金环蛇抗菌肽Cathelicidin-BF的体外抗菌活性研究》一文中研究指出为了研究金环蛇抗菌肽Cathelicidin-BF对临床常见菌株的体外抗菌活性和细菌是否容易对其产生耐药,分别通过琼脂平板稀释法和肉汤稀释法测定Cathelicidin-BF的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。研究接种量与pH值对其MIC的影响和本品对细菌生长增殖的抑制作用,利用耐受诱导实验研究细菌对本品是否易产生耐药。结果表明金环蛇抗菌肽Cathelicidin-BF对革兰阳性菌和阴性菌都有抑制作用,MIC低至2μg/mL,在用药处理的10 h内未见细菌生长,且在耐药性诱导实验期间,细菌对Cathelicidin-BF没有产生耐药。金环蛇抗菌肽Cathelicidin-BF具有广谱抗菌活性,且与抗生素相比不易产生耐药,提示其可作为治疗感染性疾病的候选药物。(本文来源于《药物生物技术》期刊2011年04期)
张雯雯[8](2011)在《金环蛇来源的抗菌肽可有效治疗痤疮》一文中研究指出本报讯 传统抗生素可诱发脓毒症,抗菌肽作为新型抗感染候选药物近年来受到密切关注。近日,中科院昆明动物研究所研究员赖仞带领的课题组发现金环蛇来源的抗菌肽对痤疮有良好的治疗作用。 据介绍,痤疮俗称“青春痘”,又叫“面疱”、“粉刺”、“暗疮”等,是由于毛(本文来源于《科学时报》期刊2011-07-26)
王刚,曾仲意,黄彬[9](2010)在《蛇毒清合剂治疗金环蛇咬伤的疗效观察》一文中研究指出目的观察蛇毒清合剂对金环蛇咬伤的临床疗效。方法将71例病人分为治疗组35例,对照组36例。两组均给予常规治疗,治疗组加服蛇毒清合剂,并比较两组患者伤后48 h的血清酶学叁项(CK、LDH、AST)及治疗5天后的疗效、治疗结束时的疗程及呼吸衰竭发生率。结果两组患者临床疗效比较有显着性差异,治疗组优于对照组(P<0.05);酶学叁项和疗程、呼吸衰竭发生率均有显着性差异(P<0.05)。结论蛇毒清合剂对金环蛇咬伤有显着疗效。(本文来源于《蛇志》期刊2010年02期)
卢祥云,王爱丽,杨海龙,赖仞[10](2008)在《金环蛇蛇毒中的一种新型胰蛋白酶抑制剂(英文)》一文中研究指出目的:从金环蛇蛇毒中分离纯化名为bungaruskunin 1的一种新型胰蛋白酶抑制剂,并从其毒腺的cDNA文库中克隆出该胰蛋白酶抑制剂的cDNA全序列。方法:通过Sephadex G-50,CM-Sephadex C-25,HPLC,RP-HPLC(C4 col-umn)方法分离纯化bungaruskunin 1。样品的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性则是在室温条件下50mmol·L-1Tris-HCl,pH7.8的缓冲液中通过对显色底物的水解抑制作用来检测的。金环蛇毒腺RNA用TRIZOL提取,并用SMARTM PCR cDNA syn-thesis kit(Clontech)建成cDNA文库。根据其信号肽的保守区域合成引物从该文库中扩增出bungaruskunin 1的cDNA全序列,进行胶回收,酶连到pMD18-T载体中转化测序。结果:bungaruskunin1的前体由83个氨基酸组成,其中信号肽含有24个氨基酸,成熟肽即:bungaruskunin 1含有59个氨基酸。bungaruskunin 1的cDNA序列与从红腹伊澳蛇Pseudechis porphy-riacus中分离纯化得到的丝氨酸蛋白酶抑制剂blackelin的cDNA序列的相似性高达64%。bungaruskunin 1是一种含有保守Kunitz端的Kuntiz蛋白酶抑制剂家族的一员,从而能够抑制蛋白酶和弹性酶的活性。在cDNA文库中,我们同时还筛选到了2种新的β-bungarotoxin B链的序列。结论:这些发现很好地证明了蛇中Kunitz/BPTI胰蛋白酶抑制剂和毒性神经的家族可能起源于共同的祖先。(本文来源于《中国天然药物》期刊2008年02期)
金环蛇论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
先是IPO,后是做手机,最近的雷蛇可谓是动作颇多,好不热闹。但热闹背后却隐藏着一丝尴尬,而这种尴尬也许是整个电竞行业都难以回避的。我们先看雷蛇的IPO。11月1日,雷蛇在港启动IPO招股。尽管受到阅文申购冻资的影响,但截至上周五,雷蛇仍然获得了接近百倍的超额认购,冻资规模超过360亿。看似第一只电竞概念股很受追捧,但真的是这么回事
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
金环蛇论文参考文献
[1].周延东,罗自为,杨佩佩,卫林,徐薇.金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF通过激活固有免疫增强小鼠抵抗金黄色葡萄球菌感染[J].现代免疫学.2018
[2].杨直.我的金环蛇灯还亮,但微动却坏了[J].电子竞技.2017
[3].郑颖,刘桃云,朱晓霞,甘慧,顾若兰.化学发光免疫法测定大鼠血清中金环蛇抗菌肽的含量[J].国际药学研究杂志.2016
[4].郝思怡,姚远航,郭土敬,张鸿,李黄金.金环蛇抗菌肽在毕赤酵母中的组成型表达[J].生物技术.2015
[5].郝思怡.金环蛇抗菌肽Cath-BF在毕赤酵母中的组成型分泌表达[D].广东药学院.2015
[6].张海文,夏溪,韩菲菲,汪以真.源于金环蛇的一种抗菌肽Cathelicidin-BF对溃疡性结肠炎小鼠的保护作用研究[C].第七届中国饲料营养学术研讨会论文集.2014
[7].周慧敏,陈莉莉,王晶,窦洁,王慧.金环蛇抗菌肽Cathelicidin-BF的体外抗菌活性研究[J].药物生物技术.2011
[8].张雯雯.金环蛇来源的抗菌肽可有效治疗痤疮[N].科学时报.2011
[9].王刚,曾仲意,黄彬.蛇毒清合剂治疗金环蛇咬伤的疗效观察[J].蛇志.2010
[10].卢祥云,王爱丽,杨海龙,赖仞.金环蛇蛇毒中的一种新型胰蛋白酶抑制剂(英文)[J].中国天然药物.2008
标签:抗菌肽; cathelicidin-BF; 金黄色葡萄球菌; 固有免疫;