阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验

论文摘要

为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA（cELISA）抗体检测方法。通过对60份牛、羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率（PI）临界值为60%;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、鹿流行性出血热病毒（EHDV）、羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1∶128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验（SNT）检测结果（1∶64）;批内和批间变异系数（CV）在0.54%～5.27%和0. 3%～9.3%之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国ID VET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76%,可以替代进口同类产品。本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒、血清、细胞及实验动物
•   1.2 主要试剂
•   1.3 阿卡斑病毒培养、纯化和兔抗血清的制备
•   1.4 cELIS A检测方法的建立
•     1.4.1 cELISA检测方法的的优化
•     1.4.2 临界值的确定
•     1.4.3 特异性试验
•     1.4.4 敏感性试验
•     1.4.5 重复性试验
•   1.5 与国外同类试剂盒的比较试验
• 2 结果
•   2.1 病毒培养、纯化和兔抗血清的制备
•   2.2 cELIS A反应条件的优化
•   2.3 临界值的确定
•   2.4 特异性试验结果
•   2.5 敏感性试验结果
•   2.6 重复性试验结果
•   2.7 与国外同类检测方法比较试验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 苗海生,李乐,廖德芳,寇美玲,朱建波,肖雷,孟锦昕,杨恒,李华春

关键词: 阿卡斑病毒,抗体检测

来源: 中国预防兽医学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

基金: 云南省技术创新人才培养对象(2018HB076),国家重点研发计划(2016YFD0500908),云南省应用基础研究计划(2015FD065)

分类号: S852.4

页码: 371-375

总页数: 5

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