重组酶聚合酶恒温扩增结合乳胶微球试纸条快速检测金黄色葡萄球菌

重组酶聚合酶恒温扩增结合乳胶微球试纸条快速检测金黄色葡萄球菌

论文摘要

通过建立一种将重组酶聚合酶恒温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与乳胶微球试纸条(latex microsphere test strips,LMTS)相结合的方法,快速检测金黄色葡萄球菌。根据金黄色葡萄球菌保守区序列(nuc)设计特异性引物,经RPA扩增后用LMTS检测,确定RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌的灵敏度和特异性。灵敏度结果显示RPA-LMTS检测限为500 fg DNA和1.2×101 CFU/mL纯菌液;特异性结果表明与沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌、产气肠杆菌和单增李斯特菌无交叉反应,特异性良好;用食物样品评估RPA-LMTS检测效果,结果显示经过增菌3小时后,RPA-LMTS可检测1.2×100 CFU/mL(g)的金黄色葡萄球菌。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试剂与材料
  •     1.1.2 仪器与设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物设计与合成
  •     1.2.2 活化和免疫乳胶微球
  •     1.2.3 RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌
  •     1.2.4 RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌的灵敏度
  •     1.2.5 RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌的特异性
  •     1.2.6 RPA-LMTS检测实际样品
  • 2 结果与分析
  •   2.1 灵敏度分析
  •   2.2 特异性分析
  •   2.3 实际样品检测分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高建欣,藏雨轩,杜欣军,李萍,王硕

    关键词: 金黄色葡萄球菌,重组酶聚合酶等温扩增,乳胶微球试纸条,快速检测

    来源: 食品研究与开发 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 天津科技大学食品工程与生物技术学院食品营养与安全国家重点实验室,南开大学医学院天津市食品科学与健康重点实验室

    基金: 天津市自然科学基金(18JCZDJC34300)

    分类号: TS207.4

    页码: 168-172

    总页数: 5

    文件大小: 243K

    下载量: 389

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