间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B1

论文摘要

目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B1（AFB1）建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法（ic-ELISA）。方法:制备了AFB1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64 000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS,pH 7.4）为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097～0.088μg/L（R2=0.999）;灵敏度（IC50）和检出限（IC15）分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数（n=6）为0.29%～16.9%,板间变异系数（n=6）为0.22%～21.19%。在花生样品中AFB1的检测灵敏度（IC50）为1.04μg/kg,回收率为96.67%～106.51%。结论 :本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB1污染物的定量分析检测。

论文目录

• 1 材料与试验方法
•   1.1 试剂、材料与仪器
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 AFB1包被抗原的制备
•     1.2.2 ic-ELISA方法条件优化
•     1.2.3 ic-ELISA检测过程
•     1.2.4 方法特异性评价
•     1.2.5 实际样品测定
• 2 结果与讨论
•   2.1 AFB1包被抗原的鉴定
•     2.1.1半抗原AFB1O的鉴定
•     2.1.2 包被原AFB1O-OVA的鉴定
•   2.2 ic-ELISA方法工作条件的确定
•     2.2.1 抗原包被量与抗体稀释倍数的优化
•     2.2.2 封闭液及缓冲液种类的优化
•   2.3 ic-ELISA检测方法的建立
•   2.4 ic-ELISA检测方法的性能评价
•     2.4.1 精密度评价
•     2.4.2 特异性评价
•   2.5 实际样品检测
•     2.5.1 样品基质影响及消除
•     2.5.2 添加回收试验
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 潘明飞,李诗洁,郭丹丹,王俊平,王硕

关键词: 黄曲霉毒素,间接竞争酶联免疫分析方法,花生

来源: 中国食品学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 教育部食品安全与营养重点实验室天津科技大学

基金: 国家自然科学基金项目(31972147),天津市自然科学基金项目(17JCQNJC14800),天津市高等学校基础科研项目(2017KDZD01)

分类号: TS207.5;TS214

DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.09.030

页码: 255-261

总页数: 7

文件大小: 892K

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