A型口蹄疫病毒衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及免疫效果分析

A型口蹄疫病毒衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及免疫效果分析

论文摘要

为了探索更有效的A型口蹄疫(FMD)表位疫苗,根据已鉴定的A型口蹄疫病毒(FMDV)主要抗原位点,结合基因序列比对分析,选择了A型FMDV流行毒株的主要抗原位点区进行表位蛋白分子的设计表达。所用表位序列包括A/QH/CHA/2013的VP2 70~81位、118~140位,VP1 G-H环131~157位、C末端188~212位,A/WH/CHA/09 VP1 43~48位、VP3 55~72位,以及非结构蛋白3A中的T细胞表位和通用性T细胞表位,构建免疫原蛋白分子命名为ANX2和ANX3,其中ANX2采用了表位序列反向串联的方式进行设计,用大肠杆菌表达免疫原基因,纯化表位蛋白免疫小鼠和猪,分析特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,并对免疫猪进行了攻毒保护试验,评价表位疫苗的保护效果。结果显示,ANX2、ANX3重组蛋白以包涵体表达为主,蛋白大小约为41 ku和39 ku,均能与A型FMDV阳性血清发生特异性反应;免疫小鼠和猪后都能产生抗A型FMDV特异性抗体;用表位蛋白刺激免疫小鼠脾淋巴细胞,细胞因子IFN-γ和IL-4均有明显的升高;攻毒后对猪有一定的保护作用,ANX2的免疫效果略优于ANX3,证明表位序列反向串联更有利于抗原表位的展示,从而增强其免疫效果。本研究为A型FMDV表位疫苗的研究积累了经验。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 汪肖肖,孙普,贾怀杰,李冬,付元芳,陈应理,曹轶梅,景志忠,白兴文,卢曾军,刘在新

关键词: 型口蹄疫病毒,表位疫苗,体液免疫,细胞免疫

来源: 中国兽医科学 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室

基金: 国家重点研发计划项目(2017YFD0501104),中国农业科学院基本科研业务费专项(Y2017CG32)

分类号: S852.659.6

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0158

页码: 1207-1215

总页数: 9

文件大小: 1489K

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