导读:本文包含了内向整流钾通道论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:通道,胶质,细胞,体细胞,心肌梗死,心律失常,激动剂。
内向整流钾通道论文文献综述
李盼,赵晓泽,乔希,贺培凤,卢学春[1]（2019）在《基于多源数据和动作电位特征筛选心肌内向整流钾通道特异性激动剂》一文中研究指出目的基于多源数据和心肌动作电位(action potential,AP)特征筛选出新的内向整流钾通道(inward rectifier potassium channel,I_(K1))特异性激动剂。方法 HCT116人结肠癌细胞经I_(K1)特异性激动剂zacopride 1μmol/L(Za_1组)和40μmol/L(Za_40组)分别孵育24 h后进行转录组测序(RNA-seq),与对照组(Ctl组)差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)信息导入基于多源数据的药物重定位平台,筛选zacopride作用相似物。采用膜片钳法验证预测药物对SD大鼠左心室肌细胞静息电位(resting potential,RP)和AP的影响。结果 Ctl与Za_1组DEG226个,Ctl与Za_40组DEG 302个。经药物重定位平台筛选,两组数据分别筛选出相似度排序前100的药物,取交集并通过文本关联分析,最终得到7种可能与zacopride具有相似作用且未见文献报道的药物,随机编号Drug 1-7。Drug 4、6、7可增大RP,缩短动作电位时程(action potential duration,APD),是潜在的IK1激动剂;Drug 1和3对AP无明显影响;Drug 5可明显延长APD;Drug 2在低浓度时延长APD,高浓度时缩短AP。经进一步验证,Drug 6阿库氯铵在1～50μmol/L浓度范围内可剂量依赖性增大RP,并缩短APD,符合I_(K1)特异性激动剂对动作电位的作用特征。结论基于多源数据和心室肌AP作用特征的药物筛查方法有利于快速有效判断药物可能的离子通道靶点,从而筛查到更多的I_(K1)激动剂,为抗心律失常新理论和新方法的研究提供更多可能。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年12期）
海霞霞,朱娜,王俊燕,肖晶晶,毕逢辰[2]（2019）在《内向整流钾通道对少突胶质前体细胞发育的作用》一文中研究指出目的研究内向整流钾通道Kir4.1对少突胶质细胞(OL)发育的作用。方法体外原代分离培养少突胶质前体细胞(OPC),利用PCR和Western blot技术检测OPC和成熟OL中Kir4.1和髓鞘相关蛋白MBP的基因和蛋白表达水平。用desipramine(DES)阻断Kir4.1通道后,再检测细胞增殖和分化及MBP的表达情况。结果 Kir4.1在OL细胞中表达升高,阻断Kir4.1可以促进OPC增殖,但是抑制OPC向OL细胞分化。结论 Kir4.1在OL细胞发育过程中发挥着重要作用。(本文来源于《心血管外科杂志(电子版)》期刊2019年04期）
常成[3]（2019）在《GSK-3β抑制剂增加内向整流钾通道Kir2.1的表达改善心肌梗死大鼠的电重构》一文中研究指出研究背景及目的心肌重构是慢性心力衰竭发生发展的主要病理生理过程,是许多严重心血管疾病发展为心力衰竭的最后共同通路。尽管目前治疗心血管疾病的药物和手段有多种,死亡率有所下降,但心源性猝死的比重却持续增加。心肌重构包括结构重构和电重构,其中心肌电重构引起的离子通道电流异常是诱发恶性心律失常及心源性猝死的主要原因。阐明心肌电重构的细胞与分子机制,对于发现电重构的潜在治疗靶标,以及控制恶性室性心律失常的发生意义重大。糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它参与心肌重构的多个方面,GSK-3β是重要的心肌肥厚负性调节信号分子,对心肌细胞凋亡有重要的调节作用,而且在血管组织中能促进血管增生,由于它具有一定的促凋亡能力,因而也可以作为提高缺血后心肌存活率的治疗靶点。近年发现,GSK-3β对多种离子通道有作用,但是这些文献主要集中于GSK-3β对神经细胞离子通道的作用,而其对心肌细胞中离子通道的影响未见有报道,并且它在心肌电重构有着怎样的作用也未见阐明。本课题拟建立大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型和大鼠心肌细胞系H9C2缺氧模型,观察GSK-3β抑制剂SB216763对心肌梗死大鼠心肌组织、心脏功能和QT间期的影响,筛选GSK-3β参与调节的离子通道,并进一步通过大鼠H9C2心肌细胞缺氧模型对筛选通道进行验证。为解释心肌损伤后心肌电重构的分子机制以及心律失常的防治提供新思路和新靶点。研究方法1.大鼠心肌梗死模型的建立:采用冠状动脉左前降支(LAD)结扎术建立急性心肌梗死模型,手术全程心电监护,手术后II导联有ST段明显的抬高,则模型建立成功。2.分组和给药:雄性8周龄SD大鼠平均分为3组(2天组每组各10只,7天组每组各11只):假手术组(Sham),手术组(MI),给药组(MI+SB)(术前1小时,GSK-3β抑制剂SB216763,尾静脉注射给药,0.6 mg·kg~(-1)·d~(-1),在2天组中,每24h后给一次药,2天后处死;在7天组中,每24h后给一次药,连续给药7天后处死);Sham组只手术不结扎,MI+SB组同MI组处置方法。3.观察SB216763对大鼠心肌梗死的影响:采用H&E染色、Masson染色、心电图、超声心动图、血清心肌酶的方法检测SB216763对大鼠心脏组织形态、纤维化、心功能以及QT间期的影响,并采用qPCR方法对影响QT间期的离子通道进行筛选,进一步采用qPCR和Western blot的方法对筛选出来的离子通道在mRNA和蛋白水平上进行验证。4.观察SB216763对缺氧H9C2细胞活性和钾离子通道表达的影响:使用Research Science AW400TG细胞工作站建立细胞缺氧模型。分组和给药:H9C2分为7组:NC(正常)、缺氧组(6h、12h、24h)、SB216763预处理组(SB/6h、SB/12h、SB/24h)。预处理组均采用10μM GSK-3β抑制剂SB216763预处理1h后再进行缺氧的方法处理,根据所筛选出的12h时间点检测SB216763对Kir2.1的蛋白表达水平的影响。结果1.GSK-3β抑制剂SB216763对大鼠心肌梗死后心肌组织形态和纤维化的保护作用HE染色结果显示,MI组细胞有空泡化和炎性浸润发生,7天的程度较2天更加明显,所对应的同期的MI+SB组均可以降低细胞损伤的恶性程度。术后Masson染色结果可见,术后组2天和7天MI组胶原纤维增生,比Sham组的纤维化程度明显加重,(P<0.001,P<0.01),所对应的MI+SB组较MI组皆有所减轻(P<0.01,P<0.05)。2.GSK-3β抑制剂SB216763减轻大鼠心肌梗死后心功能的损伤与Sham组相比,MI组在心梗后2天心脏功能受到损害,LVEF和LVFS显着降低(LVEF:P<0.01,LVFS:P<0.01),同MI组相比,MI+SB组改善了LVEF和LVFS的不良后果(LVEF:P<0.05,LVFS:P<0.01)。与Sham组相比,MI组在心梗后7天心脏功能受到损害(LVEF:P<0.001,LVFS:P<0.01),同MI组相比,MI+SB组改善了LVEF和LVFS的不良后果(LVEF:P<0.05,LVFS:P<0.05)。3.GSK-3β抑制剂SB216763减少大鼠心肌梗死后血清LDH、cTn-I的水平术后2天的动物血清中,MI组的心肌酶LDH显着升高,cTn-I无显着升高(LDH:P<0.001,cTn-I:P>0.05),同MI组相比,MI+SB组LDH显着降低,cTn-I无显着降低(LDH:P<0.001,cTn-I:P>0.05)。术后7天的动物血清中,同Sham组相比,MI组心肌酶LDH、cTn-I显着升高(LDH:P<0.001,cTn-I:P<0.001),而MI+SB组LDH、cTn-I比MI组显着降低(LDH:P<0.001,cTn-I:P<0.001)。4.GSK-3β抑制剂SB216763缩短大鼠心肌梗死后心电图的QT间期心电图仪Ⅱ导联测量叁组大鼠手术前、手术后和处死前叁个时间点的心电图,并计算心率(heart rate,HR)、QT间期和QTc。术前各组之间HR、QT、QTc并未明显差异,术后MI组出现异常波形,ST端抬高,表明心肌梗死手术模型造模成功;术后2天和7天的结果均显示,MI组和Sham组相比,HR加快,QT、QTc均明显延长,MI+SB组和MI组相比,HR减慢,QT和QTc均缩短。5.GSK-3β抑制剂SB216763对心肌梗死大鼠Kir2.1 mRNA(KCNJ2)和蛋白表达水平的降低具有上调作用在大鼠心肌梗死后2天和7天检测各组动物心肌组织缺血区SCN 5A(Nav1.5)、KCND2(Kv4.2)、CACNA1C(Cav1.2)、KCNQ1(K_V7.1)、hERG(K_V11.1)、KCNJ2(Kir2.1)的mRNA表达水平。结果显示,心肌梗死后,SCN 5A(Nav1.5)、KCND2(Kv4.2)、KCNQ1(K_V7.1)、hERG(K_V11.1)、KCNJ2(Kir2.1)mRNA表达水平下降,采用B216763预处理后,MI大鼠心肌组织中KCNJ2的表达上调,其余离子通道的mRNA水平无显着变化(P<0.05)。Western blot结果显示,同Sham组相比,MI组Kir2.1蛋白表达水平显着降低(P<0.01),MI+SB组同MI组相比,Kir2.1表达升高(P<0.05)。6.10μM SB216763对H9C2细胞活性的影响用10μM浓度的GSK-3β抑制剂SB216763作用于H9C2细胞培养不同时间后,结果显示,同NC组相比,在此浓度下的SB216763对H9C2细胞培养6h、12h、24h、48h不同时间点的细胞活性没有影响。7.GSK-3β抑制剂SB216763减少缺氧诱导的H9C2细胞后cTn-I的释放量细胞分组处理后,收集细胞上清进行cTn-I检测,同NC相比,缺氧6h、12h、24h的H9C2细胞cTn-I释放显着增加,分别为(P<0.01,P<0.01,P<0.001),抑制剂组在12h时能够显着降低cTn-I的释放(P<0.01)。8.GSK-3β抑制剂SB216763能减弱缺氧H9C2细胞Kir2.1蛋白的降低同NC组相比,在缺氧12h之后,Kir2.1蛋白表达水平显着下调(P<0.01),SB216763预处理之后,Kir2.1蛋白表达上调(P<0.05);结论1.GSK-3β抑制剂SB216763能缓解大鼠心肌梗死后心功能损伤;2.GSK-3β抑制剂SB216763能上调大鼠心肌梗死后钾离子通道KCNJ2/Kir2.1的mRNA和蛋白水平的表达;3.在H9C2细胞水平,GSK-3β抑制剂SB216763对缺氧12h诱导的钾离子通道Kir2.1的表达降低具有上调作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-05-01）
范芳文[4]（2017）在《氯化钡阻滞内向整流钾通道所致大鼠冠状动脉收缩的作用机制》一文中研究指出目的:1.通过观察内向整流钾通道(inward rectifier potassium channels,K_(ir))阻滞剂氯化钡(BaCl_2,0.1-1.0 mmol/L)对离体大鼠冠状动脉(Rat coronary artery,RCA)静息张力的影响,研究K_(ir)阻滞对RCA的收缩作用。2.采用去钙-复钙的方法,研究BaCl_2收缩RCA对细胞内钙([Ca~(2+)]_i)释放和细胞外钙([Ca~(2+)]_o)内流的依赖性。3.通过观察氯通道阻滞剂NPPB和尼氟灭酸(NFA),钙通道阻滞剂硝苯地平对BaCl_2收缩RCA作用的影响,从氯通道和钙通道角度探讨其收缩机制;通过抑制剂(环氧合酶抑制剂吲哚美辛、MAPK抑制剂PD98059和SB239063)实验,探讨BaCl_2收缩RCA与前列腺素合成及MAPK通路之间的关系。方法:1.正常成年雄性Sprague-Dawley大鼠,200-250 g,腹腔注射戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻醉,断头,放血处死,迅速取出心脏,置于4℃预冷生理盐溶液(physiological salt solution,PSS)中。在解剖显微镜下沿右心室打开心腔,钝性分离冠状动脉(直径150~260μm)。将血管剪成长度约为2 mm的血管环,使用两根直径为40μm的钢丝固定于Multi Myograph System-610M微血管张力记录仪(DMT)浴槽(盛有5mL PSS,37℃)中。采用PowerLab张力记录系统观察RCA血管张力变化。血管环标准化并平衡1 h后,采用KCl(60 mmol/L)刺激血管环叁次,待血管环对KCl(60 mmol/L)的收缩可重复后开始正式实验。静息状态时,向浴槽中累积加入BaCl_2(0.1,0.3,1.0mmol/L),记录血管张力变化,结果以KCl(60 mmol/L)引起的最大收缩幅度为100%,计算BaCl_2各浓度所致收缩幅度的百分比,并构建BaCl_2浓度-效应曲线。2.采用去钙-复钙的方法,观察细胞外钙([Ca~(2+)]_o)内流和细胞内钙([Ca~(2+)]_i)释放在BaCl_2收缩RCA中的作用。当RCA对BaCl_2(0.3 mmol/L)的收缩幅度可重复时,先用含有EGTA(1.0 mmol/L)的无钙PSS液洗脱血管环叁次,再用不含有EGTA的无钙PSS液洗脱叁次,稳定20 min后,向浴槽内加入BaCl_2使其在浴槽内的终浓度为0.3 mmol/L,观察RCA血管张力的变化。10 min后,向浴槽中加入CaCl_2(2.5mmol/L),观察复钙后RCA血管张力的变化。计算复钙前后BaCl_2所致收缩占总收缩的百分比,以此反映BaCl_2引起的RCA收缩对细胞内外钙的依赖性,以KCl(60mmol/L)为比较对照。3.待RCA对BaCl_2(0.1-1.0 mmol/L)反应可重复后,分别观察以下抑制剂对BaCl_2收缩RCA的影响:L-型电压依赖性钙通道阻滞剂硝苯地平(0.3μmol/L)、ERK1/2抑制剂PD98059(3μmol/L)、p38MAPK抑制剂SB239063(3μmol/L)、环氧合酶抑制剂吲哚美辛(10,30,100μmol/L)、氯通道阻滞剂NFA(10,30,100μmol/L)和NPPB(10,30,100μmol/L)。用不同浓度抑制剂分别预孵30 min后,在抑制剂持续存在的情况下,用同浓度的BaCl_2刺激RCA。结果以KCl(60 mmol/L)引起的收缩幅度为100%,分别计算预孵不同浓度抑制剂前后BaCl_2的收缩幅度。结果:1.静息状态下,BaCl_2(0.1-1.0 mmol/L)浓度依赖性地引起RCA收缩。BaCl_2(0.1,0.3,1.0 mmol/L)的收缩幅度分别为(0.42±0.12)mN、(2.63±0.51)mN、(5.68±1.62)mN,分别相当于KCl(60 mmol/L)收缩幅度的(7.64±2.13)%、(49.32±6.46)%、(104.56±10.15)%。其EC_(50)值为0.34mmol/L。2.BaCl_2(0.3 mmol/L)在正常PSS液中的收缩幅度为(2.83±0.98)mN,相当于KCl(60 mmol/L)收缩幅度的(49.92±5.83)%。在无钙液中和复钙后的幅度分别占BaCl_2总收缩幅度的(31.63±5.23)%、(68.37±5.94)%。KCl(60 mmol/L)在正常PSS液中的收缩幅度为(5.78±1.21)mN,在无钙液中和复钙后的收缩百分比分别为KCl总收缩的(5.58±1.63)%、(94.42±11.27)%。3.硝苯地平(0.3μmol/L)对BaCl_2最大收缩的抑制率为(87.82±5.43)%(P<0.01)。NFA(10,30,100μmol/L)、NPPB(10,30,100μmol/L)浓度依赖性地使BaCl_2浓度-效应曲线右移,并抑制最大反应。NFA(30,100μmol/L)对BaCl_2最大收缩的抑制率分别为(28.29±5.37)%(P<0.05)、(82.24±7.69)%(P<0.01),IC_(50)为56.34μmol/L。NPPB(30,100μmol/L)使BaCl_2对RCA的最大收缩幅度分别减小了(40.45±6.91)%(P<0.05),(90.83±10.42)%(P<0.01),IC_(50)为37.81μmol/L。4.吲哚美辛(10,30,100μmol/L)浓度依赖性地使BaCl_2浓度-效应曲线右移,并使其最大效应降低。Indo(100μmol/L)对BaCl_2最大收缩的抑制率为(73.23±5.47)%(P<0.01),IC_(50)为93.42μmol/L。5.预孵PD98059(3μmol/L)对BaCl_2最大收缩的抑制率为(40.62±5.29)%(P<0.05);预孵SB239063(3μmol/L)对BaCl_2最大收缩的抑制率为(54.95±8.32)%(P<0.05)。结论:1.静息状态下,BaCl_2(0.1-1.0 mmol/L)浓度依赖性地收缩离体RCA。2.BaCl_2收缩RCA所需要的Ca~(2+)大部分来源于细胞外钙内流,小部分来源于细胞内钙释放。3.BaCl_2收缩RCA的机制可能与具有缩血管作用的前列腺素类物质(PGs)合成增加、氯通道和L-型电压依赖性钙通道活性增加以及MAPK信号通路激活有关。(本文来源于《山西医科大学》期刊2017-06-01）
杨迎[5]（2017）在《心肌内向整流钾通道激动剂抑制异丙肾上腺素所致大鼠心室重构》一文中研究指出目的:1.建立大鼠在体和离体心室重构模型,检验盐酸扎考必利(zacopride,,Zac)对重构模型的影响;2.探讨zacopride抑制异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)所致大鼠心室重构的可能信号转导机制;3.应用低浓度Ba~(2+)和氯喹(chloroquine,Chlo)(两者均为I_(K1)相对特异性阻断剂)对I_(K1)的抑制作用,证实特异性增强I_(K1)与抗心室重构效应的关系。方法:第一部分成年大鼠在体实验SD大鼠称重,随机分组:正常对照组、单纯zacopride组、Iso模型组、zacopride干预组、zacopride+氯喹干预组和卡托普利阳性对照组。除正常对照和单纯zacopride组外,其余各组动物均腹腔注射异丙肾上腺素(3 mg/kg/d),正常对照组腹腔注射等量的生理盐水,zacopride干预组腹腔注射15μg/kg,zacopride+氯喹组同时腹腔注射15μg/kgzacopride和7.5μg/kg氯喹,卡托普利阳性对照组按100 mg/kg/d饮水给与卡托普利。连续10天。所有大鼠均饲以常规固体饲料和自来水,于停药24 h禁食过夜,然后观察相应指标。观测各组全心质量与体质量(HW/BW,mg/g)比,左心室质量与体质量(LVW/BW,mg/g)比。用全细胞膜片钳技术检测大鼠心室肌细胞电压门控钙电流(ICa-L)、静息膜电位(RMP)及动作电位(AP)的变化。用Masson’s染色法检测左室心肌组织的纤维化水平,western blotting测定构成I_(K1)的主要亚单位Kir2.1、磷酸化钙调蛋白激酶II(p-Ca MKII)、肌浆网Ca-ATP酶(SERCA2)和活化凋亡蛋白酶cleaved caspase-3的表达。第二部分大鼠乳鼠心肌细胞体外实验新生1~3d SD乳鼠用0.08%胰蛋白酶和0.04%II型胶原酶分离心肌细胞,经差速贴壁法和5-溴脱氧尿苷(5-Brdu)纯化后随机分为正常对照组、单纯zacopride组、Iso模型组、zacopride干预组、zacopride+Ba Cl2干预组和zacopride+氯喹干预组,培养24h后用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞面积及胞内游离钙离子浓度,流式细胞术测心肌细胞凋亡。结果:第一部分成年大鼠在体实验1.异丙肾上腺素可导致心脏体积增大,全心肥厚指数、左心室肥厚指数显着升高,心脏HE和Masson’s染色显示心肌纤维增粗,排列紊乱,基质胶原沉积,纤维化。而zacopride可有效逆转异丙肾上腺素所致心室重构,其效应与公认的抗重构药物卡托普利相似。应用低剂量氯喹选择性阻断I_(K1)可消除zacopride的抗心室重构作用;2.长期应用异丙肾上腺素可导致心室肌细胞发生电重构,RMP减小,细胞膜去极化,动作电位时程(APD)明显延长。应用zacopride干预后可使RMP减小或恢复至生理水平,并缩短APD(P<0.01)。小剂量氯喹选择性阻断I_(K1)可消除zacopride的作用(P<0.01);3.结果发现,长期应用zacopride对正常大鼠心肌ICa-L无明显影响;4.Western blotting实验结果表明:异丙肾上腺素可导致大鼠心室肌Kir2.1蛋白下调;细胞内钙依赖性调节蛋白比例失衡,磷酸化Ca MKII活性增强,SERCA2被抑制,活化的caspase 3表达增强。经zacopride干预,大鼠心肌Kir2.1表达增加,Ca MKII磷酸化抑制而SERCA2表达增强,钙稳态调节蛋白恢复平衡;并抑制Caspase 3的活化。小剂量氯喹选择性阻断I_(K1)可消除zacopride的作用。第二部分大鼠乳鼠心肌细胞体外实验1.在镜下可见异丙肾上腺素模型组的心肌细胞表面积明显增大(P<0.01),zacopride干预后细胞形态恢复至正常或接近正常水平(P<0.01)。这一结果与zacopride逆转在体异丙肾上腺素所致的心肌肥大的作用相一致;2.利用激光共聚焦测定胞内钙浓度,结果表明zacopride使肥厚模型组心肌细胞内升高了的Ca~(2+)浓度显着降低(P<0.01),而低浓度Ba Cl2和氯喹作为I_(K1)阻断剂可逆转zacopride的抗重构作用(P<0.05);3.流式细胞术结果表明,zacopride可通过激动IK抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡。结论:1.I_(K1)通道选择性激动剂zacopride明显抑制异丙肾上腺素所致的心室重构。2.Zacopride通过激动I_(K1)而增大RMP,缩短ADP,两者均可减少电压门控钙离子内流,减轻细胞内钙超载,进而抑制Ca~(2+)激活的心室重构信号转导通路,并抑制心肌细胞凋亡,这可能是I_(K1)激动剂zacopride抗心室重构的主要机制。(本文来源于《山西医科大学》期刊2017-05-20）
陈依春,李超红,杨明珠,王晓露,封启龙[6]（2016）在《内向整流钾通道激动剂对异丙肾诱发心肌肥厚大鼠心律失常的抑制作用及机制研究》一文中研究指出目的研究内向整流钾通道激动剂扎考必利(zacopride,Zac)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发的心肌肥厚大鼠心律失常的抑制作用及其电生理机制。方法1 51只SD大鼠(200~230 g),随机分为对照组、ISO组和ISO+Zac组(n=17)。连续7 d经腹腔注射5 mg·kg~(-1)ISO,建立大鼠心肌肥厚模型;2利用体表心电图观察Zac对ISO诱发的心肌肥厚大鼠心律失常的效应;3应用全细胞膜片钳技术观测Zac对模型组大鼠心肌细胞内向整流钾电流(I_(K1))、静息电位(RMP)、延迟后除极(DADs)及触发活动(TA)的影响。结果 1 M型超声心动图显示,与对照组相比,ISO组大鼠左室舒张末期内径(LVEDD)和左室收缩末期内径(LVESD)均明显降低,左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)和室间隔舒张末期厚度(IVSd)均增高(P<0.05),提示ISO诱发建立大鼠心肌肥厚模型成功;2体表心电图显示,ISO组肥厚大鼠88.89%发生室性心律失常(频发室性期前收缩),生理盐水对照组大鼠未观察到心律失常的发生。在连续7 d给予15μg·kg~(-1) Zac干预后,肥厚大鼠心律失常发生率降至11.11%(P<0.05);3与对照组相比,ISO组大鼠RMP由(-71.05±1.27)m V降低至(-69.38±1.21)m V(P<0.05);连续7 d给予15μg·kg~(-1) Zac后,RMP增加至(-73.86±1.33)m V,较对照组和ISO组均明显增大(P<0.05);4 ISO+Zac组大鼠单个心肌细胞DADs和TA发生率较ISO致心肌肥厚组明显降低,由88.24%降低至11.76%(P<0.05);5与对照组相比,ISO组大鼠内向整流钾通道电流(I_(K1))明显降低,在给予Zac(15μg·kg~(-1))后I_(K1)明显增加(P<0.05)。结论选择性I_(K1)通道激动剂Zac可明显抑制ISO诱发的心肌肥厚大鼠心律失常的发生,其机制与它通过增强I_(K1)使膜电位负值增大和抑制延迟后除极的效应有关。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2016年08期）
李欣然[7]（2016）在《心肌梗死后心肌细胞内向整流钾通道重构以及缬沙坦干预机制的研究》一文中研究指出研究背景尽管当代社会医疗水平不断进步,人们对健康生活方式的认识逐步加深,但心肌梗死(myocardial infarcion, MI)仍是临床上最常见的心血管疾病之一,是我国人民健康面临的重大威胁。我国每年约有54万人死于心脏性猝死,近九成猝死原因是急性MI后发生的恶性心律失常。以往的研究发现室性心律失常及心源性猝死与钾离子通道的重构有关。尤其是内向整流钾通道(the inward rectifier potassium channel, Kir),它是维持正常的动作电位的主要成分,维持静息膜电位,参与动作电位早期和终末复极化。在心肌细胞中最丰富的内向整流钾通道是IK1通道,心脏型为Kir2.1蛋白,被KCNJ2基因编码。MI后心室肌细胞电重构的主要特点之一是IK1电流密度的下降,导致室性心律失常的发生或易感性增加。尽管目前临床上已有多种抗心律失常药物的应用,但这些成熟的抗心律失常药物同时存在致心律失常作用,尤其是在QT间期延长者中应用。而MI后患者QT间期延长是提示恶性室性心律失常甚至猝死发生的重要指标。因此目前已知的抗心律失常药物在MI患者中的应用颇受局限。临床MI患者多数伴有高血压病等危险因素,而肾素—血管紧张素—醛固酮系统(Renin-angiotensin-aldosterone system, RAAS)拮抗剂可以显着降低恶性心律失常的发生率,但具体机制尚未明确。因此,如能明确RAAS拮抗剂发挥抗心律失常作用的靶点,探明其作用机制,将对发现新的抗心律失常药物、改善MI预后具有重要意义。第一部分 大鼠也肌梗死后内向整流钾通道重构以及缬沙坦的干预作用目的明确急性MI后大鼠梗死灶周和非梗死左心室游离壁区心肌细胞中内向整流钾通道(Kir2.1蛋白)的表达水平,以及缬沙坦干预对该通道的效果。并且评价药物干预后大鼠心率、血压、室性心律失常易感性及血流动力学指标。方法通过永久性结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性MI模型,评价造模情况。造模成功后随机分为假手术组(Control组)、假手术组+缬沙坦组(Control+ Valsartan组)、心肌梗死组(MI组)、心肌梗死+缬沙坦组(MI+Valsartan组)。利用小动物遥测及尾动脉测压法记录大鼠术后心率、血压和心电图。7天后提取梗死灶周和非梗死左心室游离壁区心肌组织,利用qPCR和Westen blot法检测四组KCNJ2 mRNA水平和Kir2.1蛋白水平。结果冠脉结扎术中心电监测和术后Masson's染色证明造模成功。MI后7天,MI组大鼠心率、血压均较Control组和Control+Valsartan组升高,而MI+Valsartan组有所下降。MI后延长的QTc和QTcd亦在缬沙坦干预后趋于正常。此外缬沙坦有效改善MI后心脏射血分数等血流动力学指标。同时,MI组中KCNJ2 mRNA和Kir2.1蛋白水平较Control组和Control+Valsartan组降低,而MI+Valsartan组中缬沙坦改善了该离子通道的重构。结论大鼠MI后IK1通道表达水平显着降低,缬沙坦干预可逆转这一现象,同时伴随着心律失常易感性降低。而在正常大鼠心肌中,缬沙坦对IKI通道的调控作用并无显着统计学差异。机制一：缬沙坦通过抑制心肌梗死后激活的NF-κB-miR-16信号通路调控内向整流钾电流第二部分 缬沙坦改善心肌梗死后内向整流钾通道重构的机制研究目的MicroRNAs是调控心律失常的重要因素之一。计算机预测microRNA-16(miR-16)可以靶向调控KCNJ2基因。NF-κB可以调控miR-16的启动子。本实验主要验证缬沙坦是否可以通过抑制MI后激活的NF-κB来下调miR-16的表达,且miR-16是否可以靶向调控KCNJ2基因的表达。方法MI大鼠给予缬沙坦或生理盐水灌胃7天,提取梗死灶周心肌组织RNA和蛋白。体外培养H9c2心肌细胞和急性分离的新生大鼠心室肌细胞,转染miR-16或给予血管紧张素II及缬沙坦干预。Western blot法检测NF-κB p65, inhibitor KBa (IκBα)和Kir2.1蛋白水平,qPCR检测KCNJ2 mRNA和miR-16表达水平。全细胞膜片钳记录IK1电流。荧光素酶检测验证KCNJ2是否为miR-16靶基因。CHIP验证NF-κB对miR-16的DNA结合水平。结果梗死灶周miR-16表达水平升高,伴随KCNJ2/Kir2.1水平下降。体外转染miR-16使之过表达,导致KCNJ2/Kir2.1表达下调,伴随着IK1电流密度减低。相反的,抑制miR-16或导致其结合位点突变增强了KCNJ2/Kir2.1的表达。MI大鼠接受缬沙坦干预后,升高的NF-κB p65和miR-16水平下调,而降低的IκBα和Kir2.1蛋白水平升高。体外试验中,血管紧张素II诱导的miR-16表达升高和KCNJ2/Kir2.1表达下降,同样被缬沙坦抑制。而体外经缬沙坦处理的细胞中过表达miR-16,可消除缬沙坦对KCNJ2/Kir2.1的保护作用。体内和体外实验均证明缺氧环境下NF-κB p65表达上调,而IκBα表达下降,缬沙坦干预抑制了这一现象。而抑制NF-κB后,缬沙坦和NF-κB抑制剂对miR-16和KCNJ2/Kir2.1的调节作用相似。CHIP进一步验证缬沙坦抑制NF-κB对miR-16的DNA结合水平。结论MiR-16靶向调节KCNJ2基因的表达,MI后缬沙坦改善KCNJ2/Kir2.1的重构一定程度上依赖于NF-KB-miR-16信号通路。机制二：缬沙坦通过抑制心肌梗死后激活的酪蛋白激酶2调控内向整流钾电流目的MI后细胞内PKC等蛋白激酶对IKI的调节主要依赖于PIP2,并且其下游的调控机制鲜有报道。研究发现酪蛋白激酶2(CK2)结合并磷酸化编码Kir2.1蛋白的KCNJ2基因转录因子Spl。然而缬沙坦是否可以抑制MI后激活的CK2蛋白活性来影响KCNJ2基因表达以直接改善IK1通道重构还尚不明确。方法MI大鼠给予缬沙坦或生理盐水灌胃7天,提取梗死灶周和非梗死左心室游离壁心肌组织RNA和蛋白。体外培养H9c2心肌细胞和急性分离的新生大鼠心室肌细胞,转染CK2或给予CoCl2、CK2抑制剂TBB及缬沙坦干预。Western blot法检测CK2和Kir2.1蛋白水平,qPCR检测CK2 mRNA和KCNJ2 mRNA表达水平。全细胞膜片钳记录IK1电流。EMSA检测体内及体外Sp1的DNA结合活性。结果梗死灶周和非梗死左心室游离壁区心肌组织CK2蛋白表达升高,Kir2.1蛋白表达下降,伴随着IK1电流密度减低,同时伴随二者mRNA水平的变化。缬沙坦干预后逆转了这一现象。体外培养的H9c2细胞中过表达CK2蛋白抑制了KCNJ2/Kir2.1的表达。相反的,抑制CK2蛋白可以增加KCNJ2/Kir2.1的表达。同样的,在体外诱导缺氧环境中,缬沙坦同样抑制缺氧后升高的CK2蛋白水平。体外经缬沙坦处理的细胞中过表达CK2,可消除缬沙坦对KCNJ2/Kir2.1的保护作用。EMSA检测证明CK2抑制Sp1的DNA结合活性,TBB抑制CK2后,Sp1的DNA结合活性升高。而MI后大鼠心肌组织中Sp1的DNA结合活性下降,缬沙坦干预后其活性上升。结论AT1受体拮抗剂缬沙坦抑制CK2蛋白活性,增加Kir2.1蛋白表达,从而改善MI后IK1通道重构。机制叁：缬沙坦通过抑制心肌梗死后激活的I型辅助性T细胞免疫反应调控内向整流钾电流目的MI导致Kir2.1蛋白介导的IK1电流密度减低,伴随着T细胞水平上调。细胞因子IFN-γ主要Thl细胞分泌。小胶质细胞中IFN-γ导致IK1电流密度下降。本实验主要验证MI后Th1细胞是否可以通过其分泌的细胞因子介导IK1通道重构,以及缬沙坦是否可以改善这一现象。方法空白对照大鼠和MI大鼠给予缬沙坦或生理盐水灌胃7天,提取梗死灶周心肌组织RNA和蛋白。体外培养急性分离的梗死灶周大鼠心室肌细胞和新生大鼠心室肌细胞,分别给予缬沙坦干预和与分离的淋巴细胞共培养。流式细胞术分析大鼠心肌组织中Thl细胞数目。Elisa法检测大鼠血浆中IFN-γ、IL-2和TNF-α水平。Western blot法检测Kir2.1蛋白水平,qPCR检测T-bet、GATA-3、IFN-γ和IL-10的mRNA表达水平。全细胞膜片钳记录IK1电流。结果MI后Th1细胞数目及其分泌的细胞因子水平升高,Kir2.1蛋白水平下降。而MI大鼠缬沙坦干预后,Thl细胞数及其细胞因子水平下降,同时Kir2.1蛋白表达及IK1电流密度升高。在体外淋巴细胞与心肌细胞共培养后,缬沙坦干预对Kir2.1/IK1的调控同上。在体外培养的新生大鼠心室肌细胞中,IFN-γ干预可抑制IK1电流密度,而IL-2和TNF-α对该通道无明显作用。结论缬沙坦可以通过抑制MI后激活的Thl免疫反应、减低IFN-γ水平,来改善IK1通道的重构。(本文来源于《山东大学》期刊2016-04-28）
李凡[8]（2016）在《内向整流钾通道Kir4.1在少突胶质细胞发育及髓鞘形成中的作用》一文中研究指出少突胶质细胞(Oligodendrocyte,OL)是中枢神经系统(Central nervous system,CNS)的髓鞘形成细胞,对于髓鞘的形成以及神经信息的传递有着非常重要的作用。少突胶质细胞由少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化而来。长期研究明确地表明,OL发育异常、脱髓鞘或髓鞘再生障碍参与了CNS多种疾病的形成,其中包括多发性硬化症(Multiple sclerosis,MS),视神经炎,肌萎缩侧索硬化,精神分裂症,抑郁症等精神疾病的病理生理过程。有最新研究显示内向整流钾离子通道4.1(Inwardly rectifying K channel 4.1,Kir4.1)在MS病人的病灶区表达异常,Kir4.1通道广泛分布在各种组织,因为该通道电压与电流的关系具有内向整流特性而得名。Kir4.1通道对调节神经的兴奋性、电解质的平衡和维持正常神经功能具有极为重要的作用,但其是否参与髓鞘化异常或者脱髓鞘疾病仍不清楚。少突胶质细胞由少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化而来。目前关于Kir4.1在OL发育以及髓鞘形成中的作用还未见报道。目前我们的研究旨在Kir4.1是否参与CNS髓鞘发育。我们的实验数据显示,Kir4.1在体外培养的OPC和OL中均有表达,在诱导OPC分化为OL后,Kir4.1表达水平显着增高。加入Kir4.1特异性阻断剂地西帕明(Desipramine,DES)发现细胞中髓鞘相关蛋白(Myelin basic protein,MBP)信号明显减弱,MBP阳性细胞数明显低于对照,证实阻断Kir4.1功能会导致体外OPC分化受阻。同时,在少突胶质细胞系特异敲除Kir4.1通道的小鼠中发现胼胝体和视神经髓鞘发育异常,胼胝体OL细胞减少,海马组织和皮层组织MBP表达量降低。这说明在少突胶质细胞系中敲除Kir4.1会导致OL发育受阻和CNS髓鞘缺陷。这些结果提示向整流钾通道kir4.1在ol发育及髓鞘形成中发挥重要作用。研究目的:明确内向整流钾通道kir4.1是否在少突胶质细胞发育及髓鞘形成中发挥作用。研究方法:1.利用westernblot和细胞免疫组化检测opc分化的不同阶段,kir4.1及髓鞘相关蛋白mbp的表达情况。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,gapdh)为内参,聚合酶链反应(polymerasechainreaction,pcr)方法检测kir4.1及mbp的mrna表达。2.利用kir4.1的特异性阻断剂desipramine在opc分化的不同阶段阻断kir4.1通道96h后,westernblot检测髓鞘相关蛋白mbp的表达情况。细胞免疫染色方法检测加入des后,mbp、少突胶质细胞系的标记蛋白olig2(oligodendrocytetranscriptionfactor2)、增殖细胞相关核抗原ki67和血小板源性生长因子α受体(α-receptorforplatelet-derivedgrowthfactor,pdgfrα)的表达情况。3.利用kir4.1f/f小鼠与少突胶质细胞系特异性表达olig1的cre小鼠杂交,构建在少突胶质细胞系中特异敲除kir4.1通道的遗传修饰小鼠品系olig1-cre。利用依来铬氰r染色法和电镜技术检测视神经髓鞘的形态学变化,利用confocal显微镜观察kir4.1敲除对ol细胞发育的影响。利用westernblot技术检测kir4.1敲除小鼠海马、大脑皮层以及脊髓中mbp的表达状况。主要结果:1.在体外培养的ol细胞中kir4.1通道蛋白和信使核糖核酸(messengerrna,mrna)的表达量较opc增加,ol细胞中mbp蛋白和mrna的表达量较opc也明显增加。2.体外培养的opc细胞中加入des后,mbp表达量明显下降,ki67和pdgfrα表达量明显增加。3.依来铬氰R染色和电镜观察显示Kir4.1敲除的小鼠视神经髓鞘发育异常,免疫荧光染色显示Kir4.1敲除的小鼠中Olig2、成熟少突胶质细胞标记物(adenomatous polyposis coli(APC)tumor suppressor protein,CC-1)表达量下降。Western blot显示Kir4.1敲除小鼠海马和大脑皮层中MBP表达量明显下降,脊髓中MBP表达量无明显变化。结论:1.内向整流钾通道Kir4.1在少突胶质细胞发育过程中发挥重要作用;2.阻断内向整流钾通道Kir4.1会抑制少突胶质前体细胞的分化;3.内向整流钾通道Kir4.1的功能异常会影响中枢神经系统的髓鞘形成。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2016-03-01）
李文凭,崔晓栋,侯宁宁,张晓芸,刘建华[9]（2015）在《内向整流钾通道阻断剂对内皮祖细胞功能的影响》一文中研究指出目的:研究内向整流钾通道阻断剂氯化钡(BaCl2)和氯化铯(CsCl)对内皮祖细胞(EPCs)功能的影响。方法:利用密度梯度离心法体外分离大鼠骨髓单核细胞,并进行体外诱导培养。待细胞培养至3~5代时将细胞消化并等密度接种于六孔板中,待细胞融合至80%时用含2%胎牛血清的M199对其进行同步化处理,然后分组进行干预。本实验主要分两组:1BaCl2(100μmol/L)及其无BaCl2的台氏液组;2CsCl(1 mmol/L)及其正常对照组。依照上述分组加入阻断剂干预12 h后,检测迁移、粘附功能及基质细胞衍生因子(SDF-1)、前列环素(PGI2)基因表达的变化。此外,收集各组处理3 d后的细胞上清,用ELISA试剂盒检测上清中SDF-1的含量。并进一步通过信号通路阻断剂预先干预内皮祖细胞(EPCs),然后重复上述处理,并用荧光定量RT-PCR检测SDF-1基因表达的变化来推测其作用机制。结果:与对照组相比,用BaCl2、CsCl处理后的EPCs迁移、粘附能力显着增强,SDF-1、PGI2基因表达量增加;ELISA检测结果显示,SDF-1分泌量较对照组明显增加。Ba2+、Cs+促进SDF-1分泌与e NOS信号通路有关;促进PGI2的分泌与P38信号通路相关。结论:Ba2+、Cs+具有促进EPCs迁移、粘附和分泌功能;SDF-1分泌增加的机制可能是通过e NOS信号通路来完成的,而PGI2与P38信号通路有关联。(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2015年05期）
姜晓东,阎政礼,汪耀珠,周桂凤[10]（2015）在《激活视网膜水平细胞NMDA受体抑制内向整流钾通道活动》一文中研究指出目的探讨视网膜水平细胞上激活NMDA受体对其内向整流钾通道的调控作用。方法采用酶解分离的视网膜水平细胞进行膜片钳全细胞记录,在给药激活NMDA受体前后,分别记录内向整流钾通道的电流大小;另外在无钙及螯合胞内钙条件下,观察NMDA受体对内向整流钾通道的作用。结果激活NMDA受体后,内向整流钾通道电流减小,灌流洗脱后电流恢复;在无钙和螯合胞内钙的条件下,激活NMDA受体不能改变内向整流钾通道活动。结论激活视网膜水平细胞NMDA受体可以通过胞内钙信号抑制内向整流钾通道电流。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2015年10期）
内向整流钾通道论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究内向整流钾通道Kir4.1对少突胶质细胞(OL)发育的作用。方法体外原代分离培养少突胶质前体细胞(OPC),利用PCR和Western blot技术检测OPC和成熟OL中Kir4.1和髓鞘相关蛋白MBP的基因和蛋白表达水平。用desipramine(DES)阻断Kir4.1通道后,再检测细胞增殖和分化及MBP的表达情况。结果 Kir4.1在OL细胞中表达升高,阻断Kir4.1可以促进OPC增殖,但是抑制OPC向OL细胞分化。结论 Kir4.1在OL细胞发育过程中发挥着重要作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
内向整流钾通道论文参考文献
[1].李盼,赵晓泽,乔希,贺培凤,卢学春.基于多源数据和动作电位特征筛选心肌内向整流钾通道特异性激动剂[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].海霞霞,朱娜,王俊燕,肖晶晶,毕逢辰.内向整流钾通道对少突胶质前体细胞发育的作用[J].心血管外科杂志(电子版).2019
[3].常成.GSK-3β抑制剂增加内向整流钾通道Kir2.1的表达改善心肌梗死大鼠的电重构[D].郑州大学.2019
[4].范芳文.氯化钡阻滞内向整流钾通道所致大鼠冠状动脉收缩的作用机制[D].山西医科大学.2017
[5].杨迎.心肌内向整流钾通道激动剂抑制异丙肾上腺素所致大鼠心室重构[D].山西医科大学.2017
[6].陈依春,李超红,杨明珠,王晓露,封启龙.内向整流钾通道激动剂对异丙肾诱发心肌肥厚大鼠心律失常的抑制作用及机制研究[J].中国药理学通报.2016
[7].李欣然.心肌梗死后心肌细胞内向整流钾通道重构以及缬沙坦干预机制的研究[D].山东大学.2016
[8].李凡.内向整流钾通道Kir4.1在少突胶质细胞发育及髓鞘形成中的作用[D].宁夏医科大学.2016
[9].李文凭,崔晓栋,侯宁宁,张晓芸,刘建华.内向整流钾通道阻断剂对内皮祖细胞功能的影响[J].中国应用生理学杂志.2015
[10].姜晓东,阎政礼,汪耀珠,周桂凤.激活视网膜水平细胞NMDA受体抑制内向整流钾通道活动[J].中国药理学通报.2015
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