导读:本文包含了胚乳细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胚乳,细胞,籽粒,小麦,千里光,合子,线粒体。
胚乳细胞论文文献综述
钱秋博言,王蕾,杨春先,余金芮,谢欣[1]（2019）在《千里光合子胚和胚乳形成及其早期发育的细胞学特征（英文）》一文中研究指出千里光(Senecio scandens Buch.-Ham. ex D. Don)是传统中草药,抗菌功效显着。本研究从细胞学角度对千里光合子胚和胚乳的形成与发育进行观察研究。结果显示,结构和功能迥异的基细胞和顶细胞源自细胞质不均一分布的合子所致,推测合子的极性与胚囊的极性和生殖核分裂为"二态"精细胞有关;基细胞在合子胚胎"球型期"末期出现分化,早期胚胎的组织分化始于"叁角期",可辨别的结构差异直到"鱼雷期"才出现。此外,胚乳形成遵循无细胞壁核化模型。本研究对千里光细胞分化、组织分化和结构差异各发育阶段特征的观察结果,不仅可为深入分析胚胎发育过程功能基因的时空表达提供依据,也为相关近缘物种的系统植物学研究提供参考资料。(本文来源于《植物科学学报》期刊2019年01期）
祁远宏[2]（2018）在《淹水胁迫下小麦胚乳线粒体损伤和细胞色素c释放对细胞程序性死亡的影响》一文中研究指出实验室前期研究表明,小麦(Triticum aestivum L.)胚乳发育需经历细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD)过程,淹水可加速其进程。为进一步揭示淹水胁迫下小麦胚乳细胞PCD进程提前的生理和细胞学机制,本实验以华麦8号为材料,在开花当天对其进行淹水处理,从显微和超微结构水平研究了胚乳细胞中线粒体动态变化;采用免疫荧光、蛋白印迹等技术多角度研究了胚乳中细胞色素c释放情况;利用实时定量PCR研究了胚乳中线粒体渗透性转运孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)组分相关基因的表达情况。另外,研究了抗环血酸、环孢菌素A和过氧化氢处理对耐湿品种华麦8号和不耐湿品种华麦9号生理生化和PCD进程的影响。研究结果表明:1.未淹水情况下,胚乳细胞超微结构显示,发育早期胚乳中线粒体结构完整,内嵴清晰,花后12 d线粒体轻微变形,内嵴模糊,花后20 d大部分线粒体降解,仅在细胞边缘处存在少量线粒体,结构模糊。线粒体膜电位和膜吸光度检测结果显示,随着胚乳细胞发育时间的延长线粒体膜电位膜降低,膜通透性增大,线粒体损伤加剧。淹水处理后,花后10 d胚乳细胞中部分线粒体明显膨大,花后15 d胚乳细胞中大部分线粒体内部出现电子透明区域,有被膜结构包裹的未降解完全的线粒体存在;线粒体膜电位和膜吸光度低于同时期未淹水处理组。正常生长的小麦胚乳细胞中线粒体结构随着胚乳PCD的进行逐渐被破坏,淹水胁迫导致这种损伤加剧,时间提前。2.未淹水情况下,免疫荧光结果显示,在花后10 d之前胚乳细胞中细胞色素c主要定位于线粒体上,花后12 d细胞色素c开始从线粒体释放到胞质中,花后15 d和花后20 d细胞色素c进一步释放;超微细胞化学定位发现,花后8 d细胞色素c主要集中在线粒体上,花后15 d在线粒体内外均可检测到细胞色素c的存在;蛋白印迹结果同样显示,花后12 d以后随着胚乳细胞发育胞质中细胞色素c含量逐渐增多。淹水胁迫下,免疫荧光和蛋白印迹结果都显示,在花后10 d即可观察到细胞色素c从线粒体释放到胞质中,并且释放的细胞色素c含量高于同时期未淹水处理组。正常生长的小麦胚乳细胞中细胞色素c在花后12 d开始从线粒体释放到胞质中,而淹水胁迫下细胞色素c在花后10 d即开始从线粒体释放,且释放量大于同时期未淹水处理组。淹水胁迫导致细胞色素c释放时间提前,释放量增加。3.实时定量PCR结果显示,未淹水情况下,小麦胚乳细胞中VDAC2表达量基本不变、VDAC3表达量先增加后降低、ANT1表达量逐渐降低,与蛋白折迭相关基因HSP70和HSP90表达量均先降低后增加。而淹水处理后VDAC2和VDAC3表达量均在花后8 d显着增加,ANT1表达量在花后10 d达到峰,HSP70和HSP90基因表达量均低于未淹水对照组。MPTP可能参与淹水胁迫促进胚乳细胞PCD过程的调节,而蛋白折迭障碍可能在其中承担一部分作用。4.使用外源H_2O_2处理后,与未进行药物处理对照组相比,华麦8号胚乳细胞中H_2O_2和O~(2-)含量上升,SOD和CAT活性增加,线粒体膜透性增加,细胞色素c释放增多,caspase-like蛋白酶活性上升;华麦9号中变化趋势类似,但与华麦8号相比较,细胞中O~(2-)积累更多、CAT活性上升幅度较小。使用外源抗环血酸处理后,华麦8号和华麦9号中H_2O_2含量均降低。使用外源环孢菌素A处理后,部分抑制了H_2O_2处理导致的ROS含量上升、线粒体膜透性增加、细胞色素c释放增多和caspase-like蛋白酶活性上升等现象。以上结果说明,外源H_2O_2处理加剧了小麦胚乳细胞PCD,且华麦9号在遭遇外界胁迫后胚乳中ROS积累更多,抗氧化酶系统较弱,可能是其不耐湿的机制之一。综上所述,淹水处理加剧小麦胚乳细胞中线粒体损伤和细胞色素c释放,可能是淹水导致胚乳细胞PCD加剧和进程提前的原因之一。线粒体在正常生长和淹水胁迫下小麦胚乳细胞PCD的调控过程中发挥重要作用。华麦9号胚乳中ROS累积多以及抗氧化系统弱,可能是其不耐湿的原因之一。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01）
王宏迪[3]（2018）在《黄精种子胚乳细胞特异结构与种子休眠相关性研究》一文中研究指出黄精种子存在休眠,不易萌发,目前关于黄精种子休眠原因及破眠技术有了一些研究。研究发现黄精种子休眠属于综合休眠,其中胚乳细胞机械障碍是引起黄精种子休眠的主要原因之一。本文通过研究比较不同发育时期黄精种子胚乳细胞形态特征、不同产地黄精种子胚乳细胞形态差异,结合不同发育时期和不同萌发时期黄精种子中木质素代谢相关酶活性变化、石细胞含量变化,以期阐释黄精种子休眠的深层次原因。主要研究结果如下:(1)通过对黄精有性生殖器官发育解剖特性的研究,揭示了黄精种子胚乳细胞机械障碍形成规律。4月下旬到5月中旬黄精花由现蕾到开放,此时黄精雄蕊逐渐发育成熟,4月下旬到6月上旬,黄精雌蕊也在有序发育,于6月上旬完成双受精作用。6-8月为黄精受精后各器官发育形成的主要时期。8-10月份黄精果实发育基本成熟,在此期间黄精种子发生了一系列变化,特别是在8-9月份黄精种子胚乳细胞壁急剧加厚,细胞内容物消失。该特异结构的形成使得黄精种子无比坚硬,导致通透性变差,影响黄精种子正常吸水和萌发。(2)不同环境条件对黄精胚乳细胞具有一定影响。从黄精胚乳细胞壁的加厚程度来看:产于广东韶关、河南鲁山、安徽黄山的黄精胚乳细胞壁加厚程度较浅,均呈不密实的断线状的波浪形凸起加厚;产于陕西汉中、江西信丰的黄精胚乳细胞壁加厚程度较深,细胞壁较均匀,加厚部位较密实。(3)黄精种子发育过程中木质素合成相关酶活性与石细胞含量及种子硬度之间具有一定的相关性。黄精种子发育成熟过程中PAL、4CL、C4H、CAD四种酶活性差异较大,其中4CL、C4H和PAL叁种酶活性随着种子的发育成熟逐渐上升,说明这几种酶通过促进木质素合成对黄精种子硬实起到不同程度的促进作用。种子发育过程中,石细胞含量变化呈先上升后稳定的趋势,与C4H和4CL酶活性变化呈极显着性正相关关系。说明黄精种子硬实现象主要是胚乳细胞壁加厚,最终形成石细胞所导致。(4)黄精种子萌发过程中木质素合成相关酶活性与石细胞含量及种子硬度之间也具有一定的相关性。4CL活性在种子萌发前期下降,PAL活性在种子萌发后期下降,CAD、C4H活性在萌发初期上升,后期下降,总体来说这四种酶都对种子萌发有所响应。在此萌发过程中,石细胞含量变化与CAD活性变化呈极显着正相关关系,进一步说明了黄精种子机械障碍是由石细胞造成的。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-05-01）
高佳,董树亭,刘鹏,赵斌,张吉旺[4]（2017）在《遮阴对夏玉米籽粒胚乳细胞增殖及产量的影响》一文中研究指出【研究背景】玉米是全球重要的粮食作物之一,为人类提供粮食、饲料和生物能源。然而,受各种气候条件和环境因素(如阴雨天气,植株密度,海拔高度等)的影响,玉米生产经常受到弱光胁迫的危害,弱光已成为影响夏玉米生长发育和产量形成的重要非生物逆境之一。而前人关于光照对夏玉米生产影响的研究多集中于营养体建成,而关于不同时期遮阴胁迫对夏玉米籽粒生长发育影响的研究鲜见报道。为了更好地了解夏玉米对弱光胁迫的反应,我们对不同遮阴胁迫下的夏玉米胚乳细胞增殖及产量形成进行了研究;【材料与方法】选用夏玉米品种郑单958(ZD958)和登海605(DH605)为试验材料,于山东农业大学试验农场进行了大田试验,种植密度为67500株hm~(-2),试验设计S1:开花至收获期遮阴,S2:拔节至开花期遮阴和S3:出苗至收获期遮阴叁个遮阴处理,遮光度为60%,以大田自然光照生长的玉米作为对照(CK),研究不同遮阴胁迫对夏玉米籽粒胚乳细胞增殖、籽粒灌浆、淀粉含量、干物质积累及产量的影响;【结果与分析】不同遮阴处理导致夏玉米的籽粒胚乳细胞增殖速率和增殖高值持续期降低,胚乳细胞数目和淀粉积累量减少,细胞充实度下降,粒重显着降低。郑单958和登海605两个品种S1、S2和S3处理成熟期的胚乳细胞数目较对照分别降低33%、6%、29%和41%、5%、29%。遮阴降低了夏玉米籽粒灌浆速率,推迟了籽粒灌浆速率最大值的出现日期,导致灌浆活跃期缩短,严重影响了籽粒的正常灌浆,抑制了籽粒的生长发育,郑单958和登海605两个品种S1、S2和S3处理的最大灌浆速率较对照分别降低34%、13%、58%和138%、13%、64%。不同遮阴处理导致夏玉米的粒重和产量降低,两个品种S1、S2和1S3处理较对照分别减产58%、26%、81%和67%、27%、81%。结果表明,不同时期遮阴抑制了夏玉米籽粒的生长发育,且不同遮阴处理的影响程度不同,全生育期遮阴对夏玉米籽粒生长发育影响最大,花粒期遮阴次之,穗期遮阴影响相对较小;【结论】不同遮阴处理降低了夏玉米籽粒胚乳细胞增殖速率、胚乳细胞数目和淀粉含量,籽粒灌浆速率减缓,灌浆高值持续期降低,最终导致夏玉米产量降低,(本文来源于《2017年中国作物学会学术年会摘要集》期刊2017-10-19）
俞敏[5]（2017）在《淹水胁迫诱导小麦胚乳细胞编程性死亡提前的生理机制和细胞骨架动态研究》一文中研究指出前期研究表明,小麦胚乳发育需经历编程性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)过程,淹水可加速其进程(Fan et al 2013)。本研究以耐湿品种华麦8号和不耐湿品种华麦9号为材料,探讨了淹水胁迫下小麦胚乳PCD进程提前的生理及细胞学机制。主要结果如下:1.Evans Blue染色结果显示,正常生长的华麦8号和华麦9号胚乳均在花后15 d可检测到PCD现象。淹水处理后,同期生长的胚乳着色更深,PCD进程加剧;与华麦8号相比,华麦9号胚乳PCD进程提前。半薄切片染色结果显示,正常生长的两品种小麦胚乳细胞中淀粉粒和蛋白体均随发育天数增加逐渐增多,淹水可加速淀粉体和蛋白体在胚乳细胞中积累。正常生长的两品种胚乳细胞核分别在花后12 d和15 d发生降解;淹水可加剧同期胚乳核降解过程,并能使华麦9号胚乳细胞核降解提前发生。2.淹水胁迫后,华麦8号颖果含水率下降,胚乳中MDA、H2O2和O2-含量上升,早期发育的胚乳中可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量增加,SOD和CAT活性上升,SOD同工酶谱上新增了SOD1带,CAT同工酶谱上新增了CAT2、CAT5带,且各种CAT同工酶活性均增强;华麦9号胚乳中MDA、O2-、H2O2和可溶性蛋白含量显着上升,SOD和POD活性略有升高,而CAT活性随发育天数的增加呈“降-升-降”的趋势,SOD同工酶变化不大,仅SOD2活性有所上升,而各CAT同工酶活性均上升。3.微管蛋白免疫荧光及免疫电镜结果显示,随着胚乳发育的进行,细胞中微管蛋白荧光信号逐渐增强。胶体金统计分析结果显示,淹水后早期发育的胚乳淀粉质体周围和细胞质囊泡中微管蛋白胶体金数目显着高于对照;花后12 d的胚乳中微管蛋白胶体金颗粒增加,主要分布在淀粉质体周围;花后15 d的胚乳线粒体和淀粉质体周围微管蛋白数量增加,细胞质中分布较少。微丝蛋白免疫荧光及免疫电镜结果显示,正常发育的胚乳细胞中微丝蛋白荧光信号,随发育天数的增加逐渐增强。胶体金统计分析结果显示,淹水处理后,早期发育的胚乳淀粉质体周围和细胞质中微丝蛋白胶体金颗粒显着增加;花后12 d的胚乳线粒体周围微丝蛋白胶体金数目减少;花后15 d,细胞质中仍然分布大量微丝蛋白。综上所述,淹水处理后,华麦8号和华麦9号胚乳中MDA及活性氧含量均上升,造成胚乳PCD进程加剧;早期发育的华麦9号胚乳中活性氧上升幅度大,而其清除能力弱,PCD进程提前。胚乳细胞中养分和淀粉质体迅速积累,细胞骨架可能作为运输轨道,协助胚乳细胞提前完成生命过程,以减轻淹水造成的伤害,其还可能参与淹水胁迫的应急反应,调控胚乳细胞PCD进程。(本文来源于《华中农业大学》期刊2017-06-01）
高佳,史建国,董树亭,刘鹏,赵斌[6]（2017）在《夏玉米籽粒胚乳细胞增殖及产量对不同光照的响应》一文中研究指出为了探讨不同光照条件对夏玉米籽粒胚乳细胞增殖及产量的影响,2012—2014年于山东农业大学试验农场进行了大田试验,选玉米品种郑单958和登海605为试验材料,设置大田自然光照(CK)、开花至收获期遮阴(S1)、拔节至开花期遮阴(S2)、出苗至收获期遮阴(S3)和开花至收获期增光(L)5个处理,研究其对夏玉米籽粒胚乳细胞增殖、籽粒灌浆、淀粉含量、干物质积累及产量的影响。结果表明,遮阴后籽粒胚乳细胞增殖速率、细胞数目和淀粉积累量降低,细胞充实度下降,粒重显着降低,且S3对其影响最大,S1次之,S2影响相对较小。郑单958和登海605两个品种S1、S2和S3成熟期的胚乳细胞数目较CK分别降低33%、6%、29%和41%、5%、29%,DH605 L处理显着提高了胚乳细胞增殖速率、胚乳细胞数目及淀粉含量,细胞充实度和粒重显着上升。遮阴导致籽粒灌浆速率减缓,灌浆高峰期推迟,2个品种S1、S2和S3的最大灌浆速率较CK分别降低34%、13%、58%和38%、13%、64%,登海605L处理提高了籽粒灌浆速率,籽粒灌浆高峰期提前出现。2个品种S1、S2和S3较CK分别减产58%、26%、81%和67%、27%、81%,登海605 L处理增产9%。即遮阴降低了籽粒胚乳细胞数目、淀粉含量和灌浆速率,进而影响产量,花粒期充足的光照则有助于籽粒胚乳细胞增殖和产量提高。(本文来源于《作物学报》期刊2017年10期）
丁一,魏际华,张宁,舒小丽,吴殿星[7]（2017）在《水稻胚乳细胞生物反应器研究进展》一文中研究指出水稻胚乳细胞生物反应器是一种理想的生物活性物质生产工厂,本文综述了以水稻胚乳细胞为生物反应器生产药物蛋白、疫苗、功能肽及非蛋白类生物活性物质的研究进展。(本文来源于《中国稻米》期刊2017年03期）
周丽娟[8]（2017）在《转录因子ZmMYBR19参与玉米胚乳传递细胞发育及淀粉合成的调控机理初探》一文中研究指出近年来,玉米(Zea may L.)已成为世界和我国第一大粮食作物,在全球粮食安全、经济贸易以及我国国民经济中占有举足轻重的地位。在玉米籽粒中,淀粉是其主要组成成分,其含量高达70%。胚乳传递细胞参与物质的短途运输过程,其发育与作物的产量有密切联系。玉米胚乳传递细胞为淀粉的合成场所胚乳传递营养物质,将间接影响籽粒中的淀粉积累。目前,还未见相关研究报道可同时参与调控玉米胚乳传递细胞发育以及淀粉合成相关基因表达的转录因子。课题组通过对玉米籽粒不同发育时期的表达谱数据分析,筛选到了 15个在授粉后12天左右高表达的转录因子,其中ZmMYBR19与已有功能研究的ZmMRP-1同源。同时,有关测序数据表明基因ZmMYBR19在玉米胚乳中也有表达。本论文主要采用RT-PCR、亚细胞定位、基因枪介导玉米胚乳及PEG介导原生质体转化的瞬时表达、酵母转化、酵母单杂交、酵母双杂交、原核表达等一系列实验技术,研究该转录因子的特性,分析基因表达模式,筛选顺式作用元件以及它对玉米胚乳传递细胞高表达基因、淀粉合成关键酶基因启动子的转录调控作用,初步探究该基因的功能,为进一步揭示玉米胚乳传递细胞发育以及淀粉合成调控的分子机制奠定基础。具体结果如下:1、构建亲缘进化树(NJ树)分析,表明ZmMYBR19与调控玉米胚乳传递细胞分化与功能的ZmMRP-1同源。以玉米自交系B73为实验材料,从玉米胚乳中成功克隆到ZmMYBR19基因,含有一个编码290个氨基酸的开放阅读框。对ZmMYBR19蛋白的高级结构进行预测分析,结果表明ZmMYBR19具有典型的MYB蛋白的二级结构、叁级结构及结构域。2、实时定量PCR分析ZmMYBR19在不同时期及不同组织中的表达情况,结果表明:ZmMYBR19在花丝、雄穗、苗期根、苗期叶、成熟期胚轴以及玉米胚中几乎不表达;在玉米种子和胚乳中,ZmMYBR19在授粉后第14天表达量最高,其他时期表达量较低或几乎不表达;该转录因子具有明显的时空表达特异性。基因枪轰击介导洋葱表皮细胞对ZmMYBR19蛋白亚细胞定位,结果表明:ZmMYBR19只定位于细胞核中;酵母激活分析表明:ZmMYBR19全序列蛋白不具有转录激活活性。酵母单杂交实验结果表明:ZmMYBR19能在酵母体内结合GAGATA元件。3、酵母单杂交实验和瞬时过表达实验用于研究ZmMYBR19与相关基因启动子间的相互作用。结果表明:ZmMYBR19能在酵母体内结合淀粉合成相关基因SS1、ISA1、Bt2和Sh2的启动子,同时也能结合一些在胚乳传递细胞高表达基因的启动子。玉米叶片原生质体的瞬时表达分析表明;ZmMYBR19促进了在玉米胚乳传递细胞中高表达的基因Tc8403启动子的活性。玉米胚乳的瞬时表达结果表明:ZmMYBR19能够上调BT1、Bt2,Sh2、SSI、ISA1和SBEllb基因启动子的活性。结合酵母单杂交分析,ZmMYBR19通过与Bt2、Sh2、SSI和ISA1基因启动子的直接结合上调启动子活性。4、通过酵母双杂交对玉米胚乳文库筛选研究ZmMYBR19的相互作用蛋白,结果表明:组氨酸蛋白激酶HP2和参与淀粉合成关键酶基因调控的转录因子ZmMADS11能在酵母体内与ZmMYBR19相互作用。克隆玉米ZmMYBR19蛋白的编码序列连接入pGEX-6P-1载体,在大肠杆菌Rosetta?(DE3)菌株中进行原核表达,通过GenStarGST纯化得到了目的蛋白。(本文来源于《四川农业大学》期刊2017-05-01）
明金玉[9]（2017）在《黑皮、黑胚乳、高蛋白的黑粒小麦分子细胞遗传学研究》一文中研究指出黑粒小麦富含天然黑色素,具有特殊的调节和保健功能,已成为食品工业的热点之一。本研究利用形态学和分子细胞遗传学鉴定等手段,对已选育的23份黑粒小麦的田间表现、染色体组成和遗传特性等进行分析和鉴定,同时利用蛋白质检测和籽粒剖面对比分析法,鉴定黑粒小麦的黑皮、黑胚乳和高蛋白的特点,旨在为全面评价黑粒小麦的种质资源特性和品质特性提供理论基础和科学依据。研究结果表明,23份黑粒小麦品系农艺性状良好,籽粒饱满。籽粒剖面对比分析表明,种皮和糊粉层完全呈现黑色,胚乳中亦有黑色成分存在。蛋白质检测结果表明,有86.9%的品系蛋白质含量在19%以上,其中含量在20%以上的品系有10个。最为突出品系是6-19,千粒重为32.148g,蛋白质含量为21.15%。田间试验稳定,生长整齐一致,种皮为黑色无分离现象。细胞学鉴定结果表明,23份材料的根尖染色体数均为42条,形态稳定,为普通小麦类型,减数分裂中期Ⅰ染色体多为环状二价体,遗传稳定。分子标记和原位杂交结果证实,23个品系均有外源染色体成分,来自于偃麦草的5E染色体。综上所述,本研究选育出的黑粒小麦为黑皮、黑胚乳、高蛋白的黑粒小麦,普通小麦类型,田间试验遗传性状稳定。可作为推广材料进一步扩繁。综合产量、营养、稳定性等多方因素,推广品系可为6-19、6-16。(本文来源于《哈尔滨师范大学》期刊2017-05-01）
孙颖,王蕾,杨雪,王阿香,何淼[10]（2016）在《侧金盏胚和胚乳发育的细胞胚胎学研究》一文中研究指出利用石蜡切片技术对毛茛科植物侧金盏胚及胚乳发育进行了研究,以明确其胚胎发育的特征,为毛茛科植物的系统研究提供资料。结果表明:(1)侧金盏胚的发育属于柳叶菜型,胚乳发育为核型;初生胚乳核的分裂早于合子的第一次分裂。(2)种子成熟时,种胚尚未分化完全,尚处于球形胚后期或心形胚早期阶段,整个胚发育大约需要50~60d。(3)侧金盏种子存在明显的形态生理休眠现象,经后熟作用逐渐完成种胚的分化与生长,形成子叶形胚;侧金盏种子在相同处理条件下胚分化和发育的速度存在差异。(本文来源于《西北植物学报》期刊2016年12期）
胚乳细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
实验室前期研究表明,小麦(Triticum aestivum L.)胚乳发育需经历细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD)过程,淹水可加速其进程。为进一步揭示淹水胁迫下小麦胚乳细胞PCD进程提前的生理和细胞学机制,本实验以华麦8号为材料,在开花当天对其进行淹水处理,从显微和超微结构水平研究了胚乳细胞中线粒体动态变化;采用免疫荧光、蛋白印迹等技术多角度研究了胚乳中细胞色素c释放情况;利用实时定量PCR研究了胚乳中线粒体渗透性转运孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)组分相关基因的表达情况。另外,研究了抗环血酸、环孢菌素A和过氧化氢处理对耐湿品种华麦8号和不耐湿品种华麦9号生理生化和PCD进程的影响。研究结果表明:1.未淹水情况下,胚乳细胞超微结构显示,发育早期胚乳中线粒体结构完整,内嵴清晰,花后12 d线粒体轻微变形,内嵴模糊,花后20 d大部分线粒体降解,仅在细胞边缘处存在少量线粒体,结构模糊。线粒体膜电位和膜吸光度检测结果显示,随着胚乳细胞发育时间的延长线粒体膜电位膜降低,膜通透性增大,线粒体损伤加剧。淹水处理后,花后10 d胚乳细胞中部分线粒体明显膨大,花后15 d胚乳细胞中大部分线粒体内部出现电子透明区域,有被膜结构包裹的未降解完全的线粒体存在;线粒体膜电位和膜吸光度低于同时期未淹水处理组。正常生长的小麦胚乳细胞中线粒体结构随着胚乳PCD的进行逐渐被破坏,淹水胁迫导致这种损伤加剧,时间提前。2.未淹水情况下,免疫荧光结果显示,在花后10 d之前胚乳细胞中细胞色素c主要定位于线粒体上,花后12 d细胞色素c开始从线粒体释放到胞质中,花后15 d和花后20 d细胞色素c进一步释放;超微细胞化学定位发现,花后8 d细胞色素c主要集中在线粒体上,花后15 d在线粒体内外均可检测到细胞色素c的存在;蛋白印迹结果同样显示,花后12 d以后随着胚乳细胞发育胞质中细胞色素c含量逐渐增多。淹水胁迫下,免疫荧光和蛋白印迹结果都显示,在花后10 d即可观察到细胞色素c从线粒体释放到胞质中,并且释放的细胞色素c含量高于同时期未淹水处理组。正常生长的小麦胚乳细胞中细胞色素c在花后12 d开始从线粒体释放到胞质中,而淹水胁迫下细胞色素c在花后10 d即开始从线粒体释放,且释放量大于同时期未淹水处理组。淹水胁迫导致细胞色素c释放时间提前,释放量增加。3.实时定量PCR结果显示,未淹水情况下,小麦胚乳细胞中VDAC2表达量基本不变、VDAC3表达量先增加后降低、ANT1表达量逐渐降低,与蛋白折迭相关基因HSP70和HSP90表达量均先降低后增加。而淹水处理后VDAC2和VDAC3表达量均在花后8 d显着增加,ANT1表达量在花后10 d达到峰,HSP70和HSP90基因表达量均低于未淹水对照组。MPTP可能参与淹水胁迫促进胚乳细胞PCD过程的调节,而蛋白折迭障碍可能在其中承担一部分作用。4.使用外源H_2O_2处理后,与未进行药物处理对照组相比,华麦8号胚乳细胞中H_2O_2和O~(2-)含量上升,SOD和CAT活性增加,线粒体膜透性增加,细胞色素c释放增多,caspase-like蛋白酶活性上升;华麦9号中变化趋势类似,但与华麦8号相比较,细胞中O~(2-)积累更多、CAT活性上升幅度较小。使用外源抗环血酸处理后,华麦8号和华麦9号中H_2O_2含量均降低。使用外源环孢菌素A处理后,部分抑制了H_2O_2处理导致的ROS含量上升、线粒体膜透性增加、细胞色素c释放增多和caspase-like蛋白酶活性上升等现象。以上结果说明,外源H_2O_2处理加剧了小麦胚乳细胞PCD,且华麦9号在遭遇外界胁迫后胚乳中ROS积累更多,抗氧化酶系统较弱,可能是其不耐湿的机制之一。综上所述,淹水处理加剧小麦胚乳细胞中线粒体损伤和细胞色素c释放,可能是淹水导致胚乳细胞PCD加剧和进程提前的原因之一。线粒体在正常生长和淹水胁迫下小麦胚乳细胞PCD的调控过程中发挥重要作用。华麦9号胚乳中ROS累积多以及抗氧化系统弱,可能是其不耐湿的原因之一。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胚乳细胞论文参考文献
[1].钱秋博言,王蕾,杨春先,余金芮,谢欣.千里光合子胚和胚乳形成及其早期发育的细胞学特征（英文）[J].植物科学学报.2019
[2].祁远宏.淹水胁迫下小麦胚乳线粒体损伤和细胞色素c释放对细胞程序性死亡的影响[D].华中农业大学.2018
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