导读:本文包含了等电聚焦分析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毛细管,电泳,电荷,异质,蛋白质,蛋白,抗体。
等电聚焦分析论文文献综述
刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超[1]（2019）在《固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用》一文中研究指出通过聚合物原位聚合反应,制备了部分填充的毛细管整体柱。pH 3～10的载体两性电解质被固化在该毛细管整体柱上。在引入八通进样阀、叁通阀和四通连接单元的基础上,构建了适用于固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱(M-IPG)的平台。在蛋白质药物测定过程中,用M-IPG柱和羟丙基纤维素(HPC)涂层毛细管柱同时对曲托珠单抗和依那西谱的等电点进行了测定。结果表明,两种等电聚焦柱都能够同时分离混合蛋白质样品并测定蛋白质类药物中单抗和融合蛋白质的等电点(pI), M-IPG柱所测的pI值与HPC涂层毛细管柱测定的结果基本一致,表明了该柱在进一步构建多维分离平台进行蛋白质组学研究方面的潜力。(本文来源于《色谱》期刊2019年10期）
武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰[2]（2019）在《成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备》一文中研究指出目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2019年01期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[3]（2018）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦法(iCIEF)分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白(血管内皮生长因子受体-抗体Fc融合蛋白)的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段,用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确,重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组VEGFR:Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年03期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[4]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)法分析重组人IgG Fc-融合蛋白的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确、重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编》期刊2017-07-18）
牛纪成,谢松芳,方芳,吴志勇[5]（2017）在《复杂蛋白混合物在纸基分析装置(PAD)上的等电聚焦(IEF)》一文中研究指出用简便易行且价廉快速的方法在从复杂蛋白样品中快速发现蛋白标志物和对特定蛋白质进行定性定量分析中仍具有现实意义。近些年,纸基分析装置(PAD)因具有便携、价廉和易操作等优点在POCT领域中的应用潜力重新受到了广泛关注[1][2]。如何将蛋白质预分离技术与纸基分析装置结合以实现复杂蛋白质样品的分析仍面临很多问题。等电聚焦(IEF)是在一定pH梯度条件下基于两性分子的等电点进行分离的一种电泳方法。因其具有浓集和分离能力,在蛋白质组研究中具有重要的地位[3]。本文成功展示了一种在简单开放的纸流体通道上进行IEF的方法(Fig.1a),用模型蛋(本文来源于《第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集》期刊2017-05-19）
孟晓光,甄里,刘悦玫,侯利平,刘丹[6]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性》一文中研究指出评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特征峰(p I 5.95±0.01);比较重组人生长激素原液和成品,等电点特征峰比例差异明显,且成品有新特征峰出现;对比进口及国产贝伐单抗,发现厂家1、3与原研药基本一致,厂家1的主成分迁移规律与原研药高度一致,厂家2的重链C末端K缺失、N末端焦谷氨酸环化或脱酰胺修饰影响了电荷异质性;通过考察尿素浓度、电解质范围和聚焦时间,优化了检测重组人促卵泡素等电点条件:2 mol/L尿素,两性电解质pH 2.5~5.0与pH 3.0~10.0按1∶1混合,聚焦电压1 000 V(1 min)~1 800 V(4 min)~2 200 V(1 min)。cIEF-WCID可快速、准确测定具有电荷异质性的蛋白类药物等电点,分辨率和重复性好,尤其是可以跟踪聚焦过程中样本的迁移特征,特别适合蛋白类药物复杂电荷异质性的检测。(本文来源于《分析测试学报》期刊2017年03期）
刘莉丹[7]（2015）在《毛细管等电聚焦分析蛋白质的方法研究》一文中研究指出等电点(Isoelectric point,pI)是蛋白质、多肽、微生物、细胞及细胞器等两性生物微粒的重要理化参数之一。毛细管等电聚焦(Capillary isoelectric focusing,cIEF)是基于毛细管电泳技术测定两性物质等电点的方法。利用cIEF不仅可以表征不同等电点的蛋白质和多肽,实现对样品各组分的分离检测,还可研究分子间的相互作用。激光诱导荧光检测是高灵敏检测技术,检出限低、检测时间短、样品用量少、可实现在线检测。毛细管等电聚焦结合激光诱导荧光检测具有高效、快速、高灵敏的优势。本论文主要包括以下工作:(1)比较了毛细管等电聚焦电泳一步法和两步法,并通过对样品溶液组成、进样量、聚焦电压、电极液pH等实验参数进行优化,改进了毛细管等电聚焦电泳一步法。结果表明改进后的一步法分离速度快、聚焦完全、步骤简单、适应性广。(2)将毛细管等电聚焦电泳一步法应用于多种融合蛋白的分析检测。结果表明方法的分离度、线性关系令人满意,实验测定的等电点值与蛋白的生产厂家估测的理论值基本一致。表明该方法可用于实际样品中蛋白质的分离纯化、质量控制、稳定性评价以及等电点测定。(3)将cIEF-LIF和毛细管区带电泳(CZE-LIF)方法用于绿色荧光蛋白的分析,优化了分离电压、缓冲液pH、电极液pH等实验参数,为进一步研究绿色荧光蛋白(以及其他荧光蛋白)与核酸的相互作用,以及筛选荧光蛋白的核酸适配体奠定了实验基础。(本文来源于《北京理工大学》期刊2015-06-01）
王丽,周勇,王军志[8]（2014）在《成像毛细管等电聚焦技术分析重组人促红素异质性》一文中研究指出目的:应用成像毛细管等电聚焦分析重组人促红素(rhEPO)的异构体和等电点。方法:首先对成像毛细管等电聚焦电泳技术进行了条件优化,并用优化的方法分析了rhEPO候选国家理化标准品和来自不同生产企业的10批rhEPO产品。根据成像毛细管等电聚焦电泳分析结果和体内生物学活性结果进一步分析了rhEPO糖链异构体与体内比活性的相关性。结果:优化的成像毛细管等电聚焦电泳技术可获得蛋白特异性图谱,可较好地分析重组人促红素的异构体和等电点。通过统计分析表明,成像毛细管等电聚焦电泳分析rhEPO的第2、3和4峰含量和体内生物学比活性之间存在正相关,第1和第6峰含量和体内比活性之间存在负相关。结论:成像毛细管等电聚焦技术能够分析重组人促红素的异构体和等电点,相关性分析显示异构体的组成与体内比活性相关,异质性分析在重组人促红素的质量控制中具有重要意义。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2014年06期）
柳淑清[9]（2014）在《等电聚焦电泳技术分析玉米品种纯度简报》一文中研究指出品种纯度是玉米种子四大指标之一,目前我国鉴定玉米品种纯度的方法是采用小区种植鉴定法。此方法用时长,对于种子企业来说,小区种植鉴定是一种后补的方法,要到下一年才能确定品种纯度,从而影响种子的销售工作。为了给种子企业赢取销售时间,下面介绍一种室内电泳纯度鉴定方法——等电聚焦电泳。1等电聚焦电泳方法1.1仪器设备和试剂配制该方法需电泳仪、电泳槽、注射器、烧杯、量筒、试管、漏斗、滤纸、刻刀、移液器、玻(本文来源于《中国种业》期刊2014年05期）
刘鸿,姚鋆,杨芃原,樊惠芝[10]（2014）在《肽段固相等电聚焦结合液相色谱-质谱联用技术分析鼠肝蛋白质》一文中研究指出利用肽段固相胶条等电聚焦技术对大鼠鼠肝组织蛋白质酶解产物进行预分离,反相色谱分离所得预分离组分后,用LTQ-Orbitrap MS进行分析。共鉴定到2039个蛋白质,包括18个乙酰化蛋白,其中4个乙酰化蛋白未被报道过。对这些蛋白进行了生物信息学分析。结果表明,将肽段等电聚焦与LC-MS/MS结合起来,是一种有效的蛋白质组学分析技术,适合于大规模蛋白质鉴定分析。(本文来源于《分析化学》期刊2014年02期）
等电聚焦分析论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
等电聚焦分析论文参考文献
[1].刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超.固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用[J].色谱.2019
[2].武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰.成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备[J].药物分析杂志.2019
[3].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGVEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性[J].药物分析杂志.2018
[4].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGFc-融合蛋白电荷异质性[C].第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编.2017
[5].牛纪成,谢松芳,方芳,吴志勇.复杂蛋白混合物在纸基分析装置(PAD)上的等电聚焦(IEF)[C].第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集.2017
[6].孟晓光,甄里,刘悦玫,侯利平,刘丹.全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性[J].分析测试学报.2017
[7].刘莉丹.毛细管等电聚焦分析蛋白质的方法研究[D].北京理工大学.2015
[8].王丽,周勇,王军志.成像毛细管等电聚焦技术分析重组人促红素异质性[J].药物分析杂志.2014
[9].柳淑清.等电聚焦电泳技术分析玉米品种纯度简报[J].中国种业.2014
[10].刘鸿,姚鋆,杨芃原,樊惠芝.肽段固相等电聚焦结合液相色谱-质谱联用技术分析鼠肝蛋白质[J].分析化学.2014
论文知识图
