阪崎克罗诺杆菌标准物质研制

阪崎克罗诺杆菌标准物质研制

论文摘要

目的采用冷冻干燥技术制备均匀性和稳定性符合要求的阪崎克罗诺杆菌标准物质,用于实验室内部质量控制。方法对使用菌株阪崎克罗诺杆菌(45403)的生化特征、16SrRNA序列、质谱特征进行确认。采用冷冻干燥技术制备含量为103 CFU/样品的菌球。参照CNAS-GL29《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》,对20件样品进行均匀性检验,采用单因素方差分析对结果进行统计分析。将样品分别于-20、2、37℃条件下保藏,对其储藏稳定性和运输稳定性进行评价。组织5家实验室进行协同标定。使用20件婴儿配方乳粉作为基质对阪崎克罗诺杆菌标准物质的使用效果进行确认。结果阪崎克罗诺杆菌(45403)生化鉴定结果、16SrRNA序列的NCBIGenebank比对结果、质谱鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)。采用单因素方差分析进行均匀性检验, F=1.067, P=0.442,符合标准物质的要求。于-20℃保藏170 d,于25、37℃保藏14d后,样品仍然稳定。经5家实验室协同标定,样品含量均为103 CFU/样品。20件婴儿配方乳粉作为基质加入阪崎克罗诺杆菌标准物质进行检验,均可以检出。结论阪崎克罗诺杆菌(CMCC45403)的生化特征、16SrRNA序列分析、蛋白飞行质谱特征均符合克罗诺杆菌属的典型特征。均匀性、储藏稳定性、运输稳定性及适用性的验证实验结果均符合标准物质的要求。

论文目录

  • 1 引言
  • 2 材料与方法
  •   2.1 材料、仪器与试剂
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 克罗诺杆菌标准物质的制备
  •     2.2.2 运输稳定性检验
  •     2.2.3 保藏稳定性检验
  •     2.2.4 均匀性检验
  •     2.2.5 协同标定
  •     2.2.6 克罗诺杆菌标准物质使用效果验证
  • 3 结果与分析
  •   3.1 使用菌株的确认结果
  •   3.2 样品均匀性的检验结果
  •   3.3 阪崎克罗诺杆菌标准物质运输稳定性结果
  •   3.4 阪崎克罗诺杆菌标准物质储藏稳定性结果
  •   3.5 协同标定结果
  •   3.6 克罗诺杆菌标准物质使用效果验证
  • 4 结论与讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 骆海朋,瞿洪仁,申静云,任秀,陈怡文,谢冠东,余文,刘娜,丁宏,崔生辉

    关键词: 微生物标准物质,克罗诺杆菌属,阪崎肠杆菌

    来源: 食品安全质量检测学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 中国食品药品检定研究院

    基金: 科技部“食品安全关键技术研发”重点专项项目(2017YFC1601400)~~

    分类号: TS207.3

    页码: 54-59

    总页数: 6

    文件大小: 982K

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