导读:本文包含了膀胱移行细胞癌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:膀胱,细胞,蛋白,基因,肿瘤,抑制,丝氨酸。
膀胱移行细胞癌论文文献综述
夏桃林,徐炜,李斌,徐文峰,林哲[1]（2019）在《T-cad在表浅性膀胱移行细胞癌中的表达与临床意义》一文中研究指出目的比较尿液及组织中T-cad蛋白在表浅性膀胱移行细胞癌患者的水平,探讨其在表浅性膀胱癌诊断与随访中的临床应用价值。方法选择50例初发表浅性膀胱移行细胞癌和50例其他泌尿系统疾病患者,检测术前晨尿液中T-cad蛋白的水平。50例浅表性膀胱癌患者均行经尿道膀胱肿瘤电切术,病理标本检测T-cad蛋白的表达;术后予规律灌注化疗及膀胱镜检随访。比较其表达水平与肿瘤G分级及复发的关系。结果表浅性膀胱癌组尿液T-cad蛋白平均浓度为(2.12±1.16) ng/ml;与对照组[(3.03±1.97) ng/ml]比较差异无统计学意义(P=0.08)。17例G1患者中5例(29.4%)膀胱癌组织中T-cad蛋白的低表达或无表达;33例G2-G3患者中17例(51.5%)出现膀胱癌组织中T-cad蛋白的低表达或无表达;T-cad在G1的表达高于G2-G3,差异有统计学意义(P<0.05)。T-cad高表达的28例膀胱癌患者中5例复发,复发率17.9%;T-cad低表达的22例膀胱癌患者中12例复发,复发率54.5%。两者间差异有统计学意义(P<0.05)。结论膀胱癌组织中T-cad蛋白表达与G分级、肿瘤复发负相关;膀胱癌组织中T-cad蛋白的低表达可能与膀胱癌的发生进展相关。(本文来源于《中华临床实验室管理电子杂志》期刊2019年02期）
李旭[2]（2019）在《SPAG9/HEF1/Rac1信号通路对膀胱移行细胞癌中上皮间充质化过程的影响研究》一文中研究指出目的:研究SPAG9对膀胱癌细胞侵袭和迁移等生物学行为的影响,进一步探究膀胱癌转移机制,寻找新型治疗膀胱癌的靶点。方法:1、运用实时定量PCR和免疫组化技术定量及定性测量SPAG9以及HEF1在膀胱移行上皮癌及癌旁组织中的表达情况。2、构建SPAG9和HEF1特征性沉默和过表达载体,运用RNA干扰技术转染T24和5637细胞构建稳定转染细胞株,通过Transwell迁移和侵袭实验研究不同表达状况的SPAG9/HEF1对细胞迁移侵袭能力的影响。3、构建裸鼠接种模型,研究体内实验中SPAG9的不同表达对HEF1蛋白的影响,同时运用Western Blot技术研究其外情况下SPAG9的不同表达对HEF1的干扰程度。4、查阅文献选定EMT特征蛋白,运用Western Blot分析SPAG9/HEF1不同表达情况下对相关EMT蛋白表程度的影响。5、Western Blot测定HEF1蛋白表达高低对Rac1信号通路的影响,结合复合转染补救实验决定HEF1和Rac1通路在膀胱癌细胞中的具体调节关系。6、统计临床获得标本中分类数据如年龄和肿瘤大小等指征数据与相应标本中SPAG9/HEF1表达高低的相关关系,验证SPAG9和HEF1之间的相关趋势。结果:1、通过对临床采集标本研究我们发现SPAG9和HEF1在膀胱癌中对比癌旁组织均呈现高表达,并具有显着统计学意义(P<0.005)。SPAG9高表达在所有136标本中占84例,比例为61.8%,HEF1高表达在全136例中有94例,占比69.1%。同时SPAG9和HEF1均被发现在低级别膀胱癌中过表情况比例要高于高级别膀胱癌。具体为SPAG9在低级别膀胱癌中过表达占比为88.8%(48/54)对比与高级别的63.4%(56/82),P<0.001;HEF1在低级别膀胱癌中过表达占比为83.3%(45/54)对比与高级别的68.3%(56/82),P<0.05。SPAG9和HEF1两者表达均与肿瘤具体临床参数如肿瘤大小,膀胱肌层浸润情况和肿瘤分级显着相关,并具有统计学意义。2、SPAG9在体内体外实验中均能明显影响HEF1表达,体外实验中经构建稳定转染的shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞株后我们测量了相应HEF1蛋白的表达,敲除SPAG9后HEF1表达显着降低,过表达SPAG9后HEF1在mRNA水平其mRNA表达量相比为对照组3.6倍(P<0.01),Western Blot也显示敲除或过表达SPAG9能显着抑制或增强HEF1蛋白表达水平(P<0.01)。体内实验既裸鼠模型实验中,shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9稳转细胞接种并成瘤后被取出,经免疫组化染色发现转染shSPAG9后对比对照组HEF1表达明显降低,转染pcDNA3.1-SPAG9组对比对照组其HEF1蛋白表达水平显着增高(P<0.05)。3、对稳转shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞实施Transwell侵袭和迁移试验后发现敲除SPAG9能显着降低膀胱移行上皮癌细胞侵袭和迁移的能力,过表达SPAG9能反之提高肿瘤细胞的侵袭迁移能力2-3.5倍(P<0.05)。提取稳转细胞蛋白后Western Blot实验测定EMT相关蛋白显示敲除SPAG9后能降低E-cadherin表达,增强N-cadherin、Vimentin,MMP-2蛋白表达强度,过表达SPAG9后出现结果对比对照组则与上述相反(P<0.05)。4、对HEF1蛋白同样构建敲除(shHEF1)和过表达载体(pcDNA3.1-HEF1),进行Transwell侵袭和迁移实验已经Western Blot测定EMT相关蛋白表达,结果与SPAG9一致,对比对照组shHEF1能降低侵袭和迁移能力,同时提升E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin、Vimentin,MMP-2的表达水平。pcDNA3.1-HEF1则对比对照组结果与shHEF1相反(P<0.05)。此外敲除HEF1表达后,GTP-Rac1蛋白表达降低,过表达HEF1则能增强Rac1蛋白激活水平,GTP-Rac1显着增高。5、通过设计转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1,我们发现过表达HEF1能拮抗敲除SPAG9带来的侵袭和迁移抑制以及HEF1蛋白的表达降低,敲除HEF1则能降低过表达SPAG9带给细胞的恶性迁移和侵袭表型以及HEF1表达的增高(P<0.01)。6、提取shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9转染的T24和5637细胞以及裸鼠瘤体中的蛋白后我们发现shSPAG9能降低Rac1活化度(GTP-Rac1表达),pcDNA3.1-SPAG9则能提升GTP-Rac1蛋白表达,同样构建转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1后我们发现过表达HEF1能提升shSPAG9带来的GTP-Rac1表达降低,反之对比对照组敲除HEF1能降低pcDNA3.1-SPAG9造成GTP-Rac1表达增高。结论:SPAG9可以介导HEF1蛋白的表达,并通过Rac1信号通路来影响膀胱移行上皮癌EMT过程,SPAG9与HEF1具体调节机制以及具体基因结合位点等深层次机制有待研究。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01）
张英豪[3]（2019）在《Wnt1、Dickkopf-1及β-catenin的表达与膀胱移行细胞癌的复发及预后的关系》一文中研究指出背景膀胱移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma of Bladder,TCC)是最常见的泌尿系肿瘤之一,其发病率和死亡率均占泌尿系肿瘤首位,且有逐渐上升的趋势,给患者及其家庭带来了很大的烦恼和痛苦。近年来,大量文献表明:Wnt信号传导通路在膀胱移行细胞癌的膀胱癌发生、发展与高复发性中起着重要的作用。目的本研究通过研究Wnt1、Dickkopf-1及β-catenin与膀胱移行细胞癌浸润深度(分期)、分化程度(病理分级)、直径大小、复发、转移及预后的关系,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、浸润、转移、复发过程中的作用,寻找判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的肿瘤标记物,并为早期筛查及后期治疗提供理论依据和作用的靶点。方法1、收集在我院经临床确诊和病理证实为膀胱癌的病理组织60例(其中:T_(2a)期20例,T_(2b)期20例,T_3期20例)、正常膀胱组织20例,同时采集膀胱癌患者及正常人血清标本。采用Westernblot、RT-qPCR方法检测Wnt1/Dickkopf-1/β-catenin蛋白在正常膀胱组织、膀胱移行细胞癌组织以及血清中的表达量。2、分析Wnt1/Dickkopf-1/β-catenin的表达与膀胱癌发生、肌层浸润深度、病理分级、年龄、是否淋巴结转移、肿瘤直径、复发之间的关系,并分析Wnt1/Dickkopf-1/β-catenin表达的相关性。结果1、Wnt1、β-catenin mRNA及蛋白在正常膀胱粘膜组、T_(2a)组、T_(2b)组、T_3组中均有表达,膀胱肿瘤组织中Wnt1、β-catenin mRNA、蛋白表达水平明显高于正常对照组,且随着浸润深度的增加,其表达量升高,四组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。2、Dickkopf-1 mRNA及蛋白在正常膀胱粘膜组、T_(2a)组、T_(2b)组、T_3组中均有表达,膀胱肿瘤组织中Dickkopf-1 mRNA、蛋白表达水平明显低于正常对照组,且随着浸润深度的增加,其表达量降低,四组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。3、在膀胱癌组织中Wnt1、β-catenin mRNA及蛋白在男性、女性之间的表达量无明显差异(P>0.05);在≥60岁组的表达量高于<60岁组,差异有显着性(P<0.05);有淋巴结转移组的表达量高于无淋巴结转移组,差异有显着性(P<0.05);肿瘤直径≥3cm组的表达量高于肿瘤直径<3cm组,差异有显着性(P<0.05);在随访1年复发组的表达量高于无复发组,差异有显着性(P<0.05);在G_3组的表达量高于G_1~G_2组,差异有显着性(P<0.05)。4、在膀胱癌组织中Dickkopf-1 mRNA、蛋白在男性、女性之间的表达量无明显差异(P>0.05);在≥60岁组的表达量低于<60岁组,差异有显着性(P<0.05);有淋巴结转移组的表达量低于无淋巴结转移组,差异有显着性(P<0.05);肿瘤直径≥3cm组的表达量低于肿瘤直径<3cm组,差异有显着性(P<0.05);在随访1年复发组的表达量低于无复发组,差异有显着性(P<0.05);在G_3组的表达量低于G_1~G_2组,差异有显着性(P<0.05)5、膀胱癌患者血清中Wnt1、β-catenin蛋白水平高于正常对照组。差异均有统计学意义((P<0.05);Dickkopf-1蛋白水平低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。6、膀胱癌中,Wnt1和Dickkopf-1 mRNA的表达存在负相关,相关系数为:r=-0.760,P=0.000。β-catenin和Dickkopf-1 mRNA的表达存在负相关,相关系数为:r=-0.763,P=0.000。Wnt1和Dickkopf-1蛋白的表达存在负相关,相关系数为:r=-0.828,P=0.000。β-catenin和Dickkopf-1蛋白的表达存在负相关,相关系数为:r=-0.696,P=0.000。结论1、膀胱肿瘤患者膀胱组织中Wnt1、β-catenin、的表达量随着肿瘤浸润深度的增加而升高,Dickkopf-1的表达量随着肿瘤浸润深度的增加而下降,提示Wnt1、β-catenin、Dickkopf-1可能参与膀胱肿瘤的发病过程,其表达水平可能在一定程度上反应膀胱癌的恶性程度。2、Wnt1、β-catenin、Dickkopf-1的表达量与年龄、肿瘤直径、病理分级、有无淋巴结转移、复发情况相关,提示叁者的表达情况可能影响患者的预后。3、膀胱癌中Wnt1、β-catenin与Dickkopf-1的表达存在负相关,提示Dickkopf-1的表达缺失可能促进了Wnt1、β-catenin异常表达。4、膀胱癌患者血清中Wnt1、β-catenin与Dickkopf-1的表达水平可能作为一种新的肿瘤标记物,为膀胱癌的早期诊断及治疗提供依据。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-03-01）
余贵亮,文博,许祥,蒋平,黄伟旋[4]（2019）在《COX-2联合多因素在膀胱移行细胞癌中预后的研究》一文中研究指出目的:探究膀胱移行细胞癌中COX-2联合多因素对预后的影响。方法:随机抽取2004年1月-2015年1月在本院进行手术治疗的138例膀胱移行细胞癌患者为此次研究对象,对其临床资料进行回顾性分析。结果:在138例患者中,COX-2阳性率为57.25%。其中死亡组的阳性率为86.84%,生存组为46.00%。COX-2阴性平均生存时间为(81.21±4.74)个月,COX-2阳性为(42.59±3.81)个月,比较差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组和存活组发病种类、肿瘤分期和年龄比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。低危、中危、高危患者叁年生存率、五年生存率以及预后指数比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:针对膀胱移行细胞癌患者来说,检测COX-2可有效预测患者的预后,而预后危险因素包括肿瘤种类、分期以及年龄,患者的生存时间越长则预后指数越低。在临床中可根据以上因素预测其预后,同时为临床治疗提供参考。(本文来源于《中国医学创新》期刊2019年06期）
李凯,王元林,徐元高,储铸钢,徐述雄[5]（2018）在《PTEN甲基化、p53异常表达与膀胱移行细胞癌发生的相关性》一文中研究指出目的:探究PTEN甲基化、p53异常表达与膀胱移行细胞癌发生的相关性。方法:取71例膀胱移行细胞癌患者的膀胱组织作为观察组,另取71例良性前列腺增生患者的膀胱组织作为对照组。分别检查两组受试组织的PTEN基因启动子甲基化状态,应用免疫组化法检测p53蛋白的表达情况。结果:PTEN基因甲基化率观察组显着高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);组织学分级为Ⅱ～Ⅲ级和淋巴结转移阳性的患者其膀胱组织PTEN基因启动子甲基化率显着高于组织学分级为0～Ⅰ级和淋巴结转移阴性的患者,差异均有统计学意义(P <0.05);而年龄及肿瘤长径与PTEN基因启动子甲基化率无关(P> 0.05)。p53蛋白的表达阳性率观察组显着高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);年龄、肿瘤长径、组织学分级及淋巴结转移情况均与p53蛋白表达有关(P <0.05)。结论:PTEN基因启动子甲基化水平较高及p53蛋白的异常表达均与膀胱移行细胞癌的发生有较强的相关性。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2018年06期）
蒋萍,岳进巧,李静,董震宇,杨旭[6]（2018）在《高迁移率蛋白N2对人膀胱移行细胞癌及裸鼠移植瘤的影响》一文中研究指出目的研究高迁移率蛋白N2(HMGN2)对人膀胱癌细胞T24及其裸鼠移植瘤的抑制作用。方法在体外细胞水平上,用噻唑蓝(MTT)法检测加入0,3,5,7,9μg·m L~(-1)HMGN2的细胞活性,用流式细胞仪检测0,1,3,5μg·m L~(-1)HMGN2对T24细胞的抑制作用;用Western blot法检测细胞中凋亡蛋白Bcl-2、胱天蛋白酶(caspase)-3、p53及Bax的表达。体内动物水平上,建立裸鼠移植瘤模型,分为空白组、对照组和实验组,分别注射磷酸盐缓冲液(PBS)、顺铂(DDP)和HMGN2于瘤体周边。20 d后处死裸鼠,取出瘤块,用苏木精-伊红(HE)染色及原位末端标记法(TUNEL)检测各组瘤组织的坏死及调亡。结果MTT结果表明,3,5,7,9μg·m L~(-1)HMGN2抑制了T24细胞的生长,且随着HMGN2浓度的增加及孵育时间的延长抑制率明显增加。流式细胞仪检测结果表明,1,3,5μg·m L~(-1)HMGN2对T24细胞总凋亡率分别为(13. 18±0. 83)%,(25. 79±1. 22)%,(31. 48±1. 82)%,与0μg·m L~(-1)HMGN2相比,差异有统计学意义(P <0. 01)。裸鼠移植瘤实验中,瘤组织的HE染色及TUNEL检测结果表明,与空白组相比,实验组和对照组瘤组织出现明显的坏死及凋亡。结论HMGN2可能通过促进瘤组织的坏死及诱导凋亡的作用抑制了T24细胞的增殖和裸鼠移植瘤的生长。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2018年20期）
董丰铭,王文瑞,刘屹立[7]（2018）在《丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1和Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义》一文中研究指出目的探讨膀胱移行细胞癌组织中丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)和凋亡蛋白抑制因子Livin表达及临床意义。方法膀胱移行细胞癌患者46例,取手术切除癌组织46份为膀胱移行细胞癌组,癌旁正常组织10份为对照组,采用免疫组织化学法检测2组SRSF1和Livin阳性表达情况,分析SRSF1和Livin阳性表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系,Spearman秩相关分析膀胱移行细胞癌患者SRSF1和Livin阳性表达的相关性。结果膀胱移行细胞癌组SRSF1、Livin阳性表达率(80.4%、82.6%)均高于对照组(10.0%、30.0%)(P<0.05);膀胱移行细胞癌组肿瘤复发者SRSF1、Livin阳性表达率(92.6%、96.3%)高于未复发者(63.2%、63.2%)(P<0.05),SRSF1、Livin阳性表达率在肿瘤是否单发、分化程度、TNM分期上比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关分析结果显示,膀胱移行细胞癌组SRSF1和Livin阳性表达呈正相关(r=0.662,P<0.001)。结论膀胱移行细胞癌组织中Livin、SRSF1呈高表达,且与患者复发有关。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2018年09期）
汪洋,孔东波,郭宗华,杨丽[8]（2018）在《腺性膀胱炎与膀胱移行细胞癌中P21、Bcl-2蛋白的表达及其临床价值》一文中研究指出目的探讨P21、Bcl-2蛋白在正常膀胱、腺性膀胱炎(CG)以及膀胱移行细胞癌(BTCC)叁种组织中表达水平和临床价值。方法根据免疫组化法,对正常膀胱、CG以及BTCC叁种组织中P21、Bcl-2蛋白各自的表达情况进行测定。结果 (1)正常膀胱、CG以及BTCC叁种组织中P21检出的阳性率依次为0/15(0%),17/60(28.33%)和38/85(44.70%),而Bcl-2的阳性率依次为2/15(13.33%),40/60(66.67%),42/85(49.41%),均有统计学差异(P<0.05);(2)P21表达上,低级别要比高级别尿路上皮癌组显着更高,但Bcl-2阳性表达上未见统计学差异(P>0.05)。结论 CG转变为BTCC的进程中,P21、Bcl-2或可担任重要角色,作为前者演变为后者的提示指标;P21、Bcl-2检出阳性的CG患者,需做好对症治疗和加强随访。(本文来源于《湖北科技学院学报(医学版)》期刊2018年02期）
熊涛,唐顺利,李凯,孙刚,张楚龙[9]（2018）在《VEGF、PCNA、p53及Survivin与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期的关系研究》一文中研究指出目的探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因及Survivin的阳性表达率,分析其与癌组织的病理分级和临床分期的相关性。方法选择2015年1月至2017年5月经广东医科大学附属中山医院泌尿外科手术切除并经病理证实的BTCC组织石蜡标本67例(BTCC组)和正常膀胱黏膜组织标本17例(正常膀胱组),采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测其VEGF、PCNA、p53及Survivin表达,比较BTCC与正常膀胱组织、不同病理分级及不同临床分期BTCC组织中各检测指标的阳性表达差异。结果 VEGF、PCNA、p53及Survivin在正常膀胱组中的阳性表达率均为0,在BTCC组中的阳性表达率依次为67.16%、68.66%、53.73%及74.63%,差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF、PCNA、p53及Survivin在G1组中的阳性表达率依次为30.00%、25.00%、30.00%及55.00%,在G2组中的阳性表达率依次为73.33%、80.00%、53.33%及76.67%,在G3组中的阳性表达率依次为100.00%、100.00%、82.35%及94.12%,不同病理分级组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF、PCNA、p53及Survivin在Tis~T1组中的阳性表达率依次为55.10%、57.14%、40.82%及67.35%,均低于T2~T4组的100.00%、100.00%、88.89%及94.44%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VEGF、PCNA、p53及Survivin在正常膀胱黏膜组织中无阳性表达,在BTCC组织中的阳性表达率与病理分级、临床分期有关。(本文来源于《海南医学》期刊2018年03期）
张洲洲,浦金贤,俞弘颀,赵雪志,陈齐峰[10]（2017）在《PPAR-γ和PTEN蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义》一文中研究指出目的测定膀胱移行细胞癌中PPAR-γ和PTEN蛋白的表达及与其病理分级、临床分期及预后相关性。方法免疫组织化学法检测PPAR-γ和PTEN于膀胱移行细胞癌标本及正常膀胱组织中的表达程度,病理分析仪测定蛋白表达程度。结果 (1)在正常膀胱组织中PPAR-γ蛋白的表达(20%)明显低于膀胱癌(68%),而正常膀胱组织PTEN蛋白的表达(100%)明显高于膀胱癌(52%),两者阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)膀胱移行细胞癌组织中PPAR-γ表达与临床分期、病理分期、淋巴结转移呈正相关性,PTEN蛋白表达呈负相关性。(3)PPAR-γ蛋白和PTEN蛋白在膀胱移行细胞癌中表达呈负相关关系(r=-0.604,P<0.05)。结论 PPAR-γ和PTEN可能参与了膀胱肿瘤的发生发展过程,对膀胱癌诊断、临床分期及预后有一定价值。(本文来源于《中国临床保健杂志》期刊2017年05期）
膀胱移行细胞癌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究SPAG9对膀胱癌细胞侵袭和迁移等生物学行为的影响,进一步探究膀胱癌转移机制,寻找新型治疗膀胱癌的靶点。方法:1、运用实时定量PCR和免疫组化技术定量及定性测量SPAG9以及HEF1在膀胱移行上皮癌及癌旁组织中的表达情况。2、构建SPAG9和HEF1特征性沉默和过表达载体,运用RNA干扰技术转染T24和5637细胞构建稳定转染细胞株,通过Transwell迁移和侵袭实验研究不同表达状况的SPAG9/HEF1对细胞迁移侵袭能力的影响。3、构建裸鼠接种模型,研究体内实验中SPAG9的不同表达对HEF1蛋白的影响,同时运用Western Blot技术研究其外情况下SPAG9的不同表达对HEF1的干扰程度。4、查阅文献选定EMT特征蛋白,运用Western Blot分析SPAG9/HEF1不同表达情况下对相关EMT蛋白表程度的影响。5、Western Blot测定HEF1蛋白表达高低对Rac1信号通路的影响,结合复合转染补救实验决定HEF1和Rac1通路在膀胱癌细胞中的具体调节关系。6、统计临床获得标本中分类数据如年龄和肿瘤大小等指征数据与相应标本中SPAG9/HEF1表达高低的相关关系,验证SPAG9和HEF1之间的相关趋势。结果:1、通过对临床采集标本研究我们发现SPAG9和HEF1在膀胱癌中对比癌旁组织均呈现高表达,并具有显着统计学意义(P<0.005)。SPAG9高表达在所有136标本中占84例,比例为61.8%,HEF1高表达在全136例中有94例,占比69.1%。同时SPAG9和HEF1均被发现在低级别膀胱癌中过表情况比例要高于高级别膀胱癌。具体为SPAG9在低级别膀胱癌中过表达占比为88.8%(48/54)对比与高级别的63.4%(56/82),P<0.001;HEF1在低级别膀胱癌中过表达占比为83.3%(45/54)对比与高级别的68.3%(56/82),P<0.05。SPAG9和HEF1两者表达均与肿瘤具体临床参数如肿瘤大小,膀胱肌层浸润情况和肿瘤分级显着相关,并具有统计学意义。2、SPAG9在体内体外实验中均能明显影响HEF1表达,体外实验中经构建稳定转染的shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞株后我们测量了相应HEF1蛋白的表达,敲除SPAG9后HEF1表达显着降低,过表达SPAG9后HEF1在mRNA水平其mRNA表达量相比为对照组3.6倍(P<0.01),Western Blot也显示敲除或过表达SPAG9能显着抑制或增强HEF1蛋白表达水平(P<0.01)。体内实验既裸鼠模型实验中,shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9稳转细胞接种并成瘤后被取出,经免疫组化染色发现转染shSPAG9后对比对照组HEF1表达明显降低,转染pcDNA3.1-SPAG9组对比对照组其HEF1蛋白表达水平显着增高(P<0.05)。3、对稳转shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞实施Transwell侵袭和迁移试验后发现敲除SPAG9能显着降低膀胱移行上皮癌细胞侵袭和迁移的能力,过表达SPAG9能反之提高肿瘤细胞的侵袭迁移能力2-3.5倍(P<0.05)。提取稳转细胞蛋白后Western Blot实验测定EMT相关蛋白显示敲除SPAG9后能降低E-cadherin表达,增强N-cadherin、Vimentin,MMP-2蛋白表达强度,过表达SPAG9后出现结果对比对照组则与上述相反(P<0.05)。4、对HEF1蛋白同样构建敲除(shHEF1)和过表达载体(pcDNA3.1-HEF1),进行Transwell侵袭和迁移实验已经Western Blot测定EMT相关蛋白表达,结果与SPAG9一致,对比对照组shHEF1能降低侵袭和迁移能力,同时提升E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin、Vimentin,MMP-2的表达水平。pcDNA3.1-HEF1则对比对照组结果与shHEF1相反(P<0.05)。此外敲除HEF1表达后,GTP-Rac1蛋白表达降低,过表达HEF1则能增强Rac1蛋白激活水平,GTP-Rac1显着增高。5、通过设计转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1,我们发现过表达HEF1能拮抗敲除SPAG9带来的侵袭和迁移抑制以及HEF1蛋白的表达降低,敲除HEF1则能降低过表达SPAG9带给细胞的恶性迁移和侵袭表型以及HEF1表达的增高(P<0.01)。6、提取shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9转染的T24和5637细胞以及裸鼠瘤体中的蛋白后我们发现shSPAG9能降低Rac1活化度(GTP-Rac1表达),pcDNA3.1-SPAG9则能提升GTP-Rac1蛋白表达,同样构建转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1后我们发现过表达HEF1能提升shSPAG9带来的GTP-Rac1表达降低,反之对比对照组敲除HEF1能降低pcDNA3.1-SPAG9造成GTP-Rac1表达增高。结论:SPAG9可以介导HEF1蛋白的表达,并通过Rac1信号通路来影响膀胱移行上皮癌EMT过程,SPAG9与HEF1具体调节机制以及具体基因结合位点等深层次机制有待研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
膀胱移行细胞癌论文参考文献
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