诱骨活性论文_王琦,葛宝丰,殷莹,白孟海

导读:本文包含了诱骨活性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,活性,杆状,大肠杆菌,病毒,蛋白质,基因。

诱骨活性论文文献综述

王琦,葛宝丰,殷莹,白孟海[1](2004)在《人成骨蛋白-1成熟肽在大肠杆菌中的克隆、表达和诱骨活性测定》一文中研究指出目的扩增、克隆人成骨蛋白1(humanosteogenicprotein1,hOP1)成熟肽cDNA基因,并利用大肠杆菌表达hOP1成熟肽。方法PCR扩增hOP1成熟肽cDNA基因,将其克隆入受控于含有PRPL启动子的温控型大肠杆菌表达载体pDH,构建成的重组质粒pDOPm以大肠杆菌DH5α为宿主菌进行温度诱导表达,表达产物纯化和复性后,以小鼠肌袋模型检测诱骨活性。结果扩增得到hOP1成熟肽基因;含重组质粒pDOPm的工程菌经42℃诱导后在SDSPAGE上出现一条新蛋白条带,分子量约为16ku,表达量占菌体总蛋白的21%,以包涵体形式存在,经纯化和复性处理,得到纯度高于85%、具有良好异位诱导成骨活性的hOP1成熟肽。结论成功克隆出hOP1成熟肽基因,并在大肠杆菌中得到高效表达,复性后具有诱骨活性。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2004年Z3期)

范国华,林月秋,赵明,李主一[2](2003)在《重组人骨形成蛋白-2异位诱骨活性的实验研究》一文中研究指出目的 运用小鼠股部肌袋模型 ,观察重组人骨形成蛋白 - 2 (rh BMP- 2 )的异位诱骨活性。方法 将rh BMP- 2 0 .5 mg、 1 .0 mg、 1 .5 mg及人血清白蛋白 (HSA) 1 .5 mg分别植入小鼠股部肌肉 ,观察组织学成骨及测定标本内钙含量。结果 植入 rh BMP- 2 1 .0 mg及 1 .5 mg组成骨良好 ,组织钙含量高。其余组未见成骨。结论  rh BMP-2如同天然骨形成蛋白一样 ,能够在异位以软骨内化骨方式诱导成骨 ,且存在剂量依赖性与时间依赖性(本文来源于《福建医药杂志》期刊2003年04期)

卢丙仑,冯志华,刘宝林,汤苏阳[3](2002)在《体外评价抗生素对人重组骨形成蛋白-2诱骨活性的影响》一文中研究指出目的研究抗生素对骨形成蛋白诱骨活性的影响。方法以人骨髓成骨细胞为作用细胞,选用合适剂量的人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2m)为作用底物,分别加入不同浓度的替硝唑(Tinidazole,TNZ)、克拉霉素(Clarithromycin,CLM),以及二者的混合物进行体外培养,96h后观察细胞生长情况,MTT法测定细胞活力,并检测定细胞内碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALP)活性。结果(1)高剂量(≥1000μg/ml)的克拉霉素对人骨髓成骨细胞的增殖具有轻微的抑制作用,而高剂量的替硝唑则有一定的细胞毒性,较多的细胞漂浮,裂解为碎片;联合用药对细胞增殖的影响与替硝唑剂量成正比。(2)药物对碱性磷酸酶活性的影响,同细胞的增殖程度成正相关,剂量小于1000μg/ml时对酶活性无影响。结论局部应用克拉霉素和替硝唑应选用小于1000μg/ml的药物浓度为宜;两抗生素对BMP的诱骨活性并不产生直接的影响,而是由于对细胞增殖的抑制作用间接影响了碱性磷酸酶的活性。(本文来源于《中国临床康复》期刊2002年22期)

朱帮福,卢兹凡,陈苏民,蒲勤,路凡[4](2002)在《人骨形成蛋白3在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化及其诱骨活性检测》一文中研究指出为了在昆虫杆状病毒系统中表达人骨形成蛋白 3(humanbonemorphogeneticproteoin3,hBMP3) ,检测表达产物的诱骨活性 .将hBMP3全长cDNA 1416bp克隆入转移载体K8中 ,再与病毒DNA经脂质体包裹后转染昆虫细胞Sf9.重组病毒经蓝白筛选后 ,用PCR方法扩增目的基因片段进行初步鉴定 .收集重组病毒的转染上清 ,肝素亲和层析纯化目的蛋白 .SDS PAGE和Western印迹进一步鉴定此蛋白 .体外培养MC3T3 E1细胞 ,经目的蛋白刺激后 ,检测细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 .并将目的蛋白进行小鼠体内肌肉包埋实验 ,检测其异位诱骨活性 .结果显示 ,肝素亲和层析可以收集 1个高的洗脱峰 .SDS PAGE显示 ,非还原型样本为 32kD的二聚体蛋白带和少量 16kD单体蛋白带 ;还原型样本仅有相应大小的单体蛋白带 ,纯度达 80 % .Western印迹在相应位置呈阳性染色 .此蛋白刺激小鼠成纤维细胞 4 8h后 ,胞内ALP的活性增高 ,经rhBMP3作用后的细胞MTT染色减弱 .在小鼠股部肌肉内包埋蛋白样品 2~ 3周 ,组织学检测有成骨组织生成 .说明hBMP3在此套系统中获得了表达 .表达产物在体外可以刺激成骨细胞的分化 ,却抑制细胞的增殖 .小鼠体内异位诱骨实验进一步证实表达产物具有成骨活性(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2002年01期)

张斌,蒲勤,朱帮福,陈南春,陈苏民[5](2001)在《人骨形成蛋白-2C端102肽的诱骨活性》一文中研究指出为分析更短的hBMP 2C端肽是否具有诱骨活性 ,寻求新型的有诱骨活性的基因工程hBMP 2产品。利用温度诱导的大肠杆菌表达系统表达肽段长度为 10 2个氨基酸的hBMP 2C端肽及其Cys的突变体。表达产物经纯化复性后 ,植入小鼠肌袋模型中测试其诱骨活性。获得了能稳定表达hBMP 2C端肽的工程菌 ,测序结果与预期的序列完全一致。表达产物以包涵体形式存在 ,表达量占细胞总蛋白的 3 0 %。产物经纯化复性后 ,小鼠肌袋模型测试结果表明 :hBMP 2 10 2肽仍具有诱骨活性 ,而将C端第一位Cys突变的 10 2肽诱骨活性丧失。实验表明 :比hBMP 2成熟肽 ( 114个氨基酸 )更短的C端 10 2肽仍具有良好诱骨活性 ,这 10 2肽N端第一个Cys对其诱骨活性可能是必需的。(本文来源于《生物工程学报》期刊2001年06期)

卢兹凡,朱帮福,陈苏民,蒲勤,路凡[6](2001)在《人骨形成蛋白3在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化及其诱骨活性检测》一文中研究指出人骨形成蛋白(BMP)最初是作为异位诱骨分子被发现的,单独作用就可以在动物体内异位诱导成骨,在临床治疗骨缺损方面显示出广阔的应用前景.研究证实BMP不但参与成骨过程而且与胚胎多个系统的发育有关.目前BMP2、4、7的受体,胞内信号分子等都分别被克隆、发现;但有关BMP3的研究较少.现有研究表明BMP3在胚胎组织中主要分布于胚胎肾脏与肺组织,在成人的骨折愈合处也伴有高表达.说明它可能与肾脏、肺组织的发育有关,也参与骨折的愈合,具体机理有待更深入的探究.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集》期刊2001-09-01)

杨柳,胡蕴玉,吕荣,颉强[7](2001)在《RBX诱骨活性成分的分离与纯化》一文中研究指出目的 重组合异种骨 (RBX)作为一种新型植骨材料在临床治疗骨缺损、骨不连等病例中取得了显着疗效 .需进一步研究重组合异种骨中诱骨活性蛋白的相对分子质量范围 .方法 采用肝素亲和层析技术纯化 RBX中诱骨活性蛋白即骨形态发生蛋白 (BMP) ,利用小鼠肌袋实验检测其骨诱导活性 ,再用聚丙烯酰胺电泳 (SDS- PAGE)测量 RBX中诱骨活性蛋白纯化后的相对分子质量 .结果 在纯化近 2 0倍后 ,获得 8.2 3m g高度纯化的蛋白质 ,组织学观察其活性发现植入小鼠股部第 10日 ,有大量软骨细胞及软骨岛的出现 ,在局部区域还可见到条索状骨小梁出现 ,SDS- PAGE电泳发现这种蛋白质的相对分子质量为 35× 10 3,经还原后单体的相对分子质量为 2 2× 10 3.结论 重组合异种骨 (RBX)中 35× 10 3的蛋白质经还原后为 2 2× 10 3,其单独使用具有异位成骨活性 ,为 RBX的临床应用提供了理论依据 .(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2001年10期)

张斌,蒲勤,李毅,朱帮福,陈南春[8](2001)在《人骨形成蛋白2,3成熟肽削短/突变体的构建与表达及其诱骨活性》一文中研究指出0 引言 骨形成蛋白 [1 ] (bone morphogenetic proteins,BMPs)是属于 TGF-β超家族的成员 ,目前已有 18个 h BMP基因被克隆 .除 BMP- 1外 ,其他 BMPs在胚胎时期骨组织分化发育、成年骨损伤修复、(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2001年06期)

朱帮福,蒲勤,陈南春,陈苏民[9](1999)在《重组人骨形成蛋白-3成熟肽的表达、纯化及诱骨活性的研究》一文中研究指出推测人骨形成蛋白3羧基端的127氨基酸的肽段为其成熟肽(hBMP3m)。将编码此成熟肽的cDNA插入含PL启动子的表达质粒pDH中,构建表达质粒pDHB3m,转化大肠杆菌DH5α。42℃热诱导6h后表达量达到最高水平,约占菌体总蛋白28%;表达产物以包涵体形式存在。包涵体经分离和洗涤后,溶解于尿素,在变性溶解状态下经阳离子交换层析,目的蛋白纯度至少在95%以上。再经稀释复性。然后将纯化、复性的重组人骨形成蛋白3成熟肽(rhBMP3m)植入小鼠肌肉间隙,于不同时间取材观察,在局部可见典型的软骨形成、软骨内成骨以及骨组织形成的过程,证实所制备的rhBMP3m具有明显的异位诱骨活性。(本文来源于《生物工程学报》期刊1999年03期)

卢丙仑,刘宝林[10](1999)在《体外评价抗生素对人重组骨形成蛋白-2诱骨活性的影响》一文中研究指出为研究抗生素对骨形成蛋白诱骨活性的影响,以人骨髓成骨细胞为作用细胞,选用合适剂量的人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2m)为作用底物,分别加人不同浓度的替硝唑(TNZ)、克拉霉素(CLM),以及二者的混合物进行体外培养,96小时后观察细胞生长情况,MTT 法测定细胞活力,并检测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活(本文来源于《FDI、CSA临床口腔进展学术会议论文汇编》期刊1999-04-01)

诱骨活性论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的 运用小鼠股部肌袋模型 ,观察重组人骨形成蛋白 - 2 (rh BMP- 2 )的异位诱骨活性。方法 将rh BMP- 2 0 .5 mg、 1 .0 mg、 1 .5 mg及人血清白蛋白 (HSA) 1 .5 mg分别植入小鼠股部肌肉 ,观察组织学成骨及测定标本内钙含量。结果 植入 rh BMP- 2 1 .0 mg及 1 .5 mg组成骨良好 ,组织钙含量高。其余组未见成骨。结论  rh BMP-2如同天然骨形成蛋白一样 ,能够在异位以软骨内化骨方式诱导成骨 ,且存在剂量依赖性与时间依赖性

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

诱骨活性论文参考文献

[1].王琦,葛宝丰,殷莹,白孟海.人成骨蛋白-1成熟肽在大肠杆菌中的克隆、表达和诱骨活性测定[J].中国矫形外科杂志.2004

[2].范国华,林月秋,赵明,李主一.重组人骨形成蛋白-2异位诱骨活性的实验研究[J].福建医药杂志.2003

[3].卢丙仑,冯志华,刘宝林,汤苏阳.体外评价抗生素对人重组骨形成蛋白-2诱骨活性的影响[J].中国临床康复.2002

[4].朱帮福,卢兹凡,陈苏民,蒲勤,路凡.人骨形成蛋白3在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化及其诱骨活性检测[J].中国生物化学与分子生物学报.2002

[5].张斌,蒲勤,朱帮福,陈南春,陈苏民.人骨形成蛋白-2C端102肽的诱骨活性[J].生物工程学报.2001

[6].卢兹凡,朱帮福,陈苏民,蒲勤,路凡.人骨形成蛋白3在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化及其诱骨活性检测[C].中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集.2001

[7].杨柳,胡蕴玉,吕荣,颉强.RBX诱骨活性成分的分离与纯化[J].第四军医大学学报.2001

[8].张斌,蒲勤,李毅,朱帮福,陈南春.人骨形成蛋白2,3成熟肽削短/突变体的构建与表达及其诱骨活性[J].第四军医大学学报.2001

[9].朱帮福,蒲勤,陈南春,陈苏民.重组人骨形成蛋白-3成熟肽的表达、纯化及诱骨活性的研究[J].生物工程学报.1999

[10].卢丙仑,刘宝林.体外评价抗生素对人重组骨形成蛋白-2诱骨活性的影响[C].FDI、CSA临床口腔进展学术会议论文汇编.1999

论文知识图

一14.BMPI氮端肚段对BZACI和B3C体内#~一13.BMPI氮末端肤段的诱骨活性分...一23.BZACI和B3CI诱骨活性分析(x...植入7天后组织切片rhBMP_6影响C3H10T1/2细胞的碱性磷酸酶...重组质粒的酶切鉴定

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