当归延伸因子AsEF-1β基因的克隆及胁迫应答分析

当归延伸因子AsEF-1β基因的克隆及胁迫应答分析

论文摘要

延伸因子1β(EF-1β)是蛋白质生物合成过程中肽链延长必需的调节因子之一。该研究采用同源克隆和RACE扩增技术克隆当归EF-1β基因序列,分析该基因序列特征、蛋白结构特点及UV-B辐射胁迫下的组织响应表达,以揭示当归栽培生境变迁过程中对UV-B胁迫适应的分子机制。结果显示:(1)成功克隆获得当归EF-1β基因全长序列(950 bp),编码225个氨基酸,命名为AsEF-1β(GenBank登录号:MG736314);AsEF-1β蛋白的分子量为24.5 kD,理论等电点为4.48,属亲水性氨基酸,在其C末端具有一个EF-1B超蛋白家族的典型结构域和保守区,鸟嘌呤核苷酸交换结构域;其氨基酸序列与同为伞形科的胡萝卜氨基酸序列相似性最高,达93%。(2)qRT-PCR分析结果显示,AsEF-1β基因在当归根部的表达量显著高于茎和叶(P<0.05);UV-B辐射胁迫下,茎及叶中的表达量均上调,分别是自然光照处理的2.43和3.76倍。研究表明,AsEF-1β基因可能参与当归对UV-B辐射胁迫的适应过程,为深入研究其在药用植物生长发育、逆境抗性形成及药效物质的生物合成代谢过程的生态调控奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 植物材料
  •   1.2 方 法
  •     1.2.1 UV-B辐射胁迫试验
  •     1.2.2 当归总RNA提取及cDNA的合成
  •     1.2.3 AsEF-1β基因的克隆与序列生物信息学分析
  •       1) AsEF-1β核心片段克隆与测序
  •       2) cDNA末端快速扩增
  •       3) AsEF-1β基因全长cDNA克隆
  •       4) AsEF-1β基因序列生物信息学分析
  •     1.2.4 AsEF-1β基因的表达分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 AsEF-1β基因全长cDNA的克隆
  •   2.2 AsEF-1β基因的生物信息学分析
  •   2.3 多序列比对和进化树分析
  •   2.4 AsEF-1β基因的表达分析
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨彩霞,雒军,王引权,杨雪,夏琦,王振恒,张亚丽

    关键词: 当归,延伸因子,基因克隆,辐射胁迫,表达分析

    来源: 西北植物学报 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,农作物

    单位: 甘肃中医药大学

    基金: 国家自然科学基金(81660625),国家重点研发计划项目(2017YFC700705),甘肃省高校协同创新科技团队支持计划(2016C-05FF09),甘肃省中药质量与标准研究重点实验室项目(1506RTSA035)

    分类号: Q943.2;S567.239

    页码: 1371-1378

    总页数: 8

    文件大小: 6770K

    下载量: 69

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