杜锦池马顺高秦红群(云南省大理州人民医院检验科671000)
【摘要】目的探讨两种梅毒抗体检测方法在梅毒诊治中的临床价值。方法对16425例血清同时采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和酶联免疫吸附试验(ELISA-TP)进行检测。结果在16425例术前及输血前检查患者血清中,ELISA-TP检出阳性414例,阳性为2.52%;TRUST检出阳性261例,阳性率为1.59%.不同年龄组梅毒血清学检测比较有统计学意义(P<0.05)。结论TP-ELISA的敏感性和特异性均高,适合住院、门诊患者和大批量人群的梅毒筛查,结合TRUST可用于梅毒的疗效监测。在临床检验工作中应合理利用梅毒的各种检测方法,以便对梅毒的诊治提供重要的参考依据。
【关键词】梅毒检测方法ELISA-TPTRUST
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)32-0226-01
梅毒是由梅毒苍白螺旋体感染引起的一种传染性疾病,主要通过性接触、血液、母婴垂直传播,对社会危害极大。当人体感染梅毒螺旋体后,4-10周左右血清中可产生一定数量的非特异性类脂质抗体和特异性的抗梅毒螺旋体抗体。近年来,我国梅毒的感染率呈现大幅上升趋势.目前国内许多医院开展术前检查或输血前对患者进行乙肝两对半、艾滋病抗体、丙型肝炎抗体及梅毒抗体检测。本文收集我院2012年1月至2012年10月门诊及住院患者的术前及输血前检查血清标本进行调查分析,现报道如下。
1材料与方法
1.1研究对象
我院2012年1月至2012年10月门诊及住院患者的术前及输血前检查16425例,静脉抽血2-3ml及时送检。
1.2试剂
TRUST试剂盒由上海荣盛生物科技有限公司提供;ELISA-TP试剂盒由北京万泰生物药业有限公司提供。
1.3仪器
ELISA-TP法检测由瑞士帝肯全自动酶免分析仪完成,TRUST摇床为江苏康健医疗用品有限公司生产。
1.4方法
所有的标本用TP-ELISA作特异性抗体检测,TRUST作非特异性抗体检测。ELISA-TP法检测由瑞士帝肯全自动酶免分析仪完成,检测程序和结果判读标准完全按照试剂说明书规定的条件设定;TRUST试验严格按试剂说明书要求手工操作,按标准判读结果。为保证TRUST结果判读的客观性,在ELISA-TP法出结果之前完成TRUST检测。所有试剂均在有效期内使用。送检血样分离血清后36小时内检测完毕;对临床有异议的检测结果及时复查。
2结果
在16425例术前及输血前检查患者血清中,ELISA-TP检出阳性414例,阳性率为2.52%。TRUST检出阳性261例,阳性率为1.59%.
2.1用ELISA-TP与TRUST血清学检测方法分别对16425例患者进行检测,其结果见表1。
表1TRUST与ELISA-TP检测结果比较[例(%)]
2.2本调查发现不同年龄组梅毒血清学检测比较(见表1),经卡方检验,P<0.05,TRUST和ELISA-TP两种检测方法阳性率差异有统计学意义。
2.3各年龄组中以76-85岁组的阳性率最高,ELISA-TP阳性率为4.90%;TRUST阳性率为2.94%,均明显高出其他几个年龄组。
3讨论
梅毒是由梅毒螺旋体感染引起,具有高度传染性。梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器,造成多器官病变、功能失常、组织破坏甚至死亡。梅毒患者是唯一传染源,早期梅毒(病程小于两年)有较强的传染性,晚期梅毒(病程大于两年)传染性比较弱。梅毒主要通过性传播、血液传播和母要垂直传播。
20世纪60年代初得到较彻底的控制。1973年梅毒死灰复燃,卷土重来,20世纪80年代后期,国内各地先后均有早期梅毒的病例报道,以后呈直线上升,成为仅次于艾滋病对人体危害最大的性传播疾病。无偿献血者血液初筛检测中,梅毒抗体阳性率也高达2.0%.其中工人、农民、流动人口的检测阳性率为3.58%。人体感染梅毒螺旋体后,可以产生特异性梅毒螺旋体抗体和非特异性抗体即反应素,前者比后者出现得早,即使通过抗梅毒治疗后,梅毒螺旋体抗体仍可终生存。针对非特异性抗类脂质抗体的检测方法有:性病实验室研究试验、不加热血清反应素试验(USR)、TRUST和RPR等,针对特异性抗螺旋体抗体的检测方法有:TP、ELISA、TPPA、基因诊断技术梅毒螺旋体聚合酶链反应、血清荧光密螺旋体抗体吸收试验等。
梅毒的诊断主要依赖实验室检测,故梅毒检测已成为患者诊断及疗效观察的要手段。TRUST试验检查的是人体内的反应素,是一种非特异性类脂质抗体,多数学者认为人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来一种类脂成分,这种成分与梅毒螺旋体的蛋白质结合,成为抗原,刺激机体产生抗类脂质抗体即反应素。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生反应素,而其他破坏机体的过程也可产生反应素,所以梅毒患者TRUST试验阳性者并不一定感染梅毒螺旋体,如生理状态妊娠、病毒性肝炎、上呼吸道感染、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肾炎等,TRUST可以呈假阳性。因此,不能单独根据TRUST阳性诊断梅毒,要和ELISA-TP两种方法组合在一起检测梅毒可减少误诊。ELISA法是利用基因重组工程合成抗原,检测血清中梅毒特异性抗体,在梅毒各期均有较高敏感性,ELISA法也存在着假阳性问题。TRUST具有操作简单、检测时间短、可单份操作等优点;而ELISA方法适用于大批量标本的检测和全自动酶免分析系统,使操作实现自动化,标准化,规范化,用酶标仪判断结果,结果较为客观,原始数据容易保存。
表1中不同年龄患者梅毒血清学检测比较结果,两者差异有统计学意义,在各年龄段中,以76-85岁组的阳性率最高,ELISA-TP阳性率为4.90%;TRUST阳性率为2.94%,均明显高出其他几个年龄组。这些老年人当中有些后来经过临床证实确实患有梅毒,但其他老年患者除单纯血清梅毒抗体阳性外,没有任何临床症状和体征,寻问病史也找不到相关证据来支持他们正在患有梅毒,很难向患者及亲属解释,进而就会发生医患纠纷。对于老年患者血清梅毒抗体阳性率偏高现象,主要原因可能是:这些老年患者所患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体或抗TP抗体的交叉抗原,还有目前市售密螺旋体抗原试验所用的有些试验试剂盒中,没有配有吸收稀释剂,待测血清均未用吸收剂吸除与非梅毒螺旋体交又反应的抗体。基于以上分析可造成梅毒血清学试验有一定的假阳性率,高龄老人中尤为突出。
本院采用TRUST和TP-ELISA两种方法组合在一起对梅毒抗体进行广泛的筛查,能最大限度的检出各期梅毒,及早发现及早治疗,以减少梅毒的危害,控制其传播。同时可作为观察疗效、判断治愈、复发或再感染的指征,是减少错诊、误诊和漏诊的有效方法,对控制梅毒感染和减少医疗纠纷具有积极的意义.
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