（1.衡阳市第一人民医院检验科湖南衡阳421001；
2.南华大学附属第二医院急诊科湖南衡阳421001）
摘要：目的探究结核T细胞斑点试验（T-SPOT）和降钙素原（PCT）分别鉴别诊断结核性胸膜炎与细菌性胸膜炎中的应用效果。方法选取确诊为结核性胸膜炎与细菌性胸膜炎的各41例患者分别作为本次研究的结核组和细菌组。分别应用T-SPOT技术检测结核性胸膜炎以及PCT来诊断细菌性胸膜炎，比较两组的PCT值以及外周血T-SPOT技术检测结果。结果结核组和细菌组的PCT均有所升高，但细菌组的PCT值升高更明显；T-SPOT在结核性胸膜炎和细菌性胸膜炎患者的对比中，灵敏度87.80%，特异度为90.24%，准确度为89.02%。结论T-SPOT和PCT鉴别诊断结核性胸膜炎与细菌性胸膜炎中，能够准确、快速的诊断及鉴别疾病，具有较高的临床应用价值。
关键词：T-SPOT；PCT；结核性胸膜炎；细菌性胸膜炎
前言
结核属于感染性疾病，其中的结核性胸膜炎为结核疾病的第四类型，是由于结核杆菌与其自溶产物进入到患者的胸膜腔而引起的胸膜炎症，其中包含有细菌性胸膜炎，该疾病对患者的危害极大，早期无明显的临床症状，缺乏特异性，但往往发现时，已经发生了恶化，严重威胁患者的生命健康[1-2]。目前，临床上需要根据患者的积液检查、影像学进行判断，但耗时较长，准确率不高，造成患者延误治疗。找出快速、准确的诊断鉴别方法，是医务工作者严密关注的问题之一。本文采用T-SPOT和PCT鉴别诊断结核性胸膜炎与细菌性胸膜炎，效果显著，现报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取2016年11月～2017年2月期间在我院已确诊为结核性胸膜炎的41例患者作为本次研究的结核组，在这些患者中，男性患者22例，女性患者19例；年龄为15～64岁，中位年龄为（39.89±5.19）岁。选取同时期住院的41例确诊细菌性胸膜炎患者作为细菌组，在这些患者中，男性患者23例，女性患者18例；年龄为15～68岁，中位年龄为（40.20±5.18）岁。两组患者的一般资料无明显差异（P>0.05），可进行比较。
1.2方法
PCT检测采用电化学发光法。仪器为Rochecobase602全自动化学发光免疫分析仪。试剂为RochePCT电化学发光法检测试剂盒。
T-spot.TB检测试剂盒由英国OxfordImmunotec公司生产，严格遵守说明书操作。检测方法简述如下：通过RPMI1640培养液及Ficoll淋巴细胞分离液，获取血浆中的单个核细胞（PBMCs），用AIM-V培养液配置标准溶液，使PBMCs浓度为2.5×105mL-1待用。取出T-spot.TB试剂盒微孔板，在板上4个微孔依次加入50μLAIM-V培养液作为阴性对照孔，50μL植物血凝素（PHA）作为阳性对照孔，50μL结核分枝杆菌特异抗原ESAT-6作为A检测孔及50μL抗原CFP-10作为B检测孔。最后在4个微孔中各加入100μL标准溶液。微孔板放在37℃、5%CO2培养箱孵育16～20h。PBS洗板4次，加入碱性磷酸酶标记二抗。2℃～8℃孵育60min。再用PBS洗板4次，加入底物显色溶液。室温孵育7min。用蒸馏水或去离子水充分洗涤终止反应。用放大镜计数每个孔中有颜色斑点。
结果判定：①阴性对照孔点数为0～5，检测孔抗原A或抗原B斑点数减去阴性对照孔斑点数≥6，判断为阳性；②阴性对照孔斑点数≥6，检测孔抗原A或抗原B斑点数≥2倍阴性对照孔斑点数，判断为阳性。
1.3疗效判断标准
鉴别两组患者的阴阳性，采用血清PCT作定性试验，若是患者的血清PCT值<0.5ng/mL为阴性，PCT>0.5ng/mL为阳性。记录T-SPOT.TB技术检验的结果，并统计出其灵敏度、特异度以及准确度。
1.4统计学分析
采用SPSS16.0软件包分析、处理研究中的数据，使用（样本±标准差）表示正态计量数据，应用t检验分析计量数据；应用检验分析计数数据，P<0.05表示数据比较具有显著性差异。
2.结果
2.1结核组与细菌组患者PCT值对比
结核组患者中血清PCT阳性有30例，阴性11例，阳性率为73.17%；细菌组患者中血清PCT阳性有36例，阴性5例，阳性率为87.80%。结核组患者中PCT值为（0.34±0.14）ng/ml，细菌组患者中PCT值为（0.88±0.53）ng/ml。由此可以看出，细菌组与结核组相比，PCT阳性率更高且定量数值升高更明显，差异具有统计学意义（P<0.05）。
2.3外周血T-SPOT技术检测结果
结核组患者采用T-SPOT技术进行检测，检测出36例患者为阳性，阳性率为87.80%；
T-SPOT对结核组的鉴别诊断灵敏度为87.80%，特异度为90.24%，准确度为89.02%。
T-SPOT结核组细菌组
阳性364
阴性537
3.讨论
结核性胸膜炎在临床疾病中具有较高的发病率，研究表明，全世界每年均有900万左右肺结核疾病患者的增加，且近年来呈现出上升的趋势。该疾病是由于结核杆菌侵犯胸膜所致，在结核病中，结核性胸膜炎是常见的肺外表现之一，最主要的表现为胸腔积液形成[3]。对于该疾病，其早期的临床表现并不明显，需要通过检测才能够进行进一步判断，而早期的诊断与治疗能够让患者的疗效达到理想的效果，因此，对于结核性胸膜炎患者应积极的进行诊断和治疗，控制病情恶化[4]。目前，结核性胸膜炎的诊断方法主要有培养法、病理活检、影像学检查、PCR检测、抗酸染色法、结核菌素皮试等[5]。传统检验中，常用病理活检作为确诊手段，但许多患者不能够接受；而影像学的诊断准确率较低。本文结核组采用T-SPOT检验，细菌组则采用PCT值水平诊断，其中T-SPOT检验是一种新型免疫性方法，具有很高的准确性；而PCT常用于细菌性胸膜炎的检测，可根据PCT值的升高作为判断依据。目前，T-SPOT检验与PCT值水平已被广泛应用于结核性胸膜炎与细菌性胸膜炎的检测中。
本研究中，对41例结核性胸膜炎、41例细菌性胸膜炎的患者分别进行对比检验，结果发现2组患者的血清PCT均有升高，其中细菌组患者的PCT值明显升高，可作为细菌性胸膜炎参考依据。而结核组采用T-SPOTB技术检验，对比细菌组其灵敏度、特异度、准确度均较高，可作为结核性胸膜炎的鉴别依据。可见T-SPOT.TB检验以及PCT值的辅助检测，可使结核性胸膜炎患者得到快速、安全、灵敏的诊断，对后续治疗提供重要依据，具有应用价值。
参考文献
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