一、新生儿使用青霉素1220例免试临床观察与分析（论文文献综述）
张晓艳[1]（2017）在《PQBP1突变导致Renpenning综合征的分子病理机制研究》文中指出Renpenning综合征是一类X染色体连锁的智力发育障碍疾病（X-linked intellectual disability,XLID）,该疾病主要由位于X染色体的多聚谷氨酰胺结合蛋白 1（Polyglutamine binding protein 1,PQBP1）基因突变所致。Renpenning 综合征在不同家族的患者中存在多种突变形式,这些患者大多具有智力发育迟缓、小头畸形、身材消瘦矮小以及小睾丸等症状,同时在不同家族间的临床分析表征也存在着差异性。然而,目前人们对PQBP1不同位点突变致病的机理尚不清楚。因此,本论文以人源的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y、原代培养的小鼠海马神经元细胞以及果蝇的神经肌肉接头系统（Neuromuscular junction,NMJ）为研究模型,综合利用遗传学、生物化学、细胞生物学、电生理技术等方法,揭示Renpenning综合征患者中最为常见的三种PQBP1 4号外显子处移码突变（c.461462delAG,c.459462delAGAG,c.463<sub>464dupAG）对细胞功能和突触发育的影响,解析这些突变致病的分子机理。PQBP1这三类移码突变均会导致截短形式的PQBP1蛋白形成。首先我们检测了不同截短蛋白分别与脆性X智力迟滞蛋白（Fragile X mental retardation protein,FMRP）的结合能力和相互作用的结构域。体外蛋白结合实验表明PQBP1基因c.459<sub>462delAGAG和c.463<sub>464dupAG突变都会编码一段序列相同的独特C末端基序直接结合FMRP蛋白的RGG结构域,而c.461462delAG突变不会编码上述基序并且突变蛋白不与FMRP相互作用。FMRP的RGG结构域中包含一个保守的磷酸化位点,以维持该蛋白在体内磷酸化和非磷酸化状态的动态平衡。通过进一步分析发现,PQBP1-delAGAG和dupAG突变蛋白易于结合非磷酸化状态的FMRP,促进FMRP进入泛素降解途径。该过程最终影响FMRP的蛋白水平和的正常功能:在细胞层面表现为FMRP的靶标分子MAP1B蛋白表达上调;扰乱原代培养的小鼠海马神经元中FMRP依赖的突触稳态可塑性。为了在整体动物水平研究PQBP1基因突变后对突触发育的影响,我们选取果蝇NMJ为研究模型,构建c.463<sub>464dupAG突变的转基因果蝇。通过免疫染色证实PQBP1-dupAG蛋白的在体表达会导致突触过度生长,并且这些缺陷可被外源表达在NMJ中的dFMRP所恢复。我们的研究揭示了 PQBP1 c.459<sub>462delAGAG和c.463<sub>464dupAG突变蛋白产生获得性功能进而导致Renpenning综合征的全新分子致病机制,为治疗Renpenning综合征提供了新的线索。同时,我们的研究为阐明Renpenning综合征与脆性X综合征的病理学相关性提供了直接证据,这些发现将重塑我们对X连锁智力发育障碍疾病治疗策略的思考。
李莹[2]（2017）在《MicroRNA-210通过直接靶向PDK1诱导动脉粥样硬化内皮细胞凋亡》文中提出背景:动脉粥样硬化是一种炎症性疾病,是导致心血管疾病的主要原因,因为含高饱和脂肪的饮食盛行,目前该疾病仍然是一个全球性问题。在大动脉中,致动脉粥样化的脂蛋白,特别是低密度脂蛋白,积累逐渐形成动脉粥样硬化斑块,与动脉粥样硬化疾病的发病密切相关。载脂蛋白E（Apo E）是一种34k Da的分泌蛋白,已被证明具有抗动脉粥样硬化活性:它直接作用于动脉中丰富的脂蛋白,能够有效地去除它们。Apo E（-/-）小鼠的研究证实了Apo E在保护动脉粥样硬化中的关键作用。Apo E（-/-）小鼠喂食高脂肪饮食（HFD）显示高脂质水平,高胆固醇水平以及动脉粥样硬化症状,使其成为研究动脉粥样硬化的公认模型。内皮作为调节血管系统的有效介质,在止血,调节胆固醇,激素运输,信号转导和炎症等过程中发挥作用。证据表明内皮功能障碍与各种血管疾病,包括糖尿病,动脉血栓形成和高胆固醇血症相关。内皮细胞凋亡和死亡可以破坏斑块的结构,并导致局部脂质的沉积,并最终形成动脉粥样硬化。预防内皮细胞凋亡已经作为治疗动脉粥样硬化的新手段受到越来越多的关注。微小RNA（mi RNA）是一类内源性非编码单链RNA,其长度为18-22个核苷酸,通过与其靶基因的的3’非翻译区（3’-UTR）结合降解和/或翻译抑制基因表达。越来越多的证据表明mi RNA可以是复杂人类疾病的有效治疗靶点,包括肿瘤发生,淋巴细胞生成和血管生成。虽然大多数mi RNA研究仍集中在癌症,mi RNA在心血管系统中的作用已经逐渐显现。动脉粥样硬化是心血管疾病的主要危险因素。内皮细胞功能障碍经常引发一系列导致动脉粥样硬化发展的变化。动脉粥样硬化斑块由泡沫细胞中的累积脂质颗粒,增殖的血管平滑肌细胞（VSMC）和细胞外基质组成。这些斑块是动脉中晚期动脉粥样硬化病变的标志。临床前研究表明,mi RNA在动脉粥样硬化的发病机制中起关键作用。最近的一项研究显示mi R-210在动脉硬化闭塞症患者的血清中过表达,且mi R-210在人动脉粥样硬化斑块中上调,并且可能参与动脉粥样硬化的过程。然而,mi R-210在动脉粥样硬化中的调节机制仍不清楚。方法:在Apo E（-/-）小鼠中构建具有由高脂肪饮食（HFD）诱导的动脉粥样硬化的小鼠模型。通过流式细胞术及Western blot检测CD31+内皮细胞凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2,caspase-9和caspase-3的表达水平来测定内皮细胞凋亡的水平。通过RT-q PCR和western印迹测量小鼠主动脉的纯化CD31+内皮细胞中mi R-210和PDK1的表达。使用生物信息学分析预测mi R-210和PDK1 m RNA的3’非翻译区（UTR）之间的结合,并用双荧光素酶报告基因测定法证实。在用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理的人主动脉内皮细胞（HAEC）的体外模型中进一步分析mi R-210的促细胞凋亡的作用途径。结果:（1）HFD小鼠在12周内发生动脉粥样硬化,流式细胞术测定及Western blot检测均证实HFD组较NOR组内皮细胞凋亡显着升高。（2）HFD小鼠和体外细胞实验中经ox-LDL处理的HAEC中mi R-210的上调水平与PDK1的水平呈负相关,生物信息学分析确定PDK1作为mi R-210的靶标。（3）MTT和流式细胞术实验的结果显示mi R-210模拟物促进ox-LDL诱导的HAEC凋亡,PDK1的过表达可逆转mi R-210促凋亡的作用。（4）体外细胞实验显示mi R-210抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活而促进细胞凋亡发生,而这条通路可被PDK1转染重新激活,提示mi R-210系通过靶向PDK1抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活而发挥其促进细胞凋亡作用。结论:我们的研究表明了mi R-210在动脉粥样硬化中促进内皮细胞凋亡,导致动脉粥样硬化进展,且mi R-210是通过作用于PDK1从而抑制PI3K/Akt/m TOR信号传导通路发挥促凋亡作用。这表明mi R-210可能是治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。
张欣宇[3]（2015）在《复合益生菌微生态添加剂的培养条件优化及功效评价》文中研究说明微生态制剂是由调理微生态失调，保持微生态平衡，改善健康状态的益生菌及其代谢产物和促进物质加工制成的添加剂。微生态制剂能够在数量或种类上补充肠道内所缺乏的正常微生物，可以调整或维持肠道内微生态平衡，增强免疫功能，促进营养物质的消化吸收等。本研究通过对培养基成分，开菲尔和芽孢杆菌的接种比例，接种量，培养温度和培养时间进行优化，确定了复合益生菌微生态添加剂最佳培养的条件；在最佳培养条件的基础上，对混合培养后发酵产物进行了部分生理活性的研究。（1）以活菌数为评价指标，通过单因素试验对高密度培养基、脱脂乳培养基和大豆分离蛋白培养基的成分进行了优化。高密度培养基：选用乳清粉和葡萄糖作为碳源，二者的最佳比例为乳清粉：葡萄糖=2:1；选用浓缩乳清蛋白和脱脂乳作为氮源，二者的最佳比例为浓缩乳清蛋白：脱脂乳=2:3。最终确定的高密度培养基的成分组成为（/L）：乳清粉：54g，葡萄糖：27g，浓缩乳清蛋白粉20g，脱脂乳粉：30g，酵母粉7.63g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.03g，碳酸钙6.20g。脱脂乳培养基：10%（w/v）脱脂乳，3%（w/v）葡萄糖。大豆分离蛋白培养基：10%（w/v）大豆分离蛋白，3%（w/v）低聚果糖。（2）通过单因素试验和正交优化实验，确定了复合益生菌微生态添加剂最佳培养条件，即：开菲尔与芽孢杆菌的接种比例为2:1，接种量为4%，培养温度28℃和培养时间20h。在该培养条件下，产品中的活菌总数含量较高，乳酸菌为6.14×1010，酵母菌为6.80×109，芽孢杆菌为3.78×1010，活菌总数为1.06×1011。（3）对复合益生菌微生态添加剂进行了降解胆固醇的评价，并对体系产生的胞外多糖进行了测定。结果表明：在降解胆固醇的实验中，高密度，脱脂乳和大豆蛋白混合体系的胆固醇去除率分别为61.82%，58.11%和52.21%；三种混合体系均产生胞外多糖，以大豆蛋白混合体系产生的多糖最多，达到691.54mg/L，高密度混合体系和脱脂乳体系产生的多糖分别为514.16mg/L和216.54mg/L。（4）对复合益生菌微生态添加剂的抑菌性能进行了测定，并对体系产生的蛋白酶活力进行了测定。结果表明：在对致病菌的抑制实验中，三种混合体系对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌均有着一定的抑制作用；高密度培养基，脱脂乳培养基和大豆分离蛋白培养基的蛋白酶活力分别为205.54u/mL，125.35u/mL和146.24u/mL。（5）研究了复合益生菌微生态添加剂的免疫活性。实验结果表明，复合益生菌微生态添加剂可以提高免疫器官指数，同时能够增强脾淋巴细胞的增殖能力，并对巨噬细胞的吞噬能力具有一定的促进作用，还可以提高NK细胞的细胞毒活性，具有一定的免疫活性。
张庆[4]（2014）在《肺炎克雷伯菌致脓毒症中医临床特征分析》文中指出背景：脓毒症是明确的感染加上全身炎症反应综合症,随着耐药菌株的出现,现代的研究多是对疾病总体的认识,而对常见的个体致病菌的认识较少,对致病菌的认识似中医的病因认识,那么不同的细菌导致的脓毒症又有什么其独特的临床特征呢,本观察将分析由肺炎克雷伯杆菌导致脓毒症患者的中医临床特征。目的：通过对临床肺炎克雷伯菌感染,肺炎克雷伯菌感染致脓毒症的中医证候、症状、年龄、性别、生活习性、基础疾病、感染部位等临床特征分析,得出肺炎克雷伯菌致脓毒症病因病机的演变规律及临床特征,指导预防、治疗。方法：对东直门医院、北京中医医院、天津中医医院、山东中医院、河南中医医院、北京友谊医院6家三甲医院符合纳入、排除标准的123例临床病例资料调查分析,采用SPSS17.0软件包进行描述统计,计数资料采用卡方检验。分析出肺炎克雷伯菌感染的临床特征,肺炎克雷伯菌致脓毒症的临床特征,死亡患者的临床特征,并得出肺炎克雷伯菌致脓毒症患者的临床特征,如中医病因病机,病机演变等。结果：中医方面：肺炎克雷伯菌感染临床表现的发热、气促、舌红或绛、脉数或疾为主,说明肺炎克雷伯菌是热邪,脓毒症实证中以痰浊、血瘀、热邪为主,虚证以气虚、阴虚、阳虚等证候为主。死亡患者以气虚、瘀血等证候为主。脓毒症患者,死亡者都可用热邪的致病特点来解释临床表现。肺炎克雷伯菌感染特征：共收集123例患者,老年患者为肺炎克雷伯杆菌感染的主要对象,其中大于70岁的老年患者又是老年患者中的主要群体,占构成比的52.8%,男性患者较女性患者感染率高,占构成比的65.04%。吸烟患者较不吸烟患者感染率高,且吸烟患者发生肺部感染率的机率最高。肺炎克雷伯菌感染患者以BMI正常者多见,占50%。在感染患者中存在高血压病、脑卒中、糖尿病、冠心病这些基础病的患者居多。脓毒症特征：123例肺炎克雷伯杆菌感染的患者中46例发展为脓毒症,其发病率为37.4%。诊断为脓毒症的患者中以心率增快合并呼吸急促组合出现频率最高。大于70岁的感染者发展为脓毒症的发病率较高,为65.2%,占死亡构成比的85.7%。男性感染者致脓毒症的发病率为41.25%,较女性高,死亡人数亦较女性多。肺炎克雷伯杆菌致脓毒症患者感染部位主要以肺部为主,占构成比的37.4%。肺部感染发展为脓毒症发病率为40.0%。在7例死亡患者中肺部感染所占构成比57.1%,肺部感染死亡率为66.7%。7例死亡患者有吸烟史占构成比的85.7%。脓毒症患者中以肥胖患者的发病率较高。临床上基础病合并越多病情越复杂,治愈率越小。结论：1.肺炎克雷伯菌感染属温病范畴,热邪贯穿其感染到脓毒症到死亡的整个过程,但热邪的致病特点在整个病程中又导致机体气血阴阳的变化,使得病因病机复杂化,证候多样化。2.肺炎克雷伯菌致脓毒症发病率高,死亡率高,都以老年男性、吸烟患者、合并基础病多、肺部的感染患者居多。
徐瑞鑫[5]（2013）在《冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT的机制研究》文中进行了进一步梳理目的：建立冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的大鼠模型并阐明其中枢5-HT机制。方法：1.大鼠冲突性心理应激模型的复制采用Vogel`s饮水冲突模型的改良方法,复制大鼠冲突性心理应激模型,并对造模后大鼠体质量、血清皮质酮浓度、以及在旷场迷宫中的行为学参数进行测定,进而确定冲突性心理应激模型复制成功的标准。2.冲突性心理应激大鼠睡眠时相和睡眠节律的变化采用大鼠皮层脑电描记技术,通过对大鼠脑电（EEG）和肌电（EMG）的监测,来考察冲突性心理应激对大鼠睡眠时相和睡眠节律的影响。3.冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT机制3.1冲突性心理应激大鼠中枢不同脑区睡眠相关神经递质含量的变化运用酶联免疫吸附法对冲突性心理应激大鼠睡眠和应激相关脑区（下丘脑、杏仁核和中缝核）5-HT、色氨酸羟化酶（TPH）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量进行测定,并推算出5-HIAA/5-HT的比值。3.2腹腔注射五羟色胺酸（5-HTP）对冲突性心理应激大鼠睡眠时相的影响给大鼠腹腔注射5-HT合成的前体物质5-羟色氨酸（5-HTP）,通过对大鼠EEG和EMG的监测,考察5-HTP对冲突性心理应激大鼠睡眠时相和睡眠节律的影响。3.3冲突性心理应激大鼠外周血清中色氨酸浓度的变化采用高效液相色谱法测定冲突性心理应激大鼠外周血中色氨酸的浓度。3.4腹腔注射舍曲林对冲突性心理应激大鼠睡眠结构的影响考察神经突触前膜5-HT回吸收的抑制剂舍曲林对冲突性心理应激大鼠睡眠时相和睡眠节律的影响。3.5冲突性心理应激大鼠杏仁核部位S1c6a4基因和Htr1a基因表达的变化应用定量PCR技术考察冲突性心理应激对大鼠杏仁核部位5-HT转运体编码基因（S1c6a4）和5-HT1A受体编码基因（Htr1a）表达的影响。结果：1.大鼠冲突性心理应激模型的复制与空白组相比,模型组大鼠造模7d后,血清中CORT浓度显着升高（P<0.05）,体质量显着性减少（P<0.05）,在旷场迷宫中穿格数、直立次数和理毛次数明显减少（P<0.05）,而排便次数显着增加（P<0.05）。2.冲突性心理应激大鼠的睡眠时相和睡眠节律的变化与空白组相比,模型组大鼠睡眠的LS、SWS、REM以及睡眠总时间都有不同程度的减少（P<0.05）,除REM外其他各期所占睡眠总时间的比例均有不同程度的变化（P<0.05）,且每个睡眠时相持续时间明显缩短,睡眠时相间的切换十分频繁,睡眠趋于零散化。3.冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT机制3.1冲突性心理应激大鼠中枢不同脑区睡眠相关神经递质含量的变化造模后大鼠中缝核部位、杏仁核部位以及下丘脑区的5-HT浓度显着降低（P<0.05）。中缝核部位和杏仁核部位的TPH浓度显着降低（P<0.05）,TPH在下丘脑部位虽然有下降的趋势,但是与空白组相比无显着性差异（P>0.05）。模型组大鼠杏仁核部位和下丘脑部位的5-HIAA浓度显着降低（P<0.05）,中缝核部位虽然有下降的趋势,但是和空白组相比无显着性差异（P>0.05）。由5-HIAA/5-HT的比值可以看出,模型组大鼠中缝核部位5-HIAA/5-HT的比值显着降低（P<0.05）,而杏仁核部位和下丘脑区5-HIAA/5-HT的比值虽然有下降的趋势,但是与空白组相比,无显着性差异（P>0.05）。3.2腹腔注射五羟色胺酸（5-HTP）对冲突性心理应激大鼠睡眠时相的影响相对于模型组,5-HTP组大鼠睡眠总时间、LS、SWS和REM睡眠持续时间均显着延长（P<0.05）,5-HTP组大鼠LS所占的比例显着减小（P<0.05）,而SWS所占的比例显着增加（P<0.05）,REM所占的比例基本不变（P>0.05）。且5-HTP组大鼠各个睡眠单元持续时间显着地延长,各睡眠时相之间的切换次数也有所减少,睡眠相对连续、集中。3.3冲突性心理应激大鼠外周血清中色氨酸浓度的变化与空白组相比,冲突性心理应激大鼠血清中的色氨酸水平明显降低（P<0.05）3.4腹腔注射舍曲林对冲突性心理应激大鼠睡眠结构的影响与模型组相比,舍曲林组大鼠睡眠总时间、LS、SWS和REM睡眠持续时间均显着延长（P<0.05）,LS所占的比例显着减小（P<0.05）,而SWS所占的比例显着增加（P<0.05）,REM所占的比例与模型组大鼠相比变化不明显（P>0.05）,大鼠的各个睡眠单元持续时间显着延长,各睡眠时相之间的切换次数也有所减少,睡眠趋于相对连续、集中。3.5冲突性心理应激大鼠杏仁核部位S1c6a4基因和Htr1a基因表达的变化与空白组相比,冲突性心理应激模型大鼠杏仁核部位的S1c6a4基因的表达明显升高,而杏仁核部位的Htr1a基因的表达量则有所降低。结论：冲突性心理应激对大鼠睡眠时相和睡眠节律造成显着影响,其影响的作用机制与降低中枢部分脑区5-HT的浓度和5-HT能神经系统的兴奋性、减少中枢5-HT的合成,促进神经突触间隙5-HT的回吸收以及减少突触后膜5-HT1A受体有关。
李楠[6]（2013）在《苍柏湿毒清治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）的临床观察及对小鼠阴道解脲支原体定植干预的免疫机制研究》文中研究说明目的1观察中药复方苍柏湿毒清治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）的临床疗效。2观察中药复方苍柏湿毒清干预BALB/C小鼠建立阴道感染UU动物模型效果。3从BALB/c（?）小鼠血IL-2水平、阴道黏膜组织IL-12和LTC4水平、阴道黏膜组织C3b受体表达方面探讨中药复方苍柏湿毒清治疗解脲支原体泌尿生殖道感染的可能免疫调节机制。方法本课题研究分两部分进行：1临床研究采用随机双盲对照的研究方法,将苍柏湿毒清颗粒和热淋清颗粒加工成外包装一样的制剂统一编盲,入选支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）患者按就诊先后顺序随机发药。治疗期间,患者均服用中药颗粒剂每次一袋,每日两次,疗程两周。用药前、用药2周后记录中医证候积分；用药前、用药2周后、停药1周、3周检测阴道pH值、宫颈分泌物白细胞计数、支原体培养,最终以判断疗效,实验结束后统一揭盲。2实验研究70只BALB/c（?）小鼠随机分为A1-1组10只、A1-2组10只、B1组10只、A2-1组10只、A2-2组10只、B2组10只、C组10只。2.1实验一2.1.1A1-1组、A1-2组经过中药苍柏湿毒清低剂量、高剂量干预7天后,B1组无干预7天后,分别对三组BALB/c小鼠建立阴道感染UU动物模型4周实验结束后取各组小鼠阴道分泌物进行UU培养,计算UU定植成功率,观察中药干预后解脲支原体定植情况。2.1.2中药苍柏湿毒清对建立阴道感染UU动物模型干预的免疫机制研究。①采用ELISA法,在实验结束后检测三组BALB/c小鼠血白介素-2（IL-2）值。②采用ELISA （?）去,在实验结束后检测三组BALB/c小鼠阴道黏膜组织白介素-12（IL-12）和白三烯C4（LTC4）含量。③采用免疫组织化学技术对三组BALB/c小鼠阴道粘膜C3b受体进行染色,选择有意义的组织相,应用计算机图像处理系统后期处理,每例测5个视野,由计算机计算出所测阳性反应物相对含量的灰度‘值及面积即平均光密度（MOD）。2.2实验二2.2.1A2-1组、A2-2组、B2组BALB/c小鼠先建立阴道感染UU动物模型4周,其后A2-1组、A2-2组经过中药苍柏湿毒清低剂量、高剂量干预7天,B2组无中药干预7天,实验结束后取各组小鼠阴道分泌物进行UU培养,计算UU定植成功率,观察中药干预后解脲支原体定植情况。2.2.2中药苍柏湿毒清对BALB/c小鼠阴道感染UU动物模型干预的免疫机制的研究。①采用ELISA法,在实验结束后检测三组BALB/c小鼠血IL-2。②采用ELISA法,在实验结束后检测三组BALB/c小鼠阴道黏膜组织IL-12和LTC4含量。③采用免疫组织化学技术对三组BALB/c小鼠阴道粘膜C3b受体进行染色,选择有意义的组织相,应用计算机图像处理系统后期处理,每例测5个视野,由计算机计算出所测阳性反应物相对含量的灰度值及面积即平均光密度（MOD）2.3C组为空白组,不进入实验一、二,实验一、二结束后与其他六组同时取阴道分泌物进行UU培养及各项指标检测。结果1临床研究1.1观察支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）患者66例,苍柏湿毒清组33例患者中14例痊愈,6例显效,5例进步,8例无效,愈显率60.6%；热淋清组33例患者中8例痊愈,4例显效,6例进步,15例无效,愈显率36.4%。苍柏湿毒清组在治疗支原体性宫颈炎方面愈显率（60.6%）高于热淋清组（36.4%）,两组有显着性差异（P<0.05）。苍柏湿毒清组在治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）疗效优于热淋清组。1.2苍柏湿毒清组治疗后患者阴道pH值逐步下降,并趋于正常水平,热淋清组治疗后患者阴道pH值有所下降,并未达到正常值。苍柏湿毒清组在改善阴道pH值方面优于热淋清组。1.3治疗后,两组患者宫颈分泌物白细胞计数均较治疗前极显着性下降（P<0.01）,苍柏湿毒清组治疗后比热淋清组白细胞计数下降更明显。苍柏湿毒清组在降低宫颈分泌物白细胞计数方面优于热淋清组。1.4治疗后,两组患者中医证候评分较治疗前显着性下降（P<0.05）,苍柏湿毒清组比热淋清组下降更明显（P.<0.05）。苍柏湿毒清组在中医证候改善方面优于热淋清组。2实验研究2.1UU血清4型致病性实验二,29只BALB/c小鼠建立阴道感染UU动物模型结束后,对A2-1组、A2-2组、B2组BALB/c小鼠用无菌男用拭子取阴道分泌物,UU培养结果均为阳性,阳性定植率100%,提示UU血清4型可致BALB/c小鼠阴道感染。2.2成功建立了BALB/c小鼠阴道感染UU的动物模型对BALB/c小鼠采用颈部皮下注射雌二醇注射液0.2mg,每周一次,共四周；在第二次注射雌二醇注射液（即第二周）后,每天用无菌输液软管向BALB/c小鼠阴道注入预先制备的UU标准株菌液2O μ1（105CCU/ml）,连续注入三天；此方法成功建立了BALB/c小鼠阴道感染UU的动物模型。2.3实验质控条件良好C组实验入组时、结束时UU阳性率均为0%,提示实验质控条件良好。2.4UU定植成功率实验一、二结束时,对A1-1组、A1-2组、B1组、A2-1组、A2-2组、B2组、C组BALB/c小鼠阴道分泌物进行UU培养,UU感染阳性率分别是70.00%（7/10）、66.67%（6/9）、90%（9/10）、66.67%（6/9）、70.00%（7/10）、100%（10/10）、0%（0/10）。实验一A1-1组、A1-2组小鼠经过苍柏湿毒清干预,部分实验小鼠阴道UU定植阴性。实验二A2-1组、A2-2组成功建立阴道感染UU的动物模型后,经过苍柏湿毒清干预,部分实验小鼠阴道感染UU转阴。但经统计学分析,六组组间UU阳性定植率比较,统计学上无显着性差异（P>0.05）。2.5血IL-2实验一、二结束时,七组BALB/c小鼠血IL-2值由高到低依次是A1-1组（54.16±1.52）、A1-2组（51.86±1.51）、A2-1组（45.33±1.82）、A2-2组（44.45±2.75）、C组（44.02±2.14）、B1组（41.29±1.35）、B2组（35.40±1.78）。B1组、B2组BALB/c小鼠建立阴道感染UU动物模型血IL-2值低于C组（空白组）,统计学上,有显着性差异（P<0.05）,提示UU感染后BALB/c小鼠血IL-2值呈低水平实验一A1-1组、A1-2组小鼠经过苍柏湿毒清干预后再建立动物模型,可提高血IL-2值；统计学上,与C组、B1组均有显着性差异（P<0.05）。提示苍柏湿毒清可提高小鼠血IL-2水平,在防UU感染中发挥重要作用。实验A2-1组、A2-2组成功建立阴道感染UU的动物模型后经过苍柏湿毒清干预,提示苍柏湿毒清可提高UU感染小鼠血IL-2的低水平,统计学上,与B2组有显着性差异（P<0.05）,与C组无显着性差异（P>0.05）,在抗UU感染中发挥重要作用。苍柏湿毒清提高小鼠血IL-2水平,增加TH1细胞,激活或调动体液免疫功能,从而在防UU感染和抗UU感染中发挥重要作用。2.6阴道黏膜组织IL-12实验一、二结束时,七组BALB／c小鼠阴道黏膜组织IL-12由高到低依次是B2组（19.37±14.22）、B1组（18.41±13.23）、A2-2组（12.52±3.96）、A2-1组（12.06±4.92）、A1-1组（9.32±2.88）、C组（9.21±5.92）、A1-2组（7.52±3.25）。B1组、B2组BALB／c小鼠建立阴道感染UU动物模型阴道黏膜组织IL-12值高于C组（空白组）,统计学上,有显着性差异（P<0.05）,提示UU感染后阴道黏膜组织IL-12值呈高水平。实验一A1-1组、A1-2组小鼠经过苍柏湿毒清干预后再建立动物模型,可降低阴道黏膜组织IL-12值；统计学上,与B1组有显着性差异（P<0.05）,与C组无显着性差异（P>0.05）。提示苍柏湿毒清可降低阴道黏膜组织IL-12水平,在防UU感染中发挥重要作用。实验二A2-1组、A2-2组成功建立阴道感染UU的动物模型后经过苍柏湿毒清干预,可降低阴道黏膜组织IL-12值,统计学上,与B2组、C组无显着性差异（P>0.05）,提示苍柏湿毒清降低UU感染小鼠阴道黏膜组织IL-12的高水平作用不显着。苍柏湿毒清降低小鼠阴道黏膜组织IL-12水平,在防UU感染中发挥重要作用,在抗UU感染中作用不显着。2.7阴道黏膜组织LTC4实验一、二结束时,七组BALB／c小鼠阴道黏膜组织LTC4由高到低依次是B2组（485.61±387.36）、B1组（399.88±297.61）、A2-1组（288.54±113.48）、A2-2组（244.91±52.65）、A1-1组（198.90±54.36）、C组（172.71±75.44）、A1-2组（162.77±66.84）。B1组、B2组BALB／c（?）小建立阴道感染UU动物模型阴道黏膜组织LTC4值高于C组（空白组）,统计学上,有显着性差异（P<0.05）,提示UU感染后阴道黏膜组织LTC4值呈高水平。实验一A1-1组、A1-2组小鼠经过苍柏湿毒清干预后再建立动物模型,可降低阴道黏膜组织LTC4值；统计学上,与B1组有显着性差异（P<0.05）,与C组无显着性差异（P>0.05）。提示苍柏湿毒清可降低阴道黏膜组织LTC4水平,在防UU感染中发挥重要作用。实验二A2-1组、A2-2组成功建立阴道感染UU的动物模型后经过苍柏湿毒清干预,可降低阴道黏膜组织LTC4值,统计学上,与B2组有显着性差异（P<0.05）,与C组无显着性差异（P>0.05）,提示苍柏湿毒清降低UU感染小鼠阴道黏膜组织LTC4的高水平,在抗UU感染中发挥重要作用。苍柏湿毒清降低阴道黏膜组织LTC4的水平,可控制血管通透性,减少炎症渗出,保持阴道粘膜屏障完整,可大大减少UU入侵途径,从而在防UU感染和抗UU感染中发挥重要作用。2.8BALB/c小鼠阴道黏膜组织C3b受体实验一、二结束时,七组BALB/c小鼠阴道黏膜组织C3b受体平均光密度（MOD）,结果：A1-1组（0.038±0.013）、A1-2组（0.045±0.087）、A2-1组（0.039±0.011）、A2-2组（0.042±0.009）、B1组（0.041±0.009）、B2组（0.042±0.012）、C组（0.042±0.010）,七组BALB/c（?）小鼠阴道黏膜组织C3b受体平均光密度差异不显着（P>0.05）,提示苍柏湿毒清可能不是通过调节C3b受体起到免疫调节作用。结论中药复方苍柏湿毒清在治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）疗效优于热淋清颗粒,苍柏湿毒清能够有效地降低阴道pH值,并趋向正常,减少宫颈分泌物白细胞计数,以保持局部黏膜完整；中药复方苍柏湿毒清有明显地改善全身及局部症状的作用,具有较强抗支原体的作用。经过苍柏湿毒清干预,部分实验小鼠阴道uu定植阴性；成功建立阴道感染uu的动物模型后,经过苍柏湿毒清干预,部分实验小鼠阴道感染uu转阴。苍柏湿毒清能够提高小鼠血IL-2,降低小鼠降低阴道黏膜组织IL-12,降低小鼠阴道黏膜组织LTC4,可能不是通过调节小鼠阴道黏膜组织C3b受体起到免疫调节作用,该方在防uu感染和抗uu感染中发挥重要作用。本课题创新点是首次从小鼠血IL-2、阴道黏膜组织IL-12和LTC4、阴道黏膜组织C3b受体水平探讨中药复方苍柏湿毒清在防uu感染和抗uu感染两方面的免疫调节机制。
周静[7]（2013）在《逆针灸三阴交穴对去卵巢大鼠HPO轴影响的实验研究》文中认为目的：围绝经期是女性衰老过程中必经的重要时期,此时期机体肾气衰退,天癸渐竭,如女性不能适应这个阶段身体的生理变化,将会导致一系列心理及躯体症状,即围绝经期综合征（PMS）。近年来,由于工作、生活环境压力增加及人口的老龄化趋势等多因素的影响,PMS发病年龄呈提前趋势,发病率呈上升趋势。早期预防、早期治疗可以减轻或防止女性围绝经期症状的发生,减缓组织器官的衰老,对于围绝经期综合征的防治具有重要意义。“逆针灸”是在无病时或疾病发生之前,通过预先针灸刺激的方法激发机体的经络之气,提高机体自身的抗病潜能,防止疾病的产生或减轻随后疾病对机体造成的损伤。其具有良性应激原的特点,它不向机体补充外源性物质,而是通过启动自身的内源性保护机制来提高机体的抗病能力,对临床中多种疾病的防治均具有良好的疗效,因此在预防医学领域显现出广阔的前景。方法：本实验选取去卵巢大鼠模型做为观察对象,采用逆针灸的治疗方法,通过观察逆针灸三阴交穴对去卵巢大鼠血清及HPO轴中关键激素及其受体的影响,系统地阐释逆针灸对HPO轴的调控作用机制,进而初步阐明针灸预刺激防治围绝经期综合征的作用机制,为发展针灸疗法在临床治疗女性围绝经期综合征提供了科学的理论和实验依据。实验结果：1.与正常组比较,模型组子宫E2的含量显着降低（P<0.01）,垂体及血清FSH、LH的含量显着升高（P<0.01）,下丘脑及血清GnRH的含量显着降低（P<0.01）；与模型组比较,逆针及逆灸均能不同程度的提高去卵巢大鼠子宫E2的水平,降低垂体及血清FSH、LH的水平,升高下丘脑及血清GnRH的水平（P<0.01,P<0.05）。2.与正常组比较,模型组子宫及下丘脑ER的含量显着降低（P<0.01）；与模型组比较,逆针及逆灸均能显着提高去卵巢大鼠子宫及下丘脑ER的水平（P<0.01,P<0.05）。3.各指标在逆针组及逆灸组组间虽有一定的区别,但组间比较无明显差异（P>0.05）。结论：1.逆针灸三阴交穴可以直接或间接的促进雌激素的合成,在一定程度上缓解去卵巢后机体的低雌激素状态,对HPO轴的功能紊乱具有减缓、抵抗的保护作用。2.逆针灸三阴交穴可以通过调节雌激素受体的水平,提高雌激素的生物学效应,从而起到保护雌激素相应靶器官的作用。3.逆针法与逆灸法对HPO轴的调节功能基本相同。
鲁俊山[8]（2012）在《补肾中药联合BMP-2对人脐血间充质干细胞体外增殖及成骨活性影响的实验研究》文中研究指明目的：建立人脐血间充质干细胞（UCB-MSCs）的体外分离培养体系,观察体外分离培养UCB-MSCs的生物学特性及补肾中药血清联合BMP-2对体外培养UCB-MSCs增殖、碱性磷酸酶（ALP）及骨钙素（BGP）表达的影响,探讨其对UCB-MSCs向成骨细胞分化的诱导作用。方法：取18只SD大鼠,补肾中药连续灌胃7天,颈总动脉取血制备补肾中药血清,采集人脐血标本,密度梯度离心法分离UCB-MSCs,倒置相差显微镜下观察原代培养的UCB-MSCs生物学特性,并经流式细胞仪进行细胞鉴定。取第3代UCB-MSCs随机分为4组,即A组（对照组）、B组（5%补肾中药血清组）、C组（50ng/mlBMP-2组）、D组（5%补肾中药血清+50ng/mlBMP-2组）。分别于诱导第1、3、5d MTT法观察各组对UCB-MSCs增殖的影响；第3、6、9、12d通过ALP染色及活性检测、骨钙素（BGP）含量检测观察补肾中药血清联合BMP-2对UCB-MSCs成骨活性表达的影响。结果：①原代培养的UCB-MSCs呈圆形,原代培养72h仅见少量贴壁细胞,近似圆形或椭圆形,7d首次换液可见分散的MSCs小集落,呈放射状生长。2周时细胞形态呈长梭形,3周时细胞集落彼此融合。传代细胞大部分24h内贴壁,一般3d即可达到80%-90%融合,细胞排列紧密,形态较均一,以梭形为主。②诱导培养第3、5d时,与对照组相比,补肾中药血清联合BMP-2组、BMP-2组均能够促进UCB-MSCs的增殖（P<0.05）,尤以补肾中药血清联合BMP-2组为最佳（P<0.01）；第5天补肾中药血清联合BMP-2组与BMP-2组相比差异有统计学意义（P=0.041<0.05）,而单独补肾中药血清组与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。③各诱导组第7dALP染色阳性表达较弱,第14dALP染色阳性增强,但各组强弱不等,其中对照组阳性表达较弱,补肾中药血清联合BMP-2组及BMP-2组较为显着,而联合组阳性表达最优,第21d染色阳性表达有所减弱。④与对照组比较,补肾中药血清联合BMP-2组、BMP-2组在诱导后3、6、9、12d均能提高ALP活性（P<0.05）,其中补肾中药血清联合BMP-2组在诱导后3、6、9dALP活性与对照组相比有显着性差异（P<0.01）；补肾中药血清联合BMP-2组在诱导第6d时ALP活性与BMP-2组比较,差异有统计学意义（P=0.011<0.05）。⑤与对照组比较,BMP-2组、补肾中药血清联合BMP-2组在诱导后6、9、12d均能提高细胞上清液中骨钙素（BGP）含量,差异有统计学意义（P<0.05）。其中,补肾中药血清联合BMP-2组在诱导第9d时BGP含量与对照组比较差异有显着性意义（P=0.004<0.01）。结论：基于“肾主骨、生髓”理论的补肾中药血清联合BMP-2体外诱导人脐血间充质干细胞定向成骨分化的方法有效可行,二者能明显促进UCB-MSCs增殖与定向成骨分化,而单纯补肾中药血清此作用并不显着。
谢兰[9]（2010）在《用于精子筛选及体外受精的微流控芯片的构建及应用》文中进行了进一步梳理过去三十年来,体外受精技术被广泛应用于解决人类不孕不育问题。在获得实践成功与技术突破的同时,该领域仍有一些问题亟待解决,包括:目前临床上使用上游法来挑选有活力的精子进行后续操作,而忽略了化学趋向性、温度趋向性等其他衡量精子健康的重要指标;体外受精的环境以及胚胎培养的条件与体内相差甚远,且人工操作的复杂性可能对胚胎产生不利的影响。微流控芯片技术为解决这些问题提供了新的解决思路和途径,我们的工作主要是通过构建不同的微流控芯片,来解决三个方面的问题:1)优化了用以筛选精子活力的直管道的长度、宽度、深度以及筛选时间,通过对不同尺寸管道出口池的精子活力与精子相对数量两项指标进行比较,我们发现长7 mm、宽1 mm、深100μm的管道对小鼠精子具有最好的活力筛选效果,最优的筛选时间在15-30 min之间。2)设计并制作了一款微器件,使用直管道连接双分叉管道来模拟女性生殖道,用以同时筛选精子的活力和化学趋向反应。通过有选择性地将卵丘细胞种植在双分叉管道的其中一侧来形成化学梯度,用游向不同分叉管道的精子数量比例来表征精子的化学趋向性。我们的试验证实约有10%的小鼠精子具有化学趋向能力,这一比例和以往的研究相一致。3)设计和制作了一款体外受精微器件,可以将精子活力筛选、卵细胞定位、体外受精、换液、早期胚胎培养、胚胎追踪和原位染色等各个方面集成起来。我们利用4×4的八柱定位单元来定位小鼠卵细胞,四条以卵细胞定位区域对称分布的直管道来实现精子活力筛选与快速换液。每个受精卵的受精和发育情况可以通过显微镜进行实时追踪和原位荧光染色观察。通过四管道筛选以后的小鼠精子活力由60.8±3.4%提高到96.1±1.9%,通过和常规80μl微液滴体外受精组对比,我们发现两组的胚胎生长速度和囊胚形成率类似（p>0.1）。总之,本工作所构建的精子活力和化学趋向性筛选芯片可以同时对精子的活力与化学趋向反应能力进行评估,筛选出的健康精子可以很容易被整合到未来的“体外受精-芯片实验室”上;构建的体外受精芯片则为人类体外受精和动物胚胎制备提供了一个集成的平台,可以减少手工操作造成的对细胞的不利影响。
刘迎春[10]（2007）在《成年绒山羊皮肤干细胞的分离、纯化、鉴定与诱导》文中研究指明本研究旨在建立绒山羊皮肤干细胞的分离、纯化培养体系,并对其特性和分化潜能进行进一步探讨,以便为今后利用皮肤干细胞进行绒山羊毛囊的定向调控提供科学的理论依据。选择健康成年绒山羊背部皮样,经中性蛋白酶4℃消化过夜,分离表皮和毛囊,用胰酶消化后解离细胞,再用IV型胶原粘附法对消化细胞进行筛选分离,经IV型胶原粘附10min的绒山羊皮肤干细胞直径较小,核质比较大,培养过程中能够形成鸟巢状、岛状和铺路石状等不同形状的细胞克隆,而且在传代的过程中,大多数细胞始终维持在G1/G0期,各代克隆形成率也比较高,部分细胞表达K15、K19、p63、CD34和β1-integrin,这些结果表明IV型胶原粘附筛选的细胞中包含有干细胞。在此基础上,进一步选择生长状态良好的IV型胶原粘附后的第二代皮肤细胞作为克隆纯化的对象细胞,利用96孔板有限稀释法获得了形态较为原始,直径约为10μm的单细胞,经传代培养,该细胞能够形成典型的全克隆;而且,随传代次数增加,大多数细胞仍处于G1/G0期,保持着干细胞的慢周期性,有较高的克隆形成率,始终具有较大的增殖潜能和克隆遗传力;各代细胞冷冻复苏率与24小时贴壁率差异不显着（p<0.05）;大多数细胞的K15、K19、p63、CD34和β1-integrin等表面标志鉴定结果均呈阳性,分化标志K10和Involucrin检测结果呈阴性。在体外诱导实验中,这些纯化的干细胞能够被诱导生成神经元、神经胶质细胞、心肌细胞和成骨细胞,具有跨胚层分化潜能。以上结果充分证明了纯化的细胞就是绒山羊皮肤干细胞。此外,通过β1-integrin和CD34的FISH初步定位了绒山羊皮肤干细胞。其中,β1-integrin主要表达于绒山羊皮肤毛囊的外根鞘和毛乳头尖部,而CD34则主要表达于毛囊的外根鞘、毛乳头尖部和皮肤的基底层。
二、新生儿使用青霉素1220例免试临床观察与分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、新生儿使用青霉素1220例免试临床观察与分析（论文提纲范文）
（1）PQBP1突变导致Renpenning综合征的分子病理机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 前言 |
| 1.1 PQBP1分子的研究概述 |
| 1.1.1 Renpenning综合征与PQBP1基因 |
| 1.1.2 PQBP1的发现和蛋白结构 |
| 1.1.3 PQBP1的功能研究 |
| 1.1.4 PQBP1分子的研究展望 |
| 1.2 FMRP分子的研究概述 |
| 1.2.1 脆性X综合征和FMR1基因 |
| 1.2.2 FMRP的发现和蛋白结构 |
| 1.2.3 FMRP的功能研究 |
| 1.2.4 FMRP的翻译后修饰 |
| 1.3 本研究拟解决的问题 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 分子生物学部分 |
| 2.1 质粒的构建 |
| 2.1.1 PCR酶切法构建质粒 |
| 2.1.2 点突变法构建质粒 |
| 2.2 RNA的提取、cDNA合成及Real-time RT-PCR |
| 2.2.1 RNA的提取 |
| 2.2.2 cDNA合成 |
| 2.2.3 Real-time RT-PCR |
| 2.3 融合蛋白的表达和纯化 |
| 2.3.1 诱导GST融合蛋白的表达 |
| 2.3.2 GST融合蛋白的纯化 |
| 2.3.3 诱导MBP融合蛋白的表达 |
| 2.3.4 MBP融合蛋白的纯化 |
| 2.4 GST pull-down检测蛋白间相互作用 |
| 2.4.1 融合蛋白浓度的测定 |
| 2.4.2 GST pull-down |
| 2.5 抗体的制备 |
| 2.6 蛋白提取和Western blotting免疫印迹 |
| 2.6.1 细胞总蛋白的提取 |
| 2.6.2 Western blotting免疫印迹 |
| 2.7 蛋白间竞争性结合实验 |
| 2.8 RNA结合实验 |
| 2.9 泛素化分析 |
| 2.9.1 细胞转染后泛素化分析 |
| 2.9.2 体外表达蛋白泛素化分析 |
| 细胞生物学部分 |
| 2.10 细胞培养 |
| 2.10.1 SH-SY5Y细胞的培养 |
| 2.10.2 小鼠神经元细胞的原代培养 |
| 2.11 细胞转染 |
| 2.12 细胞的多肽处理 |
| 2.13 细胞免疫荧光染色 |
| 2.14 电生理记录 |
| 果蝇遗传学部分 |
| 2.15 果蝇品系 |
| 2.16 转基因果蝇的制备 |
| 2.17 果蝇的饲养 |
| 2.18 NMJ成像分析 |
| 2.18.1 解剖果蝇幼虫 |
| 2.18.2 NMJ免疫荧光染色 |
| 2.19 果蝇whole head免疫荧光染色 |
| 附表 |
| 第三章 实验结果与讨论 |
| 3.1 PQBP1与FMRP的直接相互作用在物种间高度保守 |
| 3.1.1 PQBP1与FMRP存在直接且保守的相互作用 |
| 3.1.2 PQBP1通过C末端结构直接结合FMRP |
| 3.2 PQBP1-dupAG突变产生的全新C末端基序可直接结合FMRP |
| 3.2.1 Renpenning综合征病人中PQBP1移码突变导致氨基酸序列改变 |
| 3.2.2 PQBP1-delAGAG和PQBP1-dupAG突变蛋白可结合FMRP |
| 3.2.3 PQBP1-dupAG、PQBP1-delAGAG突变蛋白C末端结构具有全新的FMRP结合基序 |
| 3.3 PQBP1-dupAG偏好结合非磷酸化状态的FMRP |
| 3.3.1 PQBP1-WT和PQBP1-dupAG均结合于FMRP的RGG结构域 |
| 3.3.2 PQBP1-WT、PQBP1-dupAG与FMRP的相互作用影响RGG功能 |
| 3.3.3 PQBP1-dupAG与FMRP的结合亲和力高于PQBP1-WT |
| 3.3.4 PQBP1-dupAG偏好结合非磷酸化的FMRP |
| 3.4 PQBP1-dupAG通过泛素降解途径下调FMRP蛋白水平 |
| 3.4.1 PQBP1-dupAG下调FMRP的蛋白水平 |
| 3.4.2 PQBP1-dupAG的C末端基序直接下调FMRP的蛋白水平 |
| 3.4.3 PQBP1-dupAG导致FMRP的多聚泛素化增加 |
| 3.5 PQBP1-dupAG可减弱FMRP对MAP1B的翻译抑制作用 |
| 3.6 PQBP1-dupAG扰乱海马神经元中FMRP依赖的突触稳态可塑性 |
| 3.6.1 PQBP1-dupAG-C多肽持续降低细胞中FMRP的蛋白水平 |
| 3.6.2 PQBP1-dupAG-C多肽扰乱神经元中药物诱导的synaptic scaling |
| 3.7 果蝇NMJ中表达PQBP1-dupAG导致突触过度生长 |
| 3.7.1 PQBP1-WT和PQBP1-dupAG转基因果蝇的获得 |
| 3.7.2 PQBP1-dupAG下调果蝇内源dFMRP的蛋白水平 |
| 3.7.3 果蝇中PQBP1-dupAG的表达会影响dFMRP依赖的突触生长 |
| 3.8 果蝇LNv中表达PQBP1-dupAG导致神经元异常分支 |
| 3.9 结论 |
| 3.10 讨论 |
| 3.10.1 PQBP1移码突变后产生获得性功能进而导致Renpenning综合征的病理机制 |
| 3.10.2 PQBP1-dupAG与FMRP共同参与相关疾病的发生过程 |
| 3.10.3 研究XLID疾病的相关动物模型 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）MicroRNA-210通过直接靶向PDK1诱导动脉粥样硬化内皮细胞凋亡（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1 动脉粥样硬化的发病机制 |
| 1.1 动脉粥样硬化危险因素 |
| 1.2 敏感性 |
| 1.3 动脉粥样硬化的细胞组分 |
| 1.4 动脉粥样硬化斑块的特征 |
| 2 Micro RNA与动脉粥样硬化 |
| 2.1 内皮细胞中mi RNA |
| 2.2 调节血管平滑肌细胞的mi RNA |
| 2.3 巨噬细胞中的mi RNA |
| 2.4 Micro RNA在动脉粥样硬化小鼠中的应用 |
| 2.5 Micro RNA在人类动脉粥样硬化研究中的应用 |
| 3 动脉粥样硬化模型 |
| 3.1 小鼠模型 |
| 3.2 兔模型 |
| 3.3 猪模型 |
| 3.4 犬模型 |
| 3.5 非人灵长类动物模型 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 动物来源 |
| 2.1.4 细胞 |
| 2.1.5 试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物模型 |
| 2.2.2 HE染色 |
| 2.2.3 油红染色 |
| 2.2.4 细胞的培养与传代 |
| 2.2.5 MTT实验检测细胞活力 |
| 2.2.6 Western blot方法检测蛋白表达 |
| 2.2.7 细胞转染试验 |
| 2.2.8 细胞凋亡检测 |
| 2.2.9 RNA分离和定量RT-PCR |
| 2.2.10 荧光素酶报告基因测定 |
| 2.2.11 统计分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 HFD诱导Ap OE（-/-）小鼠的动脉粥样硬化模型的建立 |
| 3.2 HFD诱导Ap OE（-/-）小鼠内皮细胞凋亡 |
| 3.3 mi R-210 和PDK1在动脉粥样硬化Apo E（-/-）小鼠和OX-LDL处理的内皮细胞中负相关 |
| 3.3.1 mi R-210 和PDK1在动脉粥样硬化Apo E（-/-）小鼠内皮细胞中表达呈负相关 |
| 3.3.2 mi R-210 和PDK1在ox-LDL处理的内皮细胞中表达呈负相关 |
| 3.4 确定PDK1为mi R-210 的靶位点 |
| 3.5 mi R-210 通过靶向PDK1促进内皮细胞凋亡 |
| 3.6 mi R-210 在动脉粥样硬化中通过靶向PDK1来抑制PI3K /AKT/m TOR信号传导活化 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）复合益生菌微生态添加剂的培养条件优化及功效评价（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 微生态制剂的定义 |
| 1.2 微生态制剂的种类 |
| 1.2.1 按微生态制剂的成分划分 |
| 1.2.2 按微生物种类划分 |
| 1.3 微生态制剂的作用机理 |
| 1.3.1 微生物优势种群理论 |
| 1.3.2 生物屏障理论 |
| 1.3.3 生物夺氧理论 |
| 1.3.4 “三流循环”理论 |
| 1.3.5 产生多种有益代谢产物 |
| 1.4 微生态制剂的应用 |
| 1.4.1 临床应用 |
| 1.4.2 畜禽生产和水产养殖中的应用 |
| 1.5 影响微生态制剂效果的因素 |
| 1.5.1 菌种的生理特点 |
| 1.5.2 宿主自身的因素 |
| 1.5.3 加工工艺和储藏条件 |
| 1.5.4 产品的形式和使用方法 |
| 1.6 微生态制剂存在的问题 |
| 1.6.1 菌种单一 |
| 1.6.2 活性不稳定 |
| 1.6.3 产品缺乏统一的质量标准 |
| 1.7 微生态制剂的发展前景 |
| 1.8 本课题的研究意义与内容 |
| 1.8.1 研究意义 |
| 1.8.2 研究内容 |
| 第2章 复合益生菌微生态添加剂培养条件的优化 |
| 2.1 试验材料与设备 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 芽孢杆菌的活化 |
| 2.2.2 开菲尔粒的活化 |
| 2.2.3 培养基成分的优化 |
| 2.2.4 混合培养条件的优化 |
| 2.2.5 微生物指标的测定 |
| 2.2.6 pH 值的测定 |
| 2.2.7 粘度的测定 |
| 2.2.8 光密度的测定 |
| 2.2.9 数据处理 |
| 2.3 实验结果与分析 |
| 2.3.1 高密度培养基成分的确定 |
| 2.3.2 单一氮源培养基成分的确定 |
| 2.3.3 开菲尔与芽孢杆菌接种比例对混合培养的影响 |
| 2.3.4 接种量对混合培养的影响 |
| 2.3.5 培养温度对混合培养的影响 |
| 2.3.6 培养时间对混合培养的影响 |
| 2.3.7 复合益生菌微生态添加剂最适培养条件参数的确定 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 复合益生菌微生态添加剂降解胆固醇和抑菌性能的研究 |
| 3.1 实验材料与设备 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 样品的制备 |
| 3.2.2 胞外多糖含量的测定 |
| 3.2.3 体外降解胆固醇能力的测定 |
| 3.2.4 蛋白酶活力的测定 |
| 3.2.5 抑菌能力的测定 |
| 3.2.6 数据处理 |
| 3.3 实验结果与分析 |
| 3.3.1 胞外多糖含量测定结果 |
| 3.3.2 体外降解胆固醇能力测定结果 |
| 3.3.3 蛋白酶活力测定结果 |
| 3.3.4 抑菌能力测定结果 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 复合益生菌微生态添加剂的免疫活性 |
| 4.1 实验材料与设备 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验设备 |
| 4.1.4 实验动物 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 实验分组 |
| 4.2.2 免疫器官指数的测定 |
| 4.2.3 小鼠脾淋巴细胞增值实验 |
| 4.2.4 腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定 |
| 4.2.5 NK 细胞毒活性的测定 |
| 4.2.6 数据处理 |
| 4.3 实验结果与讨论 |
| 4.3.1 复合益生菌微生态添加剂对小鼠免疫器官指数的影响 |
| 4.3.2 复合益生菌微生态添加剂对小鼠脾淋巴细胞增值的影响 |
| 4.3.3 复合益生菌微生态添加剂对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 4.3.4 复合益生菌微生态添加剂对 NK 细胞毒活性的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 结论 |
| 5.1 全文结论 |
| 5.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及科研成果 |
| 攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
（4）肺炎克雷伯菌致脓毒症中医临床特征分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要英文缩略词表 |
| 综述一 肺炎克雷伯菌 |
| 1 克雷伯氏菌简介 |
| 2 肺炎克雷伯菌易感因素和感染现状 |
| 3 肺炎克雷伯杆菌耐药机制 |
| 4 中医对肺炎克雷伯菌感染的认识和研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 脓毒症 |
| 一 脓毒症的研究进展 |
| 1 脓毒症的流行病学 |
| 2 概念及诊断 |
| 2.1 感染 |
| 2.2 全身炎症反应综合征 |
| 2.3 脓毒症 |
| 2.4 严重脓毒症 |
| 2.5 脓毒症休克 |
| 2.6 多器官功能障碍综合症 |
| 2.7 拯救脓毒症全球运动 |
| 3 脓毒症的病理生理机制总括 |
| 3.1 炎症失衡及免疫功能紊乱 |
| 3.2 神经内分泌免疫网络 |
| 3.3 低血压与氧弥散和氧利用障碍 |
| 3.4 心肌抑制 |
| 3.5 内皮细胞受损 |
| 3.6 凝血功能障碍及微血栓形成 |
| 3.7 高代谢和营养不良 |
| 3.8 受体与信号转导异常 |
| 3.9 基因多态性差异 |
| 4 脓毒症的西医治疗进展 |
| 4.1 集束化治疗 |
| 4.2 干细胞疗法 |
| 4.3 胸腺肽 |
| 4.4 血栓调节蛋白 |
| 4.5 一氧化碳释放分子2 |
| 4.6 左西孟坦 |
| 二 脓毒症的中医治疗现状 |
| 1 病因病机 |
| 2 中医治疗 |
| 2.1 各家学说 |
| 2.2 各家医院治疗方案 |
| 2.3 中药方剂对脓毒治疗研究进展 |
| 2.4 单味中药治疗脓毒症研究 |
| 文献参考 |
| 前言 |
| 临床资料 |
| 1 研究对象 |
| 2 病例纳入、排除标准 |
| 2.1 纳入标准 |
| 2.2 排除标准 |
| 3 西医诊断标准 |
| 4 中医诊断标准 |
| 分析结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 文献参考 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT的机制研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 现代应激学说 |
| 1.1 应激的概念 |
| 1.2 应激的类型和分类 |
| 1.3 应激发生的机制 |
| 1.4 心理应激的机制 |
| 1.5 心理应激的造模方法 |
| 2 心理性应激所致睡眠障碍的研究现状与进展 |
| 2.1 现代生物学对睡眠的认识 |
| 2.2 心理应激对睡眠的影响 |
| 3 5-HT在应激-睡眠中的调节作用 |
| 3.1 5-HT生物代谢过程 |
| 3.2 5-HT在体内的分布 |
| 3.3 5-HT在心理应激中的作用 |
| 3.4 5-HT在睡眠中的作用 |
| 4 科学假说与研究思路 |
| 5 技术路线 |
| 实验部分 |
| 第一部分 冲突性心理应激大鼠模型的复制 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验指标的观察与测定 |
| 5 实验结果 |
| 6 小结 |
| 第二部分 冲突性心理应激大鼠的睡眠时相和睡眠节律的变化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 第三部分 冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT机制 |
| 一、冲突性心理应激大鼠中枢不同脑区睡眠相关神经递质含量的变化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 二、腹腔注射五羟色胺酸(5-HTP)对冲突性心理应激大鼠睡眠时相的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 三、冲突性心理应激大鼠外周血清中色氨酸浓度的变化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 四、腹腔注射舍曲林对冲突性心理应激大鼠睡眠结构的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 五、冲突性心理应激大鼠杏仁核S1c6a4基因和Htrla基因表达的变化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验条件 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 讨论 |
| 展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
| 附录 |
（6）苍柏湿毒清治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）的临床观察及对小鼠阴道解脲支原体定植干预的免疫机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药治疗女性生殖道解脲支原体感染的研究进展 |
| 1. 古代医家对女性生殖道解脲支原体感染病因病机的认识 |
| 1.1 带下病的病因病机 |
| 1.2 阴痒的病因病机 |
| 2. 当代中医对女性生殖道解脲支原体感染病因病机的认识 |
| 2.1 湿热毒邪 |
| 2.2 湿邪为患,气血不和 |
| 2.3 虫蚀阴内 |
| 2.4 正气亏虚 |
| 3. 古代医家对女性生殖道解脲支原体感染的治疗 |
| 3.1 带下病 |
| 3.2 阴痒 |
| 4. 现代中医对女性生殖道解脲支原体感染的治疗 |
| 4.1 辨证分型论治 |
| 4.2 中药治疗女性生殖道解脲支原体感染的临床研究 |
| 4.3 中西结合治疗女性生殖道解脲支原体感染的临床研究 |
| 5. 中药实验研究 |
| 5.1 体外抑菌实验 |
| 5.2 中药动物实验 |
| 参考文献 |
| 综述二 解脲支原体的研究进展 |
| 1. 解脲支原体生物学特性 |
| 2. 解脲支原体分群分型 |
| 3. 解脲支原体的致病性 |
| 3.1 解脲支原体是女性生殖道正常寄生菌群之一 |
| 3.2 解脲支原体致病性与分群分型 |
| 3.3 解脲支原体致病性与特定的数量、特定的浓度 |
| 4. 解脲支原体致病机制 |
| 4.1 解脲支原体的毒力 |
| 4.2 解脲支原体的发病机制 |
| 5. 解脲支原体耐药性 |
| 6. 解脲支原体检测方法 |
| 6.1 形态学检测-超高倍显微镜法 |
| 6.2 培养法 |
| 6.2.1 液体培养法 |
| 6.2.2 固体培养法 |
| 6.3 免疫学方法 |
| 6.3.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
| 6.3.2 免疫结合试验 |
| 6.3.3 免疫荧光法 |
| 6.4 分子生物学方法 |
| 6.4.1 DNA探针技术 |
| 6.4.2 聚合酶链反应(PCR) |
| 6.4.3 荧光定量PCR |
| 6.4.4 连接酶链反应(LCR) |
| 6.5 表面等离子体共振(SPR)生物传感器快速检测 |
| 7. 解脲支原体生殖道感染流行病学调查 |
| 参考文献 |
| 综述三 解脲支原体感染动物模型的研究进展 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 接种方法 |
| 2.1 膀胱内接种 |
| 2.2 官腔内接种 |
| 2.3 输卵管局部接种 |
| 2.4 阴道内接种 |
| 3. 解脲支原体感染动物模型 |
| 3.1 肺部感染的模型 |
| 3.2 解脲支原体宫内感染动物模型 |
| 3.3 解脲支原体泌尿生殖道感染动物模型 |
| 3.3.1 大鼠、小鼠模型的建立 |
| 3.3.2 新西兰白兔模型建立 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 苍柏湿毒清治疗支原体性宫颈炎(气虚湿毒证)的临床观察 |
| 1. 前言 |
| 2. 临床资料 |
| 3. 病例选择 |
| 3.1 诊断标准 |
| 3.1.1 西医诊断标准 |
| 3.1.2 气虚湿毒证中医证候诊断标准 |
| 3.2 纳入标准 |
| 3.3 排除标准 |
| 3.4 剔除标准和脱落标准 |
| 4. 研究方法 |
| 4.1 研究药物 |
| 4.2 随机分组 |
| 4.3 相关检测指标 |
| 4.3.1 阴道pH值检测 |
| 4.3.2 支原体培养+药物敏感试验 |
| 4.3.3 宫颈分泌物白细胞计数 |
| 4.3.4 中医证候积分 |
| 5. 疗效判断标准 |
| 6. 统计方法 |
| 7. 研究结果 |
| 7.1 两组治疗前后阴道pH变化的情况 |
| 7.2 两组患者治疗前后宫颈分泌物白细胞计数检测结果分析 |
| 7.3 两组患者治疗前后中医证候评分比较 |
| 7.4 两组患者临床疗效比较 |
| 8. 结论 |
| 9. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 苍柏湿毒清对小鼠阴道解脲支原体定植干预的免疫机制研究 |
| 研究背景 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 1.5 实验药物 |
| 1.6 培养繁殖UU标准株 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4 技术路线 |
| 5. 结果 |
| 5.1 一般情况 |
| 5.2 BALB/c小鼠阴道感染UU定植率 |
| 5.3 采用ELISA法检测BALB/c小鼠血IL-2 |
| 5.4 根据BCA法测定样品中阴道黏膜总蛋白的浓度 |
| 5.5 采用ELISA法检测BALB/c小鼠阴道黏膜组织IL-12 |
| 5.6 采用ELISA法检测BALB/c小鼠阴道黏膜组织LTC-4 |
| 5.7 采用免疫组化检测BALB/c小鼠阴道黏膜组织C3b受体的表达 |
| 6. 结论 |
| 7. 讨论 |
| 8. 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）逆针灸三阴交穴对去卵巢大鼠HPO轴影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 针灸防治围绝经期综合征的机理研究进展 |
| 1. 围绝经期综合征的发病机制 |
| 1.1 神经-内分泌-免疫网络学说 |
| 1.2 自由基学说 |
| 1.3 血管舒张因子的影响 |
| 1.4 细胞凋亡学说 |
| 1.5 其他 |
| 2. 针灸防治围绝经期综合征的基础研究 |
| 2.1 调节内分泌系统功能 |
| 2.2 调节神经系统功能 |
| 2.3 调节免疫系统功能 |
| 2.4 调节自由基及抗氧化因子 |
| 2.5 调控细胞凋亡 |
| 3. 三阴交穴在围绝经期综合征中的应用 |
| 4. 总结 |
| 综述二 逆针灸的研究概述 |
| 1. 逆针灸的中医学理论基础 |
| 1.1 逆针灸的思想渊源—“治未病”思想 |
| 1.2 逆针灸的古代文献记载 |
| 2. 逆针灸的现代理论研究进展 |
| 2.1 现代应激理论 |
| 2.2 针灸的良性预应激假说 |
| 3. 逆针灸的现代机理研究进展 |
| 3.1 对中枢神经系统的调节 |
| 3.2 对内分泌系统的调节 |
| 3.3 对免疫系统的调节 |
| 3.4 抗氧化作用 |
| 3.5 抗疲劳作用 |
| 3.6 对细胞凋亡的调控 |
| 3.7 对信号转导的调节 |
| 4. 逆针灸与围绝经期综合症的防治 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 指标检测及其方法 |
| 4 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 一般情况观察 |
| 2 去卵巢大鼠HPO轴上相关激素的变化以及逆针灸三阴交穴对其影响 |
| 讨论 |
| 1. 穴位及方法的选择 |
| 2. 围绝经期模型的选择 |
| 3. 去卵巢大鼠HPO轴的变化及逆针灸三阴交对其的影响 |
| 4. 去卵巢大鼠下丘脑及子宫ER的变化及逆针灸三阴交对其的影响 |
| 结语 |
| 1. 论文总结 |
| 2. 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）补肾中药联合BMP-2对人脐血间充质干细胞体外增殖及成骨活性影响的实验研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英汉缩略语名词对照 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 实验研究 |
| 实验一 人脐血间充质干细胞的分离、培养与鉴定 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 主要实验仪器与设备 |
| 2.2 主要实验试剂与药物 |
| 2.3 主要试剂的配制与准备 |
| 3 实验方法与步骤 |
| 3.1 人脐血标本的采集 |
| 3.1.1 人脐血来源的条件 |
| 3.1.2 人脐血的采集方法 |
| 3.2 人脐血间充质干细胞的体外分离及原代培养 |
| 3.3 人脐血间充质干细胞的传代培养 |
| 3.4 细胞冻存 |
| 3.5 细胞复苏 |
| 3.6 脐血间充质干细胞的形态学观察、鉴定及生长曲线绘制 |
| 3.6.1 镜下观察人脐血间充质干细胞的形态学特征 |
| 3.6.2 流式细胞仪检测细胞表面标志 |
| 3.6.3 绘制人脐血间充质干细胞的生长曲线 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 原代及传代培养的脐血间充质干细胞生长和形态变化情况 |
| 4.2 脐血间充质干细胞生长曲线分析 |
| 4.3 脐血间充质干细胞表面标志检测 |
| 5 讨论 |
| 5.1 人脐血的采集 |
| 5.2 人脐血间充质干细胞的体外分离、纯化和扩增 |
| 5.3 人脐血间充质干细胞的生物学特性 |
| 5.4 培养环境对脐血间充质干细胞的影响 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 补肾中药血清联合BMP-2对体外培养人脐血间充质干细胞增殖的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验器材 |
| 2.3 主要实验仪器 |
| 2.4 主要药物与试剂 |
| 2.5 主要试剂的配置 |
| 3 实验方法与步骤 |
| 3.1 实验分组 |
| 3.2 MTT比色法检测UCB-MSCs的增殖活性 |
| 4 统计学分析 |
| 5 结果 |
| 6 讨论 |
| 7 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 补肾中药血清联合BMP-2对体外培养人脐血间充质干细胞ALP及BGP表达的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验器材 |
| 2.3 主要实验仪器 |
| 2.4 主要实验药物与试剂 |
| 2.5 实验对象 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 主要实验试剂的配置 |
| 3.2 实验分组 |
| 3.3 方法及步骤 |
| 3.3.1 制备细胞爬片 |
| 3.3.2 碱性磷酸酶(ALP)染色 |
| 3.3.3 碱性磷酸酶活性检测 |
| 3.3.4 骨钙素RIA法活性检测 |
| 4 统计学分析 |
| 5 结果 |
| 5.1 ALP染色 |
| 5.2 ALP活性 |
| 5.3 BGP含量 |
| 6 讨论 |
| 6.1 补肾中药处方分析 |
| 6.2 BMP-2浓度的选择 |
| 6.3 ALP活性表达 |
| 6.4 BGP含量 |
| 7 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 展望 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（9）用于精子筛选及体外受精的微流控芯片的构建及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 生殖学概述 |
| 1.1.1 人类生殖现状 |
| 1.1.2 受精的生理过程 |
| 1.1.3 精子在女性生殖道内的运行过程 |
| 1.2 配子及合子的质量评估 |
| 1.2.1 卵子的质量评估 |
| 1.2.2 精子的质量评估 |
| 1.2.3 受精卵质量评估 |
| 1.3 辅助生殖技术 |
| 1.3.1 辅助生殖技术发展史 |
| 1.3.2 常规的体外受精操作 |
| 1.3.3 胚胎体外发育 |
| 1.3.4 胚胎体外培养条件 |
| 1.4 微流控芯片在辅助生殖领域的应用 |
| 1.4.1 微流控技术简介 |
| 1.4.2 微流控技术与精子健康评价 |
| 1.4.3 微流控技术与卵细胞制备 |
| 1.4.4 微流控技术与体外受精 |
| 1.4.5 微流控技术与胚胎操作 |
| 1.5 本文的研究目的和方法 |
| 1.6 本文各章的主要内容 |
| 第2章 基于微流控器械的精子活力筛选 |
| 2.1 本章引论 |
| 2.2 试验材料及设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 管道尺寸设计 |
| 2.3.2 PDMS 管道加工 |
| 2.3.3 精子制备及筛选试验 |
| 2.3.4 数据采集及统计分析 |
| 2.3.5 精子荧光染色验证活力筛选效果 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 活力筛选管道宽度优化 |
| 2.4.2 活力筛选管道长度优化 |
| 2.4.3 活力筛选管道深度优化 |
| 2.4.4 活力筛选时间优化 |
| 2.4.5 精子荧光染色 |
| 2.5 结果讨论 |
| 第3章 基于微流控器械的精子化学趋向性研究 |
| 3.1 本章引论 |
| 3.1.1 精子化学趋向性研究史 |
| 3.1.2 可能的趋化物质 |
| 3.1.3 趋化试验 |
| 3.1.4 精子化学趋向性的分子机制探讨 |
| 3.2 试验材料及设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 管道尺寸设计 |
| 3.3.2 PDMS 管道加工 |
| 3.3.3 卵丘细胞及精子制备 |
| 3.3.4 趋化性试验 |
| 3.3.5 数据采集及统计分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 卵丘细胞的体外培养 |
| 3.4.2 精子化学趋向性检测 |
| 3.5 结果讨论 |
| 第4章 集成单卵定位、精子筛选及连续胚胎培养的微流体体外受精系统 |
| 4.1 本章引论 |
| 4.2 试验材料及设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 管道尺寸设计 |
| 4.3.2 PDMS 管道加工 |
| 4.3.3 卵子获取及精子制备 |
| 4.3.4 精子活力筛选 |
| 4.3.5 体外受精及换液 |
| 4.3.6 微流体模拟 |
| 4.3.7 胚胎发育追踪及染色 |
| 4.3.8 数据采集及统计分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 精子活力筛选 |
| 4.4.2 卵细胞定位 |
| 4.4.3 微管道换液 |
| 4.4.4 胚胎发育追踪 |
| 4.5 结果讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 本章引论 |
| 5.2 对本论文工作的总结 |
| 5.3 对后续工作的建议 |
| 5.3.1 基于微流体的精子活力分级评价 |
| 5.3.2 健康精子筛选芯片 |
| 5.3.3 完善体外受精芯片 |
| 5.3.4 构建健康-疾病状态精子的基因表达图谱 |
| 5.3.5 构建不同方法所得囊胚的基因表达图谱 |
| 5.4 本章小节 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录A 常用精子密度计数方法 |
| 附录B 各种简单盐溶液培养基的组成 |
| 附录C 精子上游法与 Percoll 梯度离心法操作步骤 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 |
（10）成年绒山羊皮肤干细胞的分离、纯化、鉴定与诱导（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 哺乳动物皮肤的组织学结构 |
| 1.1.1 皮肤结构 |
| 1.1.2 毛囊的基本结构 |
| 1.1.3 哺乳动物皮肤的发育 |
| 1.2 内蒙古绒山羊皮肤及毛囊发育特征 |
| 1.2.1 内蒙古绒山羊品质特征 |
| 1.2.2 内蒙古绒山羊皮肤毛囊结构特点 |
| 1.2.3 内蒙古绒山羊皮肤和毛囊发育 |
| 1.3 皮肤干细胞的定义及其特性 |
| 1.3.1 皮肤干细胞的定义 |
| 1.3.2 皮肤干细胞的特性 |
| 1.4 皮肤干细胞的分类与定位 |
| 1.4.1 表皮增殖单位学说 |
| 1.4.2 隆突激活假说 |
| 1.4.3 网状嵴分布学说 |
| 1.5 皮肤干细胞的数量 |
| 1.6 皮肤干细胞的表面标志 |
| 1.7 皮肤干细胞的可塑性 |
| 1.8 皮肤干细胞发育的调控 |
| 1.8.1 干细胞Niche |
| 1.8.2 调控皮肤干细胞的信号通路 |
| 1.8.3 细胞与其环境之间的相互作用 |
| 1.9 与皮肤干细胞相关的其他干细胞 |
| 1.9.1 旁侧干细胞 |
| 1.9.2 肿瘤干细胞 |
| 1.10 皮肤干细胞的应用 |
| 1.11 研究目的与意义 |
| 2 实验一 成年绒山羊皮肤干细胞的分离与体外培养体系的建立 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要实验仪器及耗材 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 抗体 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 皮肤干细胞的分离 |
| 2.2.2 皮肤干细胞培养体系的初步建立 |
| 2.2.3 皮肤干细胞的传代培养 |
| 2.2.4 皮肤干细胞的生长曲线测定 |
| 2.2.5 皮肤干细胞的细胞周期测定 |
| 2.2.6 皮肤干细胞的冷冻与复苏 |
| 2.2.7 皮肤干细胞的克隆形成率测定 |
| 2.2.8 皮肤干细胞的免疫荧光染色 |
| 2.2.9 皮肤干细胞的荧光原位杂交 |
| 2.2.10 数据分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 皮肤干细胞的分离与培养 |
| 2.3.2 细胞生长曲线 |
| 2.3.3 细胞周期 |
| 2.3.4 克隆形成率 |
| 2.3.5 细胞的冷冻与复苏 |
| 2.3.6 细胞免疫荧光染色 |
| 2.3.7 荧光原位杂交 |
| 2.4 小结 |
| 3 实验二 成年绒山羊皮肤干细胞的纯化（干细胞株的建立） |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验仪器 |
| 3.1.2 试剂及耗材 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 皮肤干细胞的纯化（皮肤干细胞株的获得） |
| 3.2.2 皮肤干细胞株的体外抑制分化培养体系的建立 |
| 3.2.3 纯化皮肤干细胞的传代培养 |
| 3.2.4 纯化皮肤干细胞生长曲线的测定 |
| 3.2.5 纯化皮肤干细胞的细胞周期测定 |
| 3.2.6 纯化皮肤干细胞的冷冻与复苏 |
| 3.2.7 纯化皮肤干细胞克隆形成率的测定 |
| 3.2.8 数据分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 皮肤干细胞的纯化 |
| 3.3.2 纯化皮肤干细胞的传代培养 |
| 3.3.3 细胞生长曲线 |
| 3.3.4 细胞周期 |
| 3.3.5 细胞的冷冻与复苏 |
| 3.3.6 克隆形成率 |
| 3.4 小结 |
| 4 实验三 成年绒山羊皮肤干细胞的鉴定 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验仪器 |
| 4.1.2 试剂及耗材 |
| 4.1.3 抗体 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞免疫荧光染色 |
| 4.2.2 荧光原位杂交 |
| 4.2.3 数据分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 纯化皮肤干细胞的免疫荧光染色 |
| 4.3.2 纯化皮肤干细胞的荧光原位杂交 |
| 4.3.3 纯化皮肤干细胞的分化标志检测 |
| 4.4 小结 |
| 5 实验四 成年绒山羊皮肤干细胞的定向诱导分化 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 实验仪器及耗材 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 抗体 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 成年绒山羊纯化皮肤干细胞向神经细胞的诱导分化 |
| 5.2.2 成年绒山羊纯化皮肤干细胞向心肌细胞的诱导分化 |
| 5.2.3 成年绒山羊纯化皮肤干细胞向成骨细胞的诱导分化 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 向神经细胞诱导 |
| 5.3.2 向心肌细胞诱导 |
| 5.3.3 向成骨细胞诱导 |
| 5.4 小结 |
| 6 实验五 成年绒山羊皮肤干细胞的初步定位 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.1.1 实验仪器 |
| 6.1.2 实验试剂 |
| 6.1.3 实验试剂的配置 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 石蜡切片的制备 |
| 6.2.2 Sapic 法染色 |
| 6.2.3 荧光原位杂交 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 皮肤切片的Sapic 法染色 |
| 6.3.2 荧光原位杂交 |
| 6.4 小结 |
| 7 论文总体结论 |
| 8 本研究的创新之处 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
四、新生儿使用青霉素1220例免试临床观察与分析（论文参考文献）
- [1]PQBP1突变导致Renpenning综合征的分子病理机制研究[D]. 张晓艳. 东南大学, 2017(01)
- [2]MicroRNA-210通过直接靶向PDK1诱导动脉粥样硬化内皮细胞凋亡[D]. 李莹. 吉林大学, 2017(12)
- [3]复合益生菌微生态添加剂的培养条件优化及功效评价[D]. 张欣宇. 吉林大学, 2015(08)
- [4]肺炎克雷伯菌致脓毒症中医临床特征分析[D]. 张庆. 北京中医药大学, 2014(09)
- [5]冲突性心理应激所致大鼠睡眠障碍的中枢5-HT的机制研究[D]. 徐瑞鑫. 黑龙江中医药大学, 2013(10)
- [6]苍柏湿毒清治疗支原体性宫颈炎（气虚湿毒证）的临床观察及对小鼠阴道解脲支原体定植干预的免疫机制研究[D]. 李楠. 北京中医药大学, 2013(08)
- [7]逆针灸三阴交穴对去卵巢大鼠HPO轴影响的实验研究[D]. 周静. 北京中医药大学, 2013(08)
- [8]补肾中药联合BMP-2对人脐血间充质干细胞体外增殖及成骨活性影响的实验研究[D]. 鲁俊山. 南京中医药大学, 2012(10)
- [9]用于精子筛选及体外受精的微流控芯片的构建及应用[D]. 谢兰. 清华大学, 2010(06)
- [10]成年绒山羊皮肤干细胞的分离、纯化、鉴定与诱导[D]. 刘迎春. 内蒙古农业大学, 2007(03)