十二烷基硫酸钠毛细管电泳法分析非还原单克隆抗体药物纯度的前处理条件优化

论文摘要

十二烷基硫酸钠毛细管电泳法因具有快速、分辨率高的优势,已成为单克隆抗体纯度分析的主流方法。在非还原单克隆抗体纯度检测中,其样品前处理过程对于结果有显著影响。为优化样品前处理,考察了以碘乙酰胺和N-乙基马来酰亚胺为巯基封闭剂,在pH 6.0～9.0的样品缓冲液条件下,不同种类和批次的单抗的纯度。发现在两种巯基封闭剂中,高pH的样品缓冲液会影响巯基封闭的效果,产生较多的抗体片段;而在低pH条件下,抗体片段较少,单抗的纯度更高。因此在进行非还原单抗的纯度检测中,pH 6.0的样品缓冲液为最佳的前处理条件。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 仪器、试剂及样品
•   1.2 溶液配制
•     1.2.1 样品缓冲液
•     1.2.2 巯基封闭剂
•   1.3 非还原CE-SDS样品前处理
•   1.4 毛细管电泳条件
•   1.5 毛细管电泳冲洗条件
• 2 结果与讨论
•   2.1 样品缓冲液pH对非还原单抗纯度分析的影响
•   2.2 pH影响IAM封闭能力的机理探讨
•   2.3 pH影响NEM封闭能力的机理探讨
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘振东,高铁,徐玲丽,杨勇,王庆民,陈泓序

关键词: 单克隆抗体,非还原,十二烷基硫酸钠,毛细管电泳法,碘乙酰胺,乙基马来酰亚胺

来源: 色谱 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,有机化工

单位: 齐鲁制药有限公司药物研究院

分类号: O658.9;TQ460.72

页码: 666-670

总页数: 5

文件大小: 1441K

下载量: 178