导读:本文包含了昆明白小鼠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:小鼠,昆明,生殖细胞,胚胎,干细胞,培养基,细胞。
昆明白小鼠论文文献综述
赵向远,李洋,刘延玲,董焕声,王红军[1]（2019）在《昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养》一文中研究指出胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embryonic germ cells,MEF)为饲养层,培养小鼠EG细胞,以对影响小鼠EG细胞传代的因素进行探讨。用ELISA试剂盒定量检测MEF自身分泌生长因子SCF、bFGF、LIF的浓度;以培养液是否添加生长因子,观察PGC/EG的培养效果;比较了机械分割法、胰酶消化法和胶原酶Ⅳ消化法对EG传代培养的影响;对获得的EG进行多能性鉴定。结果表明,培养3d的饲养层上清液中含75.7ng/L SCF、125.7ng/L bFGF、196.6ng/L LIF,培养5d的饲养层上清液中含76.2ng/L SCF、136.2ng/L bFGF、214.2ng/L LIF;培养液添加生长因子显着提高了EG的克隆数、传代数(P<0.05);机械分割法与酶消化法对EG传代差异显着(P<0.05),而两种酶法对EG传代无显着影响(P>0.05);所分离的EG细胞显示AKP染色强阳性;EG体外培养时会自分化为神经样细胞、上皮样细胞;EG细胞呈Oct4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性。结果提示,饲养层自身能分泌少量生长因子,但培养液中添加生长因子可显着改善昆明白小鼠EG培养效果,酶消化法更适合于昆明白小鼠EG的传代培养。(本文来源于《青岛农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年02期）
林涛[2]（2014）在《牛环形泰勒虫昆明白小鼠繁殖模型与间接荧光抗体检测法的建立》一文中研究指出牛梨形虫病是由泰勒虫和巴贝斯虫引起的一种蜱传血液原虫病的总称（旧称焦虫病），在我国（包括我区）致病率及其危害最严重的是牛环形泰勒虫（Theileria annulata），OIE将其列为B类疫病。多呈急性经过，以高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿胀为特征，急性病例死亡率较高；主要流行于我国西北、华北和东北的一些省、自治区，在我区广泛流行，其感染率可达60%以上，严重威胁养殖牛业的健康发展。因此，将牛环形泰勒虫地方流行株接种于试验动物进行扩繁，研制玻片裂殖子抗原的基础上，建立准确、灵敏、快速的间接荧光抗体检测方法（IFAT）等，对该病的早期诊断、流行病学研究和综合防治提供技术支持。(Ⅰ)本试验研究，对同胎、体重20g左右、雌雄对半的40只昆明白小鼠进行摘除脾脏的手术，并以被去除脾脏的昆明白小鼠为实验动物，接种牛环形泰勒虫地方流行株，进行体内扩繁试验（invivo），并每隔8h、12h、24h、8h及3d~10d观察分析其染虫率，在小鼠体内扩繁情况等；经小鼠心脏、眼球采血的方法收集其最高染虫率(15%以上)的血液内裂殖子，并进行冻存，摸索其保存、复苏条件等。试验结果显示，术后有37只鼠存活，检测其呼吸、心跳、食欲、精神状态皆良好，说明摘脾手术成功；接种后的第2d可在小鼠血液里观察到裂殖子，第5d~9d每组小鼠的平均染虫率可达15%~20%（最高峰），第10d后染虫率开始下降，渐渐在血液涂片中观察不到裂殖体；经试验发现牛源性环形泰勒虫在除脾脏昆明白小鼠体内能被置换、增值；在雌雄昆明白小鼠体内的扩繁率差异极显着（P=0.007＜0.01），而去脾昆明白与未去脾昆明白小鼠的染虫率极显着（P=0.0002＜0.01）；染虫率为15%以上时的昆明白小鼠血液里的裂殖子可用冷冻法（-80℃）保存，亦可制作玻片裂殖子抗原备用，保存后的半年内的裂殖体复苏活性良好。该试验数据可为建立牛环形泰勒虫动物模型，为教学、科研提供丰富的虫株资源。(Ⅱ)本试验研究，应用阳性牛环形泰勒虫病例的血液源性裂殖子和经昆明白小鼠扩繁的裂殖子(试验Ⅰ方法制作的玻片抗原，保存于-80°C备用)作为已知抗原，经十字交叉法分别将一抗（1:20~1:640）和二抗（1:20~1:1600）梯度稀释，摸索和确其最佳工作浓度，建立牛环形泰勒虫病的间接荧光抗体检测方法（IFAT）；经特异性（观察其与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫是否有交叉反应）、重复性试验等验证其重复性及灵敏度，并运用所建立的方法对疑似牛环形泰勒虫抗体样品（n=290）进行了检测。试验结果显示：自制的牛环形泰勒虫玻片裂殖子抗原在-80℃条件下能保存半年之久，复苏后仍然具有较好的抗原性；牛环形泰勒虫间接荧光抗体检测方法的一抗（被检血清）和二抗（荧光标记兔抗牛IgG）最佳工作浓度分别为1:80和1:100稀释度；该方法检测样品，与牛巴斯虫、双芽巴贝斯虫未出现交叉反应；被检测血清稀释到1:1600仍然可以检测到裂殖子荧光；批内和批间重复检测，变异系数均小于10%；应用所建立的方法成功检测了采自疑似区牛被检血清样品290份，阳性率为72.4%（210／290），本次牛环形泰勒虫的检出率高于血液涂片染色镜检法阳性率为27.6％（80／290）。本试验研究可为牛环形泰勒虫病的诊断提供玻片裂殖子抗原资源；所建立的IFAT方法，其敏感性较高、特异性和重复性较好，可用于该病的早期诊断，可为综合防控奠定基础。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2014-06-01）
岳明星,朱士恩,侯云鹏,傅祥伟[3]（2012）在《老龄化对昆明白小鼠卵母细胞发育能力影响的研究》一文中研究指出引言本研究比较了青、老年昆明白小鼠MⅡ卵母细胞线粒体分布和胞质内钙离子含量,分析老年小鼠卵子发育能力下降的原因。并对青、老年小鼠MⅡ卵母细胞进行玻璃化冷冻保存,比较冷冻保存效果和卵母细胞后期发育能力。材料与方法(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集》期刊2012-08-01）
王昌梅,张丽芬,管荣花,杨明洁,张田[4]（2012）在《不同方式给予植物凝集素对昆明白小鼠淋巴细胞转化率的影响》一文中研究指出[目的]观察和比较通过不同途径注入植物凝集素后昆明白小鼠淋巴细胞的转化率,已期为相关应用提供依据。[方法]采用口服、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射和阴道注入5种方法给予植物凝集素。剂量为4 mg(PHA)/只/22～25 g b.w。72 h后直接取血涂片,瑞氏染液染色后油镜观察各种淋巴细胞的比例,以此计算整体淋巴细胞的转化率。[结果]口服、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射和阴道注入各组平均转化率分别为17%、36%、39%、47%、24%。[结论各实验组与对照组的转化率之间有显着差异。整体淋巴细胞的转化率与不同给药方式有关系。几种给药方式相比,肌肉注射引起的淋巴细胞转化率最高,口服组的转化率相对较低。(本文来源于《现代预防医学》期刊2012年01期）
王昌梅,张丽芬,杨明洁,张田,王敏康[5]（2010）在《芸豆植物凝集素对昆明白小鼠精子畸形的影响》一文中研究指出目的测定芸豆植物凝集素(PHA)对小鼠精子的影响。方法实验小鼠腹腔注射1/3 LD_(50),1/10 LD_(50)和1/30 LD_(50)的芸豆PHA,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予环磷酰胺,剂量为40 mg/kg体重。所有各组均按0.1 ml/只腹腔注射,每日一次,连续5 d。各组于首次给药后35 d和70 d取样制片观察。结果给药后35 d和70 d取材,高、中、低剂量组分别与阴性对照组相比,小鼠精子畸形率无显着差异(P>0.05),与阳性对照组相比,有极显着差异(P<0.01)。各剂量组之间相比,无显着性差异,即无剂量效应关系。结论 PHA并不引起小鼠精子畸形率升高。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2010年03期）
李恩书[6]（2010）在《昆明白小鼠胚胎干细胞系及转基因小鼠模型的建立》一文中研究指出胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是一种从哺乳动物囊胚的内细胞团(inner cell mass,ICM)或者原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)中分离出来的一群具有全能性分化潜能的未分化细胞。自从小鼠胚胎干细胞系成功建立以来,胚胎干细胞凭借着其独特的全能性以及无限增殖能力受到了众多研究者的青睐。人们对它寄予厚望,越来越多的研究领域希望通过胚胎干细胞来攻克以前难以攻克的难题。本实验的目的是希望通过对昆明白小鼠囊胚的培养,从其自然孵化的内细胞团(ICM)中分离培养胚胎干细胞,摸索昆白品系胚胎干细胞的培养条件,建立昆明白小鼠胚胎干细胞系。并且利用建立的胚胎干细胞系作为介导,用胚胎干细胞法建立昆明种荧光蛋白转基因小鼠模型。ES细胞的无血清无滋养层培养是一项难度较大的工作,且现有的ES细胞系大多是用国外品系的近交系小鼠建立的。昆明白小鼠作为我国应用最多的远交系实验小鼠,其繁殖能力强及遗传差异大的特点使得其有着广泛的应用前景,并且其低廉的价格使得实验的成本大大降低,更适合于节约实验成本。建立昆明白小鼠ES细胞系以及该品系的转基因小鼠有利于以其为实验材料的各项实验的顺利高效进行,并且可以大大降低大规模实验的成本。而无血清无滋养层培养更是可以避免动物源性,简化实验操作步骤,提高实验的效率。本实验经过对昆明白小鼠囊胚ICM的培养,成功的获得并培养了叁株昆明白小鼠胚胎干细胞,并且对其进行了多方面的鉴定,主要结论如下:(1)用3i培养液成功培养囊胚,并由囊胚自然孵化获得胚胎干细胞。(2)用2×3i培养液成功培养了获得的昆明白小鼠胚胎干细胞,传代数在40代以上。(3)对获得的昆明白小鼠胚胎干细胞进行碱性磷酸酶染色,结果呈阳性。(4)对获得的昆明白小鼠胚胎干细胞进行免疫荧光检测,结果呈阳性。(5)对获得的昆明白小鼠胚胎干细胞进行Western blot检测Oct4及Sox2,结果均有表达。(6)对获得的昆明白小鼠胚胎干细胞进行Real-Time qRT-PCR检测Oct4、Sox2、Klf4,结果表达量与mESC接近,与MEF有显着差别。(7)对获得的昆明白小鼠胚胎干细胞进行畸胎瘤成瘤实验,6周左右成瘤,成瘤率在85%左右。(8)用pLV300-H794病毒感染获得的昆明白小鼠胚胎干细胞,获得带有红色荧光的昆明白小鼠胚胎干细胞。本实验利用最新的3i培养系统,成功获得并培养了昆明白小鼠胚胎干细胞,并对其进行了多方面的鉴定,结果均显示获得的细胞株为小鼠胚胎干细胞株。利用慢病毒介导转入红色荧光蛋白,获得带有红色荧光的昆明白小鼠胚胎干细胞,为进一步进行嵌合鼠实验及转基因模型的最终建立打下了基础。此外,昆明白小鼠胚胎干细胞无血清无饲养层的成功获得、培养为3i培养系统理论的正确性、真实性提供了一个新的例证。(本文来源于《浙江理工大学》期刊2010-03-01）
王轶敏[7]（2008）在《昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养》一文中研究指出胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells, EG cells)是继胚胎癌细胞和胚胎干细胞之后发现的又一多能性干细胞。本研究以昆明白小鼠胎儿生殖嵴为材料,从原始生殖细胞中分离出EG细胞,并进行传代培养和鉴定,对影响EG细胞分离与培养的因素进行了探讨,为进一步建立昆明白小鼠EG细胞系奠定基础。主要实验结果如下:1)试验比较了叁种分离培养方法对获得小鼠原代MEF的影响,发现酶消化法的分离效果好于组织块法和酶结合组织块法,适合原代MEF的分离。制作成纤维细胞饲养层时,10μg/mL丝裂霉素C处理90min可以有效抑制成纤维细胞的增殖,适合用于MEF饲养层的制作。2)试验比较了采用不同胎龄胎儿分离培养EG细胞的效果,发现8.5dpc~10.5dpc胚胎初次分离所获得的EG细胞集落较少,后期传代能力也较差,难以有效建立EG细胞系;而11.5dpc~12.5dpc日龄胚胎初次分离获得的类ES细胞集落较多,后期传代能力较强,最高可传至7代,有利于EG细胞的长期培养。3)试验比较了“一次消化法”和“多次消化法”对EG细胞分离培养方面的影响,发现“多次消化法”可以得到较高的原代EG细胞克隆率,还能保持较高的细胞增殖能力,好于“一次消化法”,适宜于EG细胞的分离和传代。4)使用0.125%胰蛋白酶+0.02%EDTA的消化液进行多次消化,原代EG细胞克隆率和平均传代次数较高,可取得较好的分离效果,但与0.1%的胶原酶Ⅳ组和0.25%胰蛋白酶+0.04% EDTA组相比差异不显着,5)大鼠心肌细胞条件培养液在小鼠EG细胞分离培养过程中, EG细胞克隆形成率和最高传代数均高于EG细胞基础培养液组;在EG细胞的传代培养中,RH-CM组培养效果最好,最高传至7代而不分化。6)试验比较了叁种传代方法对小鼠胚胎生殖细胞细胞分离培养的影响,发现“连同饲养层消化法”简单易行,而且传代效果较好,EG细胞克隆形成率和传代数均好于“机械离散法”,同“酶消化法”相比差异不显着,二者最高均传至7代。7)试验比较了不同代数和不同冷冻时间对EG细胞冻后存活率的影响,结果发现,EG细胞冻后存活率的变化不显着,没有随着冻存时间的延长和代数的增加而下降。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2008-05-01）
王轶敏,王新庄,李金辉,李义书,冯勋伟[8]（2008）在《不同培养系统和传代方法对昆明白小鼠原始生殖细胞分离培养的影响》一文中研究指出[目的]寻求适合昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。[方法]常规方法从昆明白小鼠原始生殖细胞中分离EG细胞,用不同培养系统(EG细胞基础培养液,RH-CM,EG细胞基础培养液+MEF)及不同传代方法(机械法,酶消化法,连同饲养层消化法),研究对昆明白小鼠EG细胞分离克隆的影响。[结果]以RH-CM作为培养基效果最好,RH-CM能够更好地促进EG细胞贴壁增殖和集落的形成,有效地维持EG细胞未分化状态;酶消化法和连同饲养层消化法均能获得较高的克隆形成率。[结论]RH-CM和连同饲养层消化法可分别作为昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2008年12期）
李煜,梁琳,王振飞,贾瑞贞,戴宝贞[9]（2007）在《昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养》一文中研究指出为探索昆明白小鼠胚胎干细胞建系方法,将受孕4.5天的昆明白小鼠囊胚用免疫手术法去除滋胚层,然后将内细胞团(ICM)接种于胎鼠成纤维细胞饲养层上培养,形成的胚胎干细胞样集落用胰蛋白酶-EDTA消化法传代,培养后进行相差显微镜观察及碱性磷酸酶染色。结果饲养层上生长的ICM细胞呈典型的ES样细胞集落,传至第8代碱性磷酸酶染色呈强阳性。实验表明免疫手术法适用于昆明白小鼠ES细胞建系,获得的细胞集落具有ES细胞的主要生物学性状。(本文来源于《细胞生物学杂志》期刊2007年06期）
王庆忠,刘慧莲[10]（2007）在《昆明白小鼠精原干细胞的体外培养》一文中研究指出建立了一种小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的分离、纯化和培养体系,主要包括SSCs的差异贴壁分选(differential adherence selection)、无血清培养基和MEF(mouse embryonic fibro-blast)饲养层。无血清培养基以StemPro-34 SFM为基础培养液,补充多种添加剂和GDNF(glial cell line-derived neurotrophic factor)、可溶性GFRα1(soluble GDNF family receptorα-1)和bFGF(basic fibroblastgrowth factor)等因子。昆明白小鼠(KMmice)幼鼠的生精细胞在这一培养体系中能够培养和增殖1个月。RT-PCR检测还表明培养的细胞同时表达Oct4和Sox2,说明SSCs与ESCs两者的自我复制可能享有共同的维持机制。(本文来源于《潍坊学院学报》期刊2007年06期）
昆明白小鼠论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
牛梨形虫病是由泰勒虫和巴贝斯虫引起的一种蜱传血液原虫病的总称（旧称焦虫病），在我国（包括我区）致病率及其危害最严重的是牛环形泰勒虫（Theileria annulata），OIE将其列为B类疫病。多呈急性经过，以高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿胀为特征，急性病例死亡率较高；主要流行于我国西北、华北和东北的一些省、自治区，在我区广泛流行，其感染率可达60%以上，严重威胁养殖牛业的健康发展。因此，将牛环形泰勒虫地方流行株接种于试验动物进行扩繁，研制玻片裂殖子抗原的基础上，建立准确、灵敏、快速的间接荧光抗体检测方法（IFAT）等，对该病的早期诊断、流行病学研究和综合防治提供技术支持。(Ⅰ)本试验研究，对同胎、体重20g左右、雌雄对半的40只昆明白小鼠进行摘除脾脏的手术，并以被去除脾脏的昆明白小鼠为实验动物，接种牛环形泰勒虫地方流行株，进行体内扩繁试验（invivo），并每隔8h、12h、24h、8h及3d~10d观察分析其染虫率，在小鼠体内扩繁情况等；经小鼠心脏、眼球采血的方法收集其最高染虫率(15%以上)的血液内裂殖子，并进行冻存，摸索其保存、复苏条件等。试验结果显示，术后有37只鼠存活，检测其呼吸、心跳、食欲、精神状态皆良好，说明摘脾手术成功；接种后的第2d可在小鼠血液里观察到裂殖子，第5d~9d每组小鼠的平均染虫率可达15%~20%（最高峰），第10d后染虫率开始下降，渐渐在血液涂片中观察不到裂殖体；经试验发现牛源性环形泰勒虫在除脾脏昆明白小鼠体内能被置换、增值；在雌雄昆明白小鼠体内的扩繁率差异极显着（P=0.007＜0.01），而去脾昆明白与未去脾昆明白小鼠的染虫率极显着（P=0.0002＜0.01）；染虫率为15%以上时的昆明白小鼠血液里的裂殖子可用冷冻法（-80℃）保存，亦可制作玻片裂殖子抗原备用，保存后的半年内的裂殖体复苏活性良好。该试验数据可为建立牛环形泰勒虫动物模型，为教学、科研提供丰富的虫株资源。(Ⅱ)本试验研究，应用阳性牛环形泰勒虫病例的血液源性裂殖子和经昆明白小鼠扩繁的裂殖子(试验Ⅰ方法制作的玻片抗原，保存于-80°C备用)作为已知抗原，经十字交叉法分别将一抗（1:20~1:640）和二抗（1:20~1:1600）梯度稀释，摸索和确其最佳工作浓度，建立牛环形泰勒虫病的间接荧光抗体检测方法（IFAT）；经特异性（观察其与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫是否有交叉反应）、重复性试验等验证其重复性及灵敏度，并运用所建立的方法对疑似牛环形泰勒虫抗体样品（n=290）进行了检测。试验结果显示：自制的牛环形泰勒虫玻片裂殖子抗原在-80℃条件下能保存半年之久，复苏后仍然具有较好的抗原性；牛环形泰勒虫间接荧光抗体检测方法的一抗（被检血清）和二抗（荧光标记兔抗牛IgG）最佳工作浓度分别为1:80和1:100稀释度；该方法检测样品，与牛巴斯虫、双芽巴贝斯虫未出现交叉反应；被检测血清稀释到1:1600仍然可以检测到裂殖子荧光；批内和批间重复检测，变异系数均小于10%；应用所建立的方法成功检测了采自疑似区牛被检血清样品290份，阳性率为72.4%（210／290），本次牛环形泰勒虫的检出率高于血液涂片染色镜检法阳性率为27.6％（80／290）。本试验研究可为牛环形泰勒虫病的诊断提供玻片裂殖子抗原资源；所建立的IFAT方法，其敏感性较高、特异性和重复性较好，可用于该病的早期诊断，可为综合防控奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
昆明白小鼠论文参考文献
[1].赵向远,李洋,刘延玲,董焕声,王红军.昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养[J].青岛农业大学学报(自然科学版).2019
[2].林涛.牛环形泰勒虫昆明白小鼠繁殖模型与间接荧光抗体检测法的建立[D].新疆农业大学.2014
[3].岳明星,朱士恩,侯云鹏,傅祥伟.老龄化对昆明白小鼠卵母细胞发育能力影响的研究[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集.2012
[4].王昌梅,张丽芬,管荣花,杨明洁,张田.不同方式给予植物凝集素对昆明白小鼠淋巴细胞转化率的影响[J].现代预防医学.2012
[5].王昌梅,张丽芬,杨明洁,张田,王敏康.芸豆植物凝集素对昆明白小鼠精子畸形的影响[J].生殖医学杂志.2010
[6].李恩书.昆明白小鼠胚胎干细胞系及转基因小鼠模型的建立[D].浙江理工大学.2010
[7].王轶敏.昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养[D].西北农林科技大学.2008
[8].王轶敏,王新庄,李金辉,李义书,冯勋伟.不同培养系统和传代方法对昆明白小鼠原始生殖细胞分离培养的影响[J].安徽农业科学.2008
[9].李煜,梁琳,王振飞,贾瑞贞,戴宝贞.昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养[J].细胞生物学杂志.2007
[10].王庆忠,刘慧莲.昆明白小鼠精原干细胞的体外培养[J].潍坊学院学报.2007
论文知识图
