（江苏省建湖县第二人民医院江苏建湖224731）
【摘要】目的：探讨检查痰液结核杆菌时，应用抗酸染色法与酸性改良罗氏培养法，在临床应用上的差异和价值。方法：选取我院2014年1月至2016年6月期间门诊、住院的122例患者痰液标本，分别通过抗酸染色法及酸性改良罗氏培养法进行结核杆菌的检验，对比两种检验方法的有效率及检测所需时间等指标。结果：抗酸染色法检出18例阳性，阳性率为（14.75%）；酸性改良罗氏培养法检出15例阳性，阳性率为（12.30%）。虽然抗酸染色法的阳性率高于酸性改良罗氏培养法，但无统计学意义（P＞0.05）；抗酸染色法检验用时为（3.26±1.51）天，显著低于酸性改良罗氏培养法的用时（28.76±3.52）天，存在显著的统计学意义（P＜0.001）。结论：在检验痰液中的结核杆菌时，应用抗酸染色法与酸性改良罗氏培养法在阳性率检出方面无显著性差异，但是抗酸染色法的检验用时显著短于酸性改良罗氏培养法，有较高临床实用价值。
【关键词】抗酸染色法；酸性改良罗氏培养法；痰液；结核杆菌
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）05-0092-02
结核病是由结核杆菌感染引起的，古老而顽固的慢性传染性疾病[1]；结核杆菌可以侵入人体全身各个器官，属于全身性疾病之一；多发生于肺部，进展成为肺结核。痰液标本直接涂片抗酸染色法与酸性改良罗氏培养法是实验室诊断肺结核病的常用方法，为探讨这2种检测方法在痰液结核杆菌检验中的临床应用价值，笔者进行了相关研究，现将结果报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
择取2014年1月至2016年6月期间我院门诊、住院的122例疑似肺结核的患者的痰液，其中73例男性患者，49例女性患者，年龄20～82岁，平均（50.3±1.8）岁。取患者痰液按相应的要求，制作成的样本，各计122份进行检验。
1.2方法
1.2.1抗酸染色法仪器为日本OLYMPUS显微镜，油镜100倍，目镜10倍。抗酸杆菌染色所使用的试剂由珠海贝索(台资）生物技术有限公司提供，批号413012。镜油也由珠海贝索(台资）生物技术有限公司提供。
1.2.2酸性改良罗氏培养基珠海贝索改良结核菌罗氏培养管（酸性）Ⅱ型：批号201310008，由珠海贝索(台资）生物技术有限公司提供。
1.2.3实验操作两种方法均严格按操作使用说明书进行，两种检测方式均由同一名工作人员操作完成，在经验方面无差异。
1.3临床观察指标
统计并计算抗酸染色法与酸性改良罗氏培养法在痰液样本结核杆菌中的阳性检出率，对比两种检测方式所用的时间。
1.4统计学方法
本组资料，针对抗酸染色法与酸性改良罗氏培养法在痰液结核杆菌检测中的应用价值研究，使用SPSS19.0统计学软件，对相关数据进行分析与处理；计数资料以（n，%）形式表示，通过卡方对其予以检验；计量资料则以（x-±s）的形式来表示，通过t对其予以检验，只有满足P＜0.05时，才可认为差异在统计学中存在有意义。
2.结果
2.1阳性检出率
经过检测后，抗酸染色法检出18例阳性，阳性率为（14.75%）；酸性改良罗氏培养法检出15例阳性，阳性率为（12.30%）。虽然抗酸染色法的阳性检出率高于酸性改良罗氏培养法，但是组间数据统计学分析无显著性意义（P＞0.05），详见表1。
3.讨论
结核病是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病，潜伏期4～8周左右，人与人之间呼吸道传播是本病的主要传染方式，传染源是排菌的肺结核患者。结核杆菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多见。据WHO统计，全世界约每3个人中就有1个人感染了结核杆菌，在某些发展中国家成人结核杆菌携带率高达80%，其中约5%～10%携带者可发展为活动性结核病。中国每年死于结核病的人约25万之多，是各类传染病死亡人类总和的两倍之多[3]。结核杆菌是确诊肺结核最具特异性的方法，痰中找到结核杆菌是确诊肺结核病的主要依据[4]。因此寻找有效的结核杆菌检测方法对该病的诊断、治疗和预防具有重要的价值。
抗酸染色法的原理是结核分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以结核分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色，但结核分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，又很难被酸性脱色剂脱色，因此被称为抗酸染色。抗酸染色法在较少痰液量的结核杆菌检测中灵敏性较低，只有在痰液中的细菌浓度超过一定数值时，通常5000～10000个菌/ml以上时[5]，才能通过生物显微镜进行结核杆菌观察，得到阳性结果。
酸性改良罗氏培养法，通过固体培养基进行结核杆菌培养，在临床中应用广泛，在结核杆菌的培养中具有代表性，操作简单、价格低廉且观察菌落的生长形态难度较低；但是酸性改良罗氏培养法结核杆菌的培养时间长，通常需要25～30天左右，这就导致检测人员的工作量大大增加，并使其工作效率和工作质量下降，同时检测时间过长检测人员会出现视觉疲劳，对阳性结核杆菌的检测易出现遗漏。因此在这两者的结核杆菌阳性检出率无明显差异的条件下，应用抗酸染色法查找痰液中结核杆菌的效果将更好，不仅能够提升检测灵敏性，同时还能减轻工作人员的负担。当然酸性改良罗氏培养法可在检出结核杆菌的时，再进行鉴定、分型和药物敏感试验，给临床提供药物使用指导。
本次研究结果显示，抗酸染色法共查找出18（14.75%）例阳性，酸性改良罗氏培养法查找出15（12.30%）例阳性，两者统计学无意义（P＞0.05）；抗酸染色法检查用时为（3.26±1.51）天，显著低于酸性改良罗氏培养法的用时（28.76±3.52）天，组间数据经过计算后P＜0.001，统计学存在显著性意义。因此抗酸染色法检测痰液结核杆菌具有较高的临床实际应用价值。
【参考文献】
[1]王发明.抗酸染色方法和酸性改良罗氏培养的方法查找痰中结核杆菌[J].中国保健营养,2016,26(01):27.
[2]肖静,杨元好,金瑛等.荧光染色法检测痰中结核杆菌的应用[J].贵阳中医学院学报,2013,35(04):152-153.
[3]李晶伟.金胺“O”荧光染色法在痰液结核杆菌检测中的临床应用[J].中医临床研究,2014,01(30):142-144.
[4]宋谷发，韩骏飞.结核杆菌痰检方法的临床应用比较[J].当代医学，2016,21(22):3-5
[5]陈建芸,石玉玲,李林海等.3种检测分枝杆菌方法的比较及应用价值分析[J].生物技术通讯,2016,27(01):114-17.