丙环唑对核盘菌和指状青霉菌抑制作用的研究

论文摘要

核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）和指状青霉菌（Penicillium digitatum）都属于危害极大的死体营养型植物病原真菌,核盘菌引起油菜、花生、大豆等作物的菌核病,指状青霉菌引起柑橘绿霉病的发生。目前丙环唑在我国仅以混剂形式登记用于油菜菌核病的防治,对柑橘绿霉病的防治尚未登记。本论文主要研究了丙环唑对核盘菌和指状青霉菌的生物活性和对生理方面的影响,对科学利用丙环唑防治这两种病原菌具有一定的理论和实践指导意义。测定了丙环唑对采自安徽省的核盘菌的有效中浓度(EC50)值,建立了核盘菌对丙环唑的相对敏感性基线。2008年（N=75）和2014年（N=75）菌株EC50值的频率分布均符合正态分布,K-S正态检验P值分别为0.119和0.502。2008年和2014年菌株的EC50平均值分别为0.338±0.174μg/mL（SD）和0.315±0.135μg/mL（SD）,两年之间无显著差异（P=0.375）。40μg/mL丙环唑对盆栽油菜菌核病保护作用防效为82.4%,80μg/mL的丙环唑对盆栽油菜上菌核病的治疗作用防效为50.7%。光学显微镜观察显示在含0.4μg/mL丙环唑的PDA上生长的菌丝与对照相比顶端分支增多,节间缩短。丙环唑可以显著（P<0.05）提高核盘菌菌丝细胞膜的通透性和菌丝细胞内甘露聚糖的含量。丙环唑对118株指状青霉菌EC50自然对数值的频率分布表明18株菌株已对丙环唑产生抗药性,抗性频率为15.25%,抗性倍数为2.76.5倍。丙环唑相对敏感菌株的EC50平均值为0.104±0.039μg/mL（SD）。丙环唑和抑霉唑对指状青霉菌的EC50值之间相关性显著（R2=0.7537,P<0.001）。200和400μg/mL丙环唑浸果处理后的柑橘储存40 d对绿霉病的防效分别为63.1%和84.3%。40和100μg/mL丙环唑浸果处理显著（P<0.05）降低孢子产量和孢子的致病力。碘化丙啶对孢子染色观察结果显示在含有0.1μg/mL丙环唑的PDA上形成的孢子细胞膜完整性破坏率为25.6%。孢子萌发过程中丙环唑导致孢子细胞内活性氧累积。透射电镜观察发现经丙环唑处理的菌丝细胞壁增厚。与敏感菌株HBWH-22(EC50=0.049μg/mL)和HBWH-26(EC50=0.051μg/mL)相比,抗性菌株JXGZ-2(EC50=0.429μg/mL)和JXGZ-179(EC50=0.675μg/mL)丙环唑作用靶标酶基因CYP51的序列没有发现突变或重复序列插入,但CYP51基因的相对表达量分别是敏感菌株的1.57倍（P=0.029）和1.63倍（P=0.007）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 前言
•   1.1 甾醇生物合成抑制剂类杀菌剂
•     1.1.1 三唑类杀菌剂
•     1.1.2 丙环唑
•   1.2 核盘菌及其对杀菌剂的抗性
•     1.2.1 核盘菌
•     1.2.2 核盘菌对杀菌剂的抗性
•   1.3 指状青霉菌及其对杀菌剂的抗性
•     1.3.1 指状青霉菌
•     1.3.2 指状青霉菌对杀菌剂的抗性
•   1.4 立题依据及研究意义
• 第2章 丙环唑对核盘菌的抑制作用
•   2.1 材料与方法
•     2.1.1 供试菌株与寄主
•     2.1.2 供试药剂及试剂
•     2.1.3 试验仪器及设备
•     2.1.4 培养基制备、杀菌剂母液配制和菌株活化
•     2.1.5 核盘菌对丙环唑相对敏感性基线的建立
•     2.1.6 丙环唑对盆栽油菜上菌核病的防效
•     2.1.7 丙环唑对核盘菌菌核产量的影响
•     2.1.8 丙环唑对核盘菌菌丝细胞膜通透性的影响
•     2.1.9 丙环唑对核盘菌菌丝微观形态的影响
•     2.1.10 丙环唑对核盘菌菌丝甘露聚糖含量的影响
•     2.1.11 数据分析
•   2.2 结果与分析
•     2.2.1 核盘菌对丙环唑的相对敏感性基线
•     2.2.2 丙环唑对盆栽油菜上菌核病的防效
•     2.2.3 丙环唑对核盘菌菌核产量的影响
•     2.2.4 丙环唑对核盘菌菌丝细胞膜通透性的影响
•     2.2.5 丙环唑对核盘菌菌丝微观形态的影响
•     2.2.6 丙环唑对核盘菌菌丝甘露聚糖含量的影响
•   2.3 讨论
• 第3章 丙环唑对指状青霉菌的抑制作用
•   3.1 材料与方法
•     3.1.1 试验菌株与寄主
•     3.1.2 供试药剂及试剂
•     3.1.3 试验仪器及设备
•     3.1.4 菌株分离、孢子悬浮液和接种菌饼的制备及母液配制
•     3.1.5 指状青霉菌对丙环唑的敏感性测定
• 50 值相关性分析'>    3.1.6 丙环唑和抑霉唑对指状青霉菌菌丝生长EC₅₀值相关性分析
•     3.1.7 丙环唑对柑橘果实上指状青霉菌的短期防效测定
•     3.1.8 丙环唑对柑橘果实上采后病害的防效测定
•     3.1.9 丙环唑对指状青霉菌产孢量和致病力的影响
•     3.1.10 丙环唑对指状青霉菌孢子在PDA上萌发的影响
•     3.1.11 丙环唑对指状青霉菌孢子微观形态的影响
•     3.1.12 丙环唑对指状青霉菌孢子细胞膜完整性的影响
•     3.1.13 丙环唑对孢子萌发过程中活性氧含量的影响
•     3.1.14 丙环唑对指状青霉菌菌丝微观形态的影响
•     3.1.15 丙环唑对指状青霉菌菌丝细胞膜通透性的影响
•     3.1.16 丙环唑敏感与抗性指状青霉菌CYP51 基因序列比较
•     3.1.17 丙环唑敏感与抗性指状青霉菌CYP51 基因表达量的测定
•     3.1.18 数据分析
•   3.2 结果与分析
•     3.2.1 指状青霉菌对丙环唑的敏感性测定
• 50 值相关性分析'>    3.2.2 丙环唑和抑霉唑对指状青霉菌菌丝生长EC₅₀值相关性分析
•     3.2.3 丙环唑对柑橘果实上指状青霉菌的短期防效
•     3.2.4 丙环唑对柑橘果实上采后病害的防效
•     3.2.5 丙环唑对指状青霉菌产孢量和致病力的影响
•     3.2.6 丙环唑对指状青霉菌孢子在PDA上萌发的影响
•     3.2.7 丙环唑对指状青霉菌孢子微观形态的影响
•     3.2.8 丙环唑对指状青霉菌孢子细胞膜完整性的影响
•     3.2.9 丙环唑对孢子萌发过程中活性氧含量的影响
•     3.2.10 丙环唑对指状青霉菌菌丝微观形态的影响
•     3.2.11 丙环唑对指状青霉菌菌丝细胞膜通透性的影响
•     3.2.12 丙环唑敏感与抗性指状青霉菌CYP51 基因序列比较
•     3.2.13 丙环唑敏感与抗性指状青霉菌CYP51 基因表达量的测定
•   3.3 讨论
• 第4章 全文总结与展望
•   4.1 总结
•   4.2 展望
• 参考文献
• 附录
•   攻读硕士期间发表论文
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 张俊

导师: 朱福兴

关键词: 丙环唑,核盘菌,指状青霉菌,敏感性,生理影响

来源: 华中农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑,农业科技

专业: 生物学,有机化工,农业基础科学,植物保护,植物保护

单位: 华中农业大学

基金: 现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-26,国家自然科学基金(31371964)“杀菌剂对核盘菌低剂量刺激作用的研究”项目

分类号: TQ455.4;S432.44

DOI: 10.27158/d.cnki.ghznu.2019.000226

总页数: 69

文件大小: 4458K

下载量: 112