超声功率对胰蛋白酶的酶活性与结构变化的影响

论文摘要

为研究超声功率引起胰蛋白酶的结构变化与酶活力之间的关系,研究了不同的超声功率对胰蛋白酶活力、热稳定性、酶解反应动力学和热力学参数的影响,并采用紫外光谱、傅立叶变换红外光谱和荧光光谱来分析超声功率对胰蛋白酶结构的影响。结果表明:除功率300,350 W外,胰蛋白酶活性与对照相比有显著提高。80℃处理时,在功率300,350 W时的胰蛋白酶热稳定性有显著性提升。20℃酶解时75 W处理的胰蛋白酶的反应速率最快。200 W处理时胰蛋白酶的表观活化能最小,150,200 W处理时胰蛋白酶的活化焓和活化熵与对照相比显著降低,75～250 W处理时胰蛋白酶的吉布斯自由能与对照相比无明显差异。光谱分析表明,超声功率不改变胰蛋白酶的肽键含量,然而显著改变其二级结构。超声功率诱导胰蛋白酶变性过程中,在200 W出现1个中间体,且中间体状态的胰蛋白酶的有序性高,具有高酶活和反应速率。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 主要试验仪器
•   1.3 试验方法
•     1.3.1 试剂配制
•     1.3.2 酶活测定方法
•     1.3.3 超声波对胰蛋白酶的处理方法
•     1.3.4 超声波对胰蛋白酶热稳定性的处理方法
•     1.3.5 超声波对胰蛋白酶动力学参数的影响
•       1.3.5. 1 超声处理方法
•       1.3.5. 2 化学反应速率常数的计算
•     1.3.6 超声波对胰蛋白酶热力学参数的影响
•       1.3.6. 1 胰蛋白酶的处理方法
•       1.3.6. 2 活化能、活化焓、活化熵和活化吉布斯自由能的计算
•     1.3.7 肽键紫外吸收光谱
•     1.3.8 傅里叶变换红外光谱
•     1.3.9 荧光相图法表征超声波诱导的中间体结构
• 2 结果与分析
•   2.1 超声功率对胰蛋白酶活性的影响
•   2.2 超声功率对胰蛋白酶热稳定性的影响
•   2.3 超声功率对胰蛋白酶酶解反应动力学参数的影响
•   2.4 超声功率对胰蛋白酶酶促反应热力学参数的影响
•   2.5 超声功率对胰蛋白酶结构的影响
•     2.5.1 超声功率对胰蛋白酶220 nm紫外吸收光谱的影响
•     2.5.2 超声功率对胰蛋白酶傅立叶变换红外光谱的影响
•   2.6 超声功率诱导胰蛋白酶产生中间体结构
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 黄姗芬,马海乐,杨雪,王禹程,赵丽霞,李云亮

关键词: 超声功率,胰蛋白酶,酶学性质,结构,中间体

来源: 中国食品学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江苏大学食品与生物工程学院

基金: 国家863计划项目(2013AA102203)

分类号: TS201.25

DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.07.018

页码: 138-145

总页数: 8

文件大小: 366K

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