PI3K/Akt/GSK-3β通路介导ABC转运蛋白调控人结肠癌HCT-15细胞多药耐药

论文摘要

目的:研究PI3K/Akt信号通路是否通过下游糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）途径调控ABC转运蛋白的表达参与人结肠癌HCT-15细胞的多药耐药。方法:选用人结肠癌HCT-15细胞为实验对象,分别采用GSK-3β抑制剂（HY-19807）和PI3K/Akt通路抑制剂（HY-13898）处理细胞。CCK-8法检测奥沙利铂对细胞的半数抑制浓度,计算抑制率及耐药指数。Western blot法检测细胞内Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK3β-Ser9及ABC转运蛋白（P-gp和MRP-2）的水平。RT-qPCR法检测各组细胞内ABC转运蛋白mRNA的表达变化。流式细胞术检测不同抑制剂对细胞周期的影响。结果:应用GSK-3β抑制剂HY-19807处理后的HCT-15细胞,其奥沙利铂半数抑制浓度较对照组明显上升,并出现p-GSK3β-Ser9、P-gp和MRP-2蛋白水平的上调（P<0.05）,Akt及p-Akt的蛋白水平变化不明显（P>0.05）;RT-qPCR结果同样为ABCB1和ABCC2的mRNA表达量升高（P<0.01）;同时细胞周期检测结果显示HY-19807处理能够促进HCT-15细胞由G1期向S期过渡,细胞增殖旺盛。而应用PI3K/Akt通路抑制剂HY-13898作用于HCT-15细胞后,其奥沙利铂半数抑制浓度较对照组下降,并出现p-GSK3β-Ser9、p-Akt、P-gp和MRP-2的蛋白水平下调（P<0.01）;RT-qPCR检测结果同样为ABCB1和ABCC2的mRNA表达量降低（P<0.01）;同时出现G1期延长,细胞由G1期向S期过渡受到抑制,细胞的增殖受到抑制。各实验组总GSK-3β蛋白表达一致。结论:PI3K/Akt信号通路通过调控GSK-3β的磷酸化水平,改变ABC转运蛋白的表达,参与结直肠癌细胞的增殖与多药耐药。

论文目录

• 材 料 和 方 法
•   1 材料
•   2 方法
•     2.1 细胞培养
•     2.2 Western blot检测蛋白水平
•     2.3 CCK-8法检测细胞生长情况
•     2.4 RT-qPCR法检测mRNA的表达
•     2.5 细胞周期分布的检测
•   3 统计学处理
• 结 果
•   1 Western blot实验结果
•   2 HCT-15细胞应用不同抑制剂后对奥沙利铂敏感性的影响
•   3 RT-qPCR实验结果
•   4 细胞周期分布的变化
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 袁亚男,严晓丽,黄艳洁,杜梦楠,郑纪宁

关键词: 结直肠癌,多药耐药,糖原合成酶激酶,转运蛋白,信号通路

来源: 中国病理生理杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 承德医学院病理学与病理生理学教研室

基金: 河北省高校重点学科建设资助项目(No.031412)

分类号: R735.3

页码: 2201-2207

总页数: 7

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