SUMO融合系统高效表达可溶性IBDV NB株VP2 S-P域蛋白

论文摘要

鸡传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus, IBDV）导致机体出现免疫抑制。VP2是IBDV主要保护性抗原表位的结构蛋白,Shell域和Projection域位于IBDV VP2蛋白的胞外区和跨膜区,包含VP2主要的抗原位点。前期研究在Shell域筛选到能够与IBDV多抗结合的多肽。因此,本研究利用PCR扩增Shell域和Projection域的基因,添加小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier, SUMO）作为标签,构建SUMO系统高效表达系统,诱导表达获得VP2 Shell域和Projection域的可溶性融合蛋白,命名为SUMOVP2-S-P。SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白。SDS-PAGE结果显示,出现与预期蛋白大小相符合的可疑条带;Western blotting鉴定结果显示,SUMO-VP2-S-P重组蛋白能够与His单抗特异性结合。初步结果表明,SUMO-VP2-S-P重组蛋白为我们需要的目的蛋白,为后期蛋白纯化建立IBDV抗体快速检测方法提供材料基础。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 S-P域基因的获得
•   1.2 目的基因的PCR和酶切鉴定分析
•   1.3 重组表达质粒PCR和酶切鉴定分析
•   1.4 重组表达菌株PCR及酶切鉴定
•   1.5 VP2-S-P重组蛋白的表达和鉴定
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 主要试剂
•   3.2 引物设计和合成
•   3.3 pMD-VP2质粒的提取
•   3.4 VP2-S-P基因的PCR扩增
•   3.5 重组质粒pMD-VP2-S-P的构建
•   3.6 重组表达质粒pET-28a-SUMO-VP2-S-P的构建
•   3.7 重组表达菌株的制备
•   3.8 重组表达菌株的诱导表达
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 朱艳平,邢瑞林,李润芷,何勇,申一兰,王玲玲,闫占鹏,任鹏举,徐若楠,岳锋,李鹏,王选年

关键词: 传染性法氏囊病病毒

来源: 基因组学与应用生物学 2019年09期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 新乡学院生命科学技术学院,郑州大学生命科学学院,河南科技学院动物科学学院,河南师范大学生命科学技术学院,河南科技大学动物科技学院

基金: 国家自然基金(3167131497),新乡学院青年骨干教师项目(GGJS2016-06),新乡学院科技创新团队项目(XXUTD20170106,XXUTD20170107),新乡市科技创新平台项目(CP1311)共同资助

分类号: S852.4;S852.65

DOI: 10.13417/j.gab.038.003929

页码: 3929-3934

总页数: 6

文件大小: 1096K

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