导读:本文包含了逆转录聚合酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:逆转录,病毒,定量,荧光,实时,链式反应,菜豆。
逆转录聚合酶论文文献综述
张菊侠,杨万福[1]（2019）在《基于85B mRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应对肺结核分枝杆菌感染的诊断价值》一文中研究指出目的探讨痰液样本中检测结核分枝杆菌(MTB)85B mRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对MTB感染的诊断价值。方法分别纳入2016年1月至2016年12月陕西省结核病防治院经痰培养法(BACTEC MGIT 960系统)确诊为MTB阳性患者60例为试验组,60例无MTB感染的健康人为对照组。提取痰液样本核酸,分别采用TaqMan法检测MTB基因中编码16S rRNA的DNA序列和RT-qPCR法检测MTB的85B mRNA,比较两种方法的诊断效能(敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性)。结果 TaqMan法诊断MTB感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为93.3%、83.3%、84.9%、92.6%和88.3%;RT-qPCR法分别为98.3%、95.0%、95.2%、98.3%和96.7%。通过二元Logistics回归分析证实基于85B mRNA的RT-qPCR法对MTB感染鉴别能力更强(OR=19.924,95%CI:5.364～73.012,P <0.001)。结论基于结核分枝杆菌85B mRNA的RTqPCR方法能够快速、有效诊断MTB感染。(本文来源于《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》期刊2019年04期）
张阳,孙涛,徐聪林,周冲[2]（2019）在《登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价》一文中研究指出目的建立快速简便的登革病毒检验方法对控制登革热疫情至关重要。方法本研究首次建立了一种登革病毒的RT-RPA-LFD检测技术,结果本研究建立的RT-RPA-LFD检测技术能同时检测四种血清型的登革病毒,具有较好的重复性,特异性高,对乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒、黄热病毒和塞卡病毒没有交叉检测,并且具有较高的检测灵敏度,对四种血清型的登革病毒检测限都低至10拷贝/反应。结论综合考虑其快速性和操作简便性,RT-RPA-LFD是一种非常有前景的登革病毒一线检测技术。(本文来源于《口岸卫生控制》期刊2019年03期）
马磊,曾繁文,丛锋,袁文,朱余军[3]（2019）在《小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立》一文中研究指出小鼠是科学研究中使用最多的实验动物,小鼠诺如病毒(MNV)是试验小鼠感染率最高的病毒性病原,因此MNV感染小鼠将影响研究结果,及时对小鼠健康状态进行监测必不可少。本研究根据逆转录重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA),通过引物探针的筛选,建立了检测MNV的RT-RPA方法。该方法具有较好的敏感性和特异性,通过荧光扩增曲线判定样本中是否含有MNV,在20 min内即可实现样本的检测。将该方法应用于临床样本的检测,结果显示32个样本中有6个阳性,和RT-qPCR检测结果总符合率达到97%。该方法的建立对于试验小鼠的日常病原监测和MNV流行病学研究具有重要意义。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年05期）
李楠,王佳慧,李凤琴,江涛[4]（2018）在《不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用》一文中研究指出目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 ,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoV GⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法 ;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoV GⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的检测,饮用水被NoV GⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。(本文来源于《中国食品卫生杂志》期刊2018年06期）
张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬[5]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒》一文中研究指出菜豆荚斑驳病毒(bean pod mottle virus,简称BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物,建立快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,简称RT-RPA)技术用于对BPMV的检测。根据BPMV基因组的保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,简称RPA)技术特异性引物,对BPMV、南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus,简称SBMV)、大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,简称SMV)、南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,简称Ar MV)及烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,简称TRSV)共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,以验证RT-RPA方法的灵敏性。结果表明,建立的RT-RPA检测方法能够从BPMV样品中检测到198 bp的特异性条带,且仅需在40℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;特异性验证试验表明,除BPMV能检测到特异性条带外,其他4种病毒SBMV、SMV、Ar MV、TRSV均未检测到特异性条带,证明该方法特异性好; RT-RPA检测BPMV的灵敏度达到10-4稀释度,说明所建立的RT-RPA方法灵敏性高。综上所述,建立的RT-RPA方法检测BPMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年21期）
袁俊杰,魏霜,龙阳,马新华,杨卓瑜[6]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增技术(RT-RPA)检测大豆花叶病毒》一文中研究指出大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种在全世界广泛分布并且破坏性极大的植物病毒,可以导致大豆产量骤减以及种质的衰退,为此,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),利用该技术可以快速、准确、有效地检测大豆中携带的SMV。根据Gen Bank数据库中SMV的外壳蛋白基因序列,设计RPA特异性引物,采用SMV、BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,验证RT-RPA方法的灵敏性。结果显示,建立的RT-RPA检测方法能够从SMV样品中检测到154 bp的特异性条带;特异性验证试验表明除SMV能检测到特异性条带以外,其他4种病毒BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV均未检测到条带;RT-RPA检测SMV的灵敏度达到10-4稀释度。综上所述,本研究建立的RT-RPA方法检测SMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《检验检疫学刊》期刊2018年02期）
张天宇[7]（2016）在《DNA聚合酶和逆转录酶对双脱氧鸟苷叁磷酸的分子识别研究》一文中研究指出病毒对人体细胞的感染主要体现为持续性的大量复制,病毒复制受控于其基因组。因此,控制病毒基因组的复制在病毒感染治疗领域尤为重要。核酸类药物做为病毒病治疗的重要药物之一,其主要作用机制是控制病毒核酸的复制,从而降低感染水平,使机体恢复抵抗力和正常功能。核酸类药物研究的一个重要方面即是评估各种修饰后的核苷分子对不同聚合酶的作用效果,因此需要建立相应的检测方法。本项研究主要采用荧光定量PCR技术检测了体外DNA聚合酶和反转录酶对合成的L/D型的双脱氧鸟苷酸识别和掺入情况,筛选具有较好抗病毒活性的先导化合物或核酸类药物,为进一步考察其在生物体内的状况提供临床前基础数据,同时建立异核苷酸掺入检测的方法。实验表明,L/D型双向脱氧鸟苷叁磷酸能够被DNA聚合酶识别,并且随着掺入比例的增加,达到了抑制其扩增的效果。其中L型掺入范围为0.8mmol/L~1.6mmol/L,并随着掺入量的增加,扩增效率逐渐降低,当掺入浓度超过1.6mmol/L时,DNA扩增完全被抑制;D型掺入范围为1.6mmol/L~3.2mmol/L,随着掺入量的增加,扩增效率逐步降低,当掺入浓度超过3.2mmol/L时,扩增完全被抑制。以病毒DNA聚合酶和HIV逆转录酶为靶点,针对L/D型双脱氧鸟苷酸开展酶识别研究,有望发现新结构类型抗HIV和抗HBV感染的药物,并阐明作用机制,对控制和治愈病毒性传染疾病的发生具有深远的意义。(本文来源于《长春师范大学》期刊2016-05-01）
唐海淑,崔惠,宁静,翟啸虎,甫尔哈提·吾守尔[8]（2015）在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用》一文中研究指出目的应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定,为进行常规rRT-PCR型内鉴定方法奠定基础。方法采用世界卫生组织(WHO)推荐的rRT-PCR方法,对WHO发放的PV株和实验室分离的PV株进行型内鉴定(ITD)和疫苗衍生PV株(VDPV)筛选。结果 ITD rRT-PCR的实验结果与毒株的VP1编码区序列测定结果完全相符,VDPV rRT-PCR的结果与VP1编码区序列测定结果大部分相符,但有2株Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗类似株(SL)PV2-SL被错判为非疫苗类似株(NSL),假阳性率为3.03%;1株Ⅲ型SL被错判为NSL,假阳性率为1.92%。结论在新疆脊髓灰质炎实验室rRT-PCR可以应用于脊髓灰质炎病毒的常规监测及型内鉴定。(本文来源于《疾病预防控制通报》期刊2015年02期）
姜红涛,姚秀林[9]（2015）在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的比较》一文中研究指出目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法采用实时荧光定量RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离2种方法 ,同时对流感监测点送检的80份疑似流感标本检测流感病毒。结果细胞培养病毒分离的阳性数为26份,实时荧光定量RT-PCR的阳性数为36份,好=8.1,P<0.005。结论 通过该实验,验证了实时荧光定量RT-PCR的确快速敏感,适用于实验室快速诊断。(本文来源于《中外医疗》期刊2015年08期）
程民,沈国栋,卞庚,徐婷娟,徐维平[10]（2014）在《人乳腺癌特异性基因1 mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用》一文中研究指出目的建立人乳腺癌特异性基因1(BCSG1)mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测试剂盒,并评价其在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用价值。方法优化试剂盒中各组分的浓度、确定试剂盒的稳定性、灵敏度及特异性,并检测外周血样品中BCSG1 mRNA的表达水平。结果优化了试剂盒中的引物、探针,成功制备了定值标准品,通过设立阴、阳性质控品的方法,解决了试剂盒的特异性、灵敏性、准确性及质量控制等关键技术问题,特异度及准确性均为95%以上,灵敏度为100拷贝/ml(全血)。外周血标本中BCSG1 mRNA的检测结果为,12例临床确诊已转移的乳腺癌患者均为阳性,21例临床未确诊转移的乳腺癌患者中12例为阳性,其余9例为阴性,15例乳腺良性疾病患者、10例正常人均为阴性。结论建立的BCSG1 mRNA实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有很高的临床应用价值,可用于检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达量,检测结果可作为乳腺癌患者诊疗过程中的重要监测指标。(本文来源于《中国临床保健杂志》期刊2014年01期）
逆转录聚合酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立快速简便的登革病毒检验方法对控制登革热疫情至关重要。方法本研究首次建立了一种登革病毒的RT-RPA-LFD检测技术,结果本研究建立的RT-RPA-LFD检测技术能同时检测四种血清型的登革病毒,具有较好的重复性,特异性高,对乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒、黄热病毒和塞卡病毒没有交叉检测,并且具有较高的检测灵敏度,对四种血清型的登革病毒检测限都低至10拷贝/反应。结论综合考虑其快速性和操作简便性,RT-RPA-LFD是一种非常有前景的登革病毒一线检测技术。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
逆转录聚合酶论文参考文献
[1].张菊侠,杨万福.基于85BmRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应对肺结核分枝杆菌感染的诊断价值[J].中华实验和临床感染病杂志(电子版).2019
[2].张阳,孙涛,徐聪林,周冲.登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价[J].口岸卫生控制.2019
[3].马磊,曾繁文,丛锋,袁文,朱余军.小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立[J].中国兽医学报.2019
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[5].张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬.一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒[J].江苏农业科学.2018
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[7].张天宇.DNA聚合酶和逆转录酶对双脱氧鸟苷叁磷酸的分子识别研究[D].长春师范大学.2016
[8].唐海淑,崔惠,宁静,翟啸虎,甫尔哈提·吾守尔.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用[J].疾病预防控制通报.2015
[9].姜红涛,姚秀林.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的比较[J].中外医疗.2015
[10].程民,沈国栋,卞庚,徐婷娟,徐维平.人乳腺癌特异性基因1mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用[J].中国临床保健杂志.2014
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