龙眼胚性愈伤组织DlCK2-α基因克隆、亚细胞定位及其表达特性分析

论文摘要

【目的】克隆龙眼DlCK2-α基因,并对其表达特性进行分析。【方法】该试验通过RACE技术对DlCK2-α进行克隆,并在此基础上进行生物信息学分析和亚细胞定位以及蛋白质结构和功能的预测。对调控DlCK2-α的miRNA及顺式作用元件进行预测,并进行亚细胞定位观察。采用QRT-PCR技术对其在龙眼体胚不同阶段胚性培养物和不同光质的表达特性进行研究。【结果】DlCK2-α基因含有开放阅读框1 002 bp,共编码333个氨基酸（GenBank登录号:MG181952）;DlCK2-α属亲水性蛋白,不含有信号肽和跨膜结构域,但是含有一个典型的STKcCK2alpha保守结构域,预测含有32个磷酸化位点;miRNA预测结果显示,共有miR2615a等10条miRNA可能调控DlCK2-α;顺式作用元件预测显示多个光响应与应激响应元件可能调控DlCK2-α;GFP荧光定位观察显示其定位于细胞质。QRT-PCR结果显示,DlCK2-α在黑暗条件下的表达量高于光处理下的表达量。在体胚不同发育阶段,DlCK2-α在不完全胚性紧实结构中的表达量最低,球形胚中表达量最高,整体呈先降后升趋势。【结论】DlCK2-α基因在龙眼光信号转导和体胚发育调控中发挥重要作用。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 RNA提取
•     1.2.2 DlCK2-α基因的克隆
•     1.2.3 DlCK2-α基因的生物信息学分析
•     1.2.4 亚细胞定位
• 2 结果与分析
•   2.1 DlCK2-α基因的克隆
•   2.2 DlCK2-α基因的生物信息学分析
•   2.3 调控DlCK2-α基因表达的miRNA和顺式作用元件预测分析
•   2.4 亚细胞定位分析
•   2.5 实时荧光定量PCR分析
•     2.5.1 龙眼体胚发育不同阶段DlCK2-α的表达量分析
•     2.5.2 不同光质处理下的龙眼愈伤组织中DlCK2-α表达量分析
• 3 讨论
•   3.1 DlCK2-α参与龙眼胚性愈伤组织光信号转导
•   3.2 DlCK2-α参与龙眼体胚发育调控
•   3.3 DlCK2-α参与龙眼胚性愈伤组织抗逆响应

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李珊珊,徐小萍,陈旭,陈晓慧,李汉生,林玉玲,赖钟雄

关键词: 龙眼,酪蛋白激酶,基因克隆,亚细胞定位

来源: 果树学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 园艺

单位: 福建农林大学园艺植物生物工程研究所

基金: 国家自然科学基金(31572088),福建省重大科技专项专题(2015NZ0002-1),科技创新专项基金(CXZX2017189,CXZX2018076)

分类号: S667.2

DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20190175

页码: 1638-1647

总页数: 10

文件大小: 1717K

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