吉林市中心医院吉林省吉林市132011
【摘要】目的：探讨对去白细胞悬浮红细胞的血液标本，建立一种有效的残留白细胞定量检测方法的检测效能。方法：选取100分去白细胞悬浮红细胞标本，对血液标本残留的白细胞定量分别应用流失细胞仪与ADAM-r白细胞计数系统检测，进行检测结果间的平行对照。结果：检测结果显示，应用流式细胞仪检测最小值、最大值分别为0.18%、92.23%，25%～75%可信区间为2.41%～23.69%，ADAM-r白细胞计数系统检测检测最小值、最大值分别为0.04%、715.56%，25%～75%可信区间为2.66%～91.17%，两种检测方法对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：对去白细胞悬浮红细胞血样，应用ADAM-r白细胞计数系统定量检测血液中残留的白细胞有显著价值。
【关键词】去白细胞悬浮红细胞；残留白细胞；定量检测
在血常规检验的过程，当前常借助滤除白细胞计数获取血液标本。然而受滤除技术水平缺陷的影响，常使得血液中残余少量白细胞，白细胞残留的小血液会对检验借助的准确性造成影响，因此在血常规检验过程，提倡定量检测去白细胞悬浮红细胞中残余的白细胞定量[1]。白细胞残留检测中通常是使用流失细胞仪测定，然而该技术检测操作比较繁琐，且检测设备及材料也比较昂贵，为此寻找一种更有效及科学的检测方法也成为临床中研究的重点[2]。近年来，本院在对去白细胞悬浮红细胞参与的白细胞定量检测中，推广使用ADAM-r白细胞计数系统的检测方式，取得满意的效果，报告如下。
1材料与方法
1.1材料
选择当前制备的100份去白细胞悬浮红细胞标本待检，去白细胞悬浮红细胞的留取方式主要是采集血液标本后，即刻离心并应用滤除白细胞技术获取血液待检。
1.2残留白细胞定量检测
1.2.1流失细胞仪
使用美国BD公司生产的流失细胞仪，检测100份血液样本中的残留白细胞情况。具体的方法是选取100μL样品，向其中加入30μL的CD45抗体，观察30min后再次加入3ml的溶血素，再次反应10min，然后置于3000r/min的离心机中持续离心5min，静置一段时间获取上层清液，清液中加500μLPBS上机待检，借助CELLQuest软件对结果进行处理。
1.2.2ADAM-r白细胞计数系统
选取制备的材料待检，检测过程中主要以荧光着色及显微镜观察，以该技术作为基础，使用碘化丙啶染色液同细胞核相结合，LED激光照射样本后采集图像，图像分析精确结果。然后选取100μL的样品，加入400μLr-Soiution混合，取100μL混匀液并加入r-Slide计数板，静置5min后置入ADAM-r白细胞计数系统中获取检测结果，结果最终输入到Excle中并打印出分析。
1.3观察指标
比较两种不同的检验方式检验的可信度，评价ADAM-r白细胞计数系统的检测效果。
1.4统计学方法
使用SPSS20.0软件做统计学结果分析，计数资料使用卡方检验。
2结果
100份血液标本在行流失细胞仪检测上，最小值为0.18%，最大值为92.23%。25%～75%的可信区间流失细胞仪为2.41%～23.69%；而样本经ADAM-r白细胞计数系统，最小值为0.04%，最大值为715.56%，可信区间为2.66%～91.17%。ADAM-r白细胞计数系统最大值、最小值及可信区间的比值上均要明显高于流失细胞仪，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。
3讨论
血常规检验是临床中诊断疾病的重要辅助手段，在检验过程，为了保证检验质量，常使用白细胞滤过技术处理标本，通过将血液中的白细胞滤除，可以保证检验的顺利进行[3]。然而现阶段的白细胞滤过技术并不能完全的达到100%的去除效果，这使得血液中常残留白细胞，残留白细胞可影响最终的检测结果，所以对血液滤除白细胞悬浮的红细胞，提倡采取定量检测的方式进行残留白细胞的检测。
在具体对残留白细胞的检测过程，常规是采用流失细胞仪的检测方式，该技术可快速的测量及显示悬浮在液体中的分散细胞生物及化学特征参量，并根据预选参量范围将指定细胞亚群分选出，然而流式细胞仪仅可测量一个细胞总核酸量及总蛋白量，对白细胞检测的效能较低。相比之下，使用ADAM-r白细胞计数系统有更好的效果，该技术在重复性试验结果中显示若白细胞数量在2～5个/μL的范围，变异系数为19.1，白细胞数量如若在50～100个/μL，变异系数在3.8～4.1，这提示对残留白细胞定量检测，该系统具有良好的诊断效能。此外ADAM-r白细胞计数系统还具有操作简单、快速及准确率高等特点，这样对血常规检验质量的提高有重要意义。在本研究中，对比使用流失细胞仪、ADAM-r白细胞计数系统对去白细胞悬浮红细胞中残留白细胞定量检测的效果，结果显示在最小值、最大值及25%～75%可信区间范围，应用ADAM-r白细胞计数系统要明显高于流失细胞仪检测，这也提示出新型检测技术的应用价值显著。
综上所述，血常规检验过程，针对去白细胞悬浮红细胞血样标本，应用ADAM-r白细胞计数系统定量检测残留白细胞是一种方便且准确的检测手段，因此值得在临床中大力推广使用。
【参考文献】
[1]刘晓洋,,湖南省娄底市中心血站,刘晓洋,等.贮存温度和时间对悬浮红细胞白细胞滤除效果的影响[J].临床输血与检验,2016,4(28):75-76.
[2]沙枫.全血保存时间对全血成分及少白细胞悬浮红细胞中残留白细胞数量的影响[D],2016,8(28):79-80.
[3]何红,蔡兰,李玉英,等.不同制备工艺对去白细胞悬浮红细胞质量的影响[J].检验医学与临床,2016,13(10):1357-1358.