扩增失败论文-罗睿,张大明

扩增失败论文-罗睿,张大明

导读:本文包含了扩增失败论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:连续PCR,异常产物,非全长链合成,干扰效应

扩增失败论文文献综述

罗睿,张大明[1](2007)在《非全长链合成导致连续聚合酶链式反应(PCR)扩增失败和复杂产物的形成》一文中研究指出在进行连续PCR(以产物为模板进行多轮次的连续重复PCR扩增)实验时,我们观察到了一种新的异常现象——用不同来源的模板连续PCR扩增不同长度的靶序列最终都会导致扩增失败,表现为在常规琼脂糖电泳检测时特异产物条带的消失和不能泳动出点样孔之复杂异常产物的出现.连续PCR扩增失败的时期依扩增靶序列的长度不同而不同,越长的靶序列在连续PCR中扩增失败的时期越早.扩增得到的复杂产物主要由连续分布的小于靶序列长度的具有相当程度多样性的非全长链组成.复杂产物在内部具有局部的双链区域和大量的单链区域而在外部具有单链分支结构,能够被单链特异的S1核酸酶消化,但是不能被双链特异的限制性内切酶消化.人工处理完整双链形成的非全长链长产物与完整双链以不同比例混合后作为模板进行连续PCR,结果表明同源的非全长链成分对PCR扩增有严重的干扰作用.已有的证据表明PCR扩增过程中形成的非全长链成分是导致这种异常现象的关键因素,多个不同长度的非全长链复性形成“杂种分子”最终表现为复杂产物.连续PCR扩增失败、PCR介导重组和长片段PCR难于操作有共同的产生基础——扩增过程中非全长链成分的产生.任何降低PCR扩增过程中非全长链成分产生的措施,特别是聚合酶忠实性的提高,都能缓解异常扩增产物的出现和利于长片段PCR操作.(本文来源于《中国科学(C辑:生命科学)》期刊2007年03期)

鞠瑞青,林乾飞,杨帆,于江虹,于晓丽[2](2006)在《浅谈HLA分型实验中PCR-SSP扩增失败的原因及解决方法》一文中研究指出目的探讨HLA分型实验中PCR扩增失败的原因及解决方法。方法采用pel-freez试剂盒法提取了3391名健康造血干细胞志愿者的DNA,要求DNA浓度在(75- 120)ng/μl,纯度在1.65-1.90,并用pel-freez提供的PCR- SSP分型试剂盒对这3391份DNA样本进行HLA基因分型实验。结果在3391份DNA样本中,有137人份的292 个引物孔扩增失败,其中干孔49个(16.8%);非特异性扩(本文来源于《中国输血协会第四届输血大会论文集》期刊2006-05-01)

王天云,臧卫东,赵清赞,王建人,薛乐勋[3](2004)在《2例PCR扩增失败的分析与探讨》一文中研究指出根据GenBank报道的序列设计引物,PCR扩增克隆玉米乙醇脱氢酶1(Adh)核基质结合区序列及大鼠脑啡肽基因。扩增的序列电泳分析条带与预期的片段大小基本一致,但测序分析均为非目的片段,为非特异PCR产物,一例为非靶序列间的重复序列配对造成,一例为一侧引物单独引起,重新设计引物,采用巢式PCR获得了目的基因片段。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2004年06期)

杨丽华,张云,刘泽军[4](2003)在《MSP扩增失败的原因分析及解决方法》一文中研究指出DNA甲基化是一种影响基因外表达的机制 ,并与肿瘤发生有着密切的联系。DNA甲基化状态改变是致癌作用的一个关键因素 ,是肿瘤抑制基因的失活方式之一 ,它通过基因机制和基因外机制导致细胞增殖和分化的相关基因表达异常 ,造成细胞失去正常的基因调控而发生恶变形(本文来源于《重庆医学》期刊2003年12期)

张焜和,祝金泉,黄德强,吕农华,黄群[5](2000)在《PCR扩增肠癌组织p53基因失败的原因分析与解决》一文中研究指出分析与解决PCR扩增肠癌组织p53基因时失败的问题,为如何解决PCR技术在科研应用中的问题提供一个实例.方法 经初步分析,将失败原因确定为DNA模板有问题、采用下列方法处理模板再进行PCR反应:用70%乙醇再清洗模板、用新标本重新提取模板、用PCR反应成功与失败的模板配成混合模板.比较PCR成功与失败所用模板的差异,寻找与证实失败的原因.结果 最终发现溶解DNA模板的TE缓冲液浓度过高,使PCR扩增失败,排除之后获得成功.结论 当PCR扩增失败时,不妨从最简单的反应体系的离子环境先找原因.(本文来源于《江西医学检验》期刊2000年03期)

倪星群,吕德坚,伍祥林,陈丽娴,郭景元[6](1999)在《避免生物检材PCR扩增失败的对策》一文中研究指出PCR是一种灵敏的DNA检测技术,但是,在对生物学检材进行个人识别时,仍然有一定数量的检材直接PCR扩增失败。为了有效地进行个人识别,本文分析了扩增失败的原因以及成功扩增的对策(本文来源于《法医学杂志》期刊1999年02期)

倪星群,吕德坚,伍祥林,陈丽娴,陆惠玲[7](1998)在《生物检材PCR扩增失败后的对策》一文中研究指出PCR 是一种灵敏的 DNA 检则技术,但是在对生物学检材进行个人识别时,仍然有一定数量的检材直接 PCR 扩增失败。为了有效地进行个人识别,本文分析了扩增失败的原因,以及成功扩增的对策。(本文来源于《第二次全国法医物证学学术交流会论文集》期刊1998-10-01)

扩增失败论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨HLA分型实验中PCR扩增失败的原因及解决方法。方法采用pel-freez试剂盒法提取了3391名健康造血干细胞志愿者的DNA,要求DNA浓度在(75- 120)ng/μl,纯度在1.65-1.90,并用pel-freez提供的PCR- SSP分型试剂盒对这3391份DNA样本进行HLA基因分型实验。结果在3391份DNA样本中,有137人份的292 个引物孔扩增失败,其中干孔49个(16.8%);非特异性扩

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

扩增失败论文参考文献

[1].罗睿,张大明.非全长链合成导致连续聚合酶链式反应(PCR)扩增失败和复杂产物的形成[J].中国科学(C辑:生命科学).2007

[2].鞠瑞青,林乾飞,杨帆,于江虹,于晓丽.浅谈HLA分型实验中PCR-SSP扩增失败的原因及解决方法[C].中国输血协会第四届输血大会论文集.2006

[3].王天云,臧卫东,赵清赞,王建人,薛乐勋.2例PCR扩增失败的分析与探讨[J].生物技术通讯.2004

[4].杨丽华,张云,刘泽军.MSP扩增失败的原因分析及解决方法[J].重庆医学.2003

[5].张焜和,祝金泉,黄德强,吕农华,黄群.PCR扩增肠癌组织p53基因失败的原因分析与解决[J].江西医学检验.2000

[6].倪星群,吕德坚,伍祥林,陈丽娴,郭景元.避免生物检材PCR扩增失败的对策[J].法医学杂志.1999

[7].倪星群,吕德坚,伍祥林,陈丽娴,陆惠玲.生物检材PCR扩增失败后的对策[C].第二次全国法医物证学学术交流会论文集.1998

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