土壤淡色丝孢真菌稀有物种的挖掘及有生防潜力丝孢菌的筛选

论文摘要

河南地处中纬度地带,是我国的中原地区,地势西高东低,地表形态复杂多样。土壤真菌的多样性是随着土壤类型和植被而变化的。土壤丝孢真菌种类多,分布广,是土壤真菌的一个重要组成部分。河南省是粮食大省,属于气候的中间过渡带,真菌物种资源丰富,真菌资源的研究和挖掘并不充分。为开发和保护我国真菌物种资源,挖掘新物种,进一步完善我国丝孢真菌数据,开发具有抗菌活性的土壤真菌,这对河南省土壤丝孢真菌的多样性研究具有重要的意义。（1）土壤丝孢真菌的收集情况本研究为了挖掘土壤淡色丝孢真菌稀有物种和筛选有抗菌活性的菌株,对河南省的81个县市,及山东、湖北、内蒙古、江苏、云南和安徽的部分地区进行土样采样,样品涉及的有农田土、湿地土、草地土、公园土、山谷土、森林土、果园土、盆景土等生态类型。共采集土样827份,收集菌株743株,分属于26个属,贝叶斯法和最大似然法构建系统发育树,通过多基因（ITS、LSU、rpb2、tef1-α、HIS3、cmdA、tub2）系统发育分析数据和形态学相结合鉴定了 35个已知种,15个新种,涉及的8个新纪录种分属于5个新记录属。（2）生防菌株的初步筛选我们根据已有的研究报道,对分离得到的淡色丝孢真菌进行生防活性的检测。本研究选取Myrothecium-like、Stachybotrys-like、Clonostachys和 这四个类群的菌株（共 66 株）,采用特定培养基室内平板初筛、平板复筛和代谢液培养选出5株（HN17434、HN17556、HN17216、HN17506、HN17479）对小麦根腐病原菌麦根腐蠕孢菌具有抑菌效果的土壤生防真菌,抑制率都在60%以上;本实验针对最终效果好的菌株提取基因组DNA,然后用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增,并进行形态特征观察,经鉴定分别为厥枝顶孢Acremonium pteridii（HN17434）,Albifimbria sp.（HN 17556）,Paramyrothecium sp.（HN17261）,湖北对漆斑霉Paramyrothecium hubeisis（HN17506）,河南葡萄穗霉Stachybotrys henansis（HN17479）。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 1 文献综述
•   1.1 土壤真菌的研究意义
•   1.2 我国丝孢菌分类研究现状及未来
•   1.3 土壤淡色丝孢真菌抗菌活性的研究及作用
•   1.4 分子系统学研究中常用的基因片段
•     1.4.1 ITS基因
•     1.4.2 β-tubulin（β-微管蛋白）
•     1.4.3 EF-1a（延伸因子）
•     1.4.4 RPB2（RNA聚合酶Ⅱ）
•     1.4.5 多基因序列分析
• 2 引言
• 3 材料与方法
•   3.1 土样的采集与菌株来源
•   3.2 试验所用培养基及配方
•   3.3 试验所用仪器与试剂
•     3.3.1 实验所用仪器
•     3.3.2 实验所用试剂
•   3.4 试验方法
•     3.4.1 形态学研究方法
•     3.4.2 分子系统学研究方法
•     3.4.3 靶标病原菌（麦根腐蠕孢菌和辣椒疫霉）土壤生防真菌的分离筛选及鉴定
• 4 结果与分析
•   4.1 土壤淡色丝孢真菌形态学和分子学结果分析
•     4.1.1 枝顶孢属
•     4.1.2 端梗孢属
•     4.1.3 笋顶孢霉属
•     4.1.4 粘帚霉属
•     4.1.5 虫草菌属
•     4.1.6 镰刀菌属
•     4.1.7 Gliocladiopsis
•     4.1.8 棒束孢属
•     4.1.9 玛利亚霉属
•     4.1.10 漆斑霉属及其近似属
•     4.1.11 淡紫紫孢霉属
•     4.1.12 粘帚霉属
•     4.1.13 葡萄穗霉属及其近似属
•     4.1.14 周刺座霉属
•   4.2 土壤淡色丝孢真菌生防菌株抗菌活性的研究结果与分析
•     4.2.1 生防菌株初筛结果与分析
•     4.2.2 生防菌株复筛结果与分析
•     4.2.3 代谢液培养结果
• 5 结论与讨论
•   5.1 结论
•     5.1.1 土壤淡色丝孢真菌物种多样性
•     5.1.2 土壤淡色丝孢真菌抗菌活性初步研究
•   5.2 讨论
•     5.2.1 淡色丝孢菌与暗色丝孢菌
•     5.2.2 土壤淡色丝孢真菌的基因片段的选择
•     5.2.3 分子生物学的优势
•     5.2.4 土壤淡色丝孢真菌的研究意义
•     5.2.5 研究中存在的不足
• 参考文献
• ABSTRACT

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 翟妮平

导师: 耿月华,张猛

关键词: 土壤丝孢真菌,形态学,多基因分子系统学分析,抗菌活性,新种

来源: 河南农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,农业基础科学,农艺学

单位: 河南农业大学

分类号: S154.3

DOI: 10.27117/d.cnki.ghenu.2019.000307

总页数: 109

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