导读:本文包含了逆转录病毒载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:逆转录,病毒,载体,利多,感受器,阳离子,分子生物学。
逆转录病毒载体论文文献综述
杜文敬,梁洋,朴善花,王春生,安铁洙[1]（2018）在《逆转录病毒载体介导的蜘蛛拖丝蛋白转基因小鼠的制备》一文中研究指出为了建立通过转基因动物获得蜘蛛拖丝蛋白的方法,试验利用前期构建的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)逆转录病毒载体侵染小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),通过嵌合体法制备转基因小鼠,并用PCR技术进行鉴定。结果表明:成功获得嵌合体小鼠;目的基因2S-IRES-EGFP已整合入F0代及F1代嵌合体小鼠的鼠尾基因组中。说明利用逆转录病毒可成功获得表达蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)的转基因小鼠。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年17期）
罗洪波,向道康,蔡鸿,冯超,向龙[2]（2017）在《组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体兔左心耳内靶向溶栓研究》一文中研究指出目的观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用。方法 30只兔建立左心耳内Dacron片植入血栓模型,随机分为PLEGFP-N1-tPA治疗组(n=10)、PLEGFP-N1空载体对照组(n=10)、空白对照组(n=10),局部基因转导,于术后2,30d各组1/2动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(confocal)观察所取左心耳组织增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达,体视镜和电视镜观察Dacron片表面血栓情况,免疫印迹(Western blot)、血浆平板和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测所取组织tPA表达、溶栓情况。结果术后2,30d取材,治疗组所取左心耳组织confocal均观察到多而强的EGFP表达,Plegfp-N1对照组也有EGFP表达,但空白对照组无EGFP表达。30个Dacron片加未植入组5个Dacron片共35个,在体视镜(×160)和电视镜(×500)下观察,未植入组和治疗组Dacron片表面均无血栓,对照组表面均有血栓。治疗组所取静脉Western blot检测均有外源tPA表达,对照组未检测到。血浆平板显示:治疗组均有大的溶解圈,有明显溶栓作用,对照组没有。结论 Plegfp-N1-tPA局部基因转导能有效阻止外源移植物表面血栓形成。(本文来源于《贵州医药》期刊2017年11期）
农恬颖,杨小玲,崔佳瑜,杨素芳,朱鹏[3]（2017）在《水牛bFGF基因的克隆、逆转录病毒载体的构建和鉴定》一文中研究指出对水牛碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因进行克隆、序列分析,构建bFGF表达载体,为其在水牛干细胞中的功能研究奠定基础。以水牛胎儿组织为材料提取总RNA,利用逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)克隆得到的bFGF基因编码区序列,进行生物信息学分析,构建表达bFGF的逆转录病毒载体(pMXs-bFGF-IRESGFP),并在293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞(buffalo fetal fibroblast,BFF)上进行重组载体表达鉴定。结果表明,水牛bFGF基因编码区全长468bp,编码155个氨基酸,含有纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族特有的蛋白结构;逆转录病毒载体介导的bFGF基因能在293T细胞和BFF中表达。本研究克隆出水牛bFGF编码序列,构建的逆转录病毒载体能在不同真核细胞中表达bFGF。(本文来源于《中国科技论文》期刊2017年18期）
王丽芬[4]（2017）在《逆转录病毒载体构建过程中的“LTR”和“Ψ”——谈对南通市2014届高叁第一次调研测试第33题的补充》一文中研究指出以剖析逆转录病毒载体构建的一道试题为起点,分析了逆转录病毒基因组中"LTR"和"Ψ"的作用,奠定了逆转录病毒载体构建过程中"LTR"和"Ψ"操作要求的理论基础,这是对试题的必要补充,同时有利于学生对逆转录病毒载体构建过程的全面理解。(本文来源于《中学教学参考》期刊2017年05期）
琚幼婷,卢俊,胡衍辉,陈受琳,蔡俊赢[5]（2016）在《TRPV1基因的shRNA逆转录病毒载体的构建和鉴定》一文中研究指出目的构建针对人瞬态电压感受器阳离子通道,子类V,成员1(TRPV1)基因的p SUPERretro-puro TRPV1逆转录病毒表达载体,感染U87-MG细胞,观测其沉默TRPV1基因的效果。方法利用Ambion在线设计软件设计针对人TRPV1基因的sh RNA干扰序列,克隆到p SUPERretro-puro载体上。对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析。用磷酸钙法制备p SUPERretro-puro TRPV1逆转录病毒,将其感染到U87-MG细胞,经嘌呤酶素筛选阳性克隆后采用荧光定量PCR及Western blotting法检测TRPV1表达。结果经DNA测序和酶切鉴定表明,p SUPERretro-puro TRPV1表达载体构建成功。p SUPERretropuro TRPV1逆转录病毒感染U87-MG细胞后,细胞中TRPV1表达量明显降低。结论成功构建了针对人TRPV1基因的p SUPERretro-puro TRPV1表达载体。p SUPERretro-puro TRPV1能有效下调TRPV1基因在U87-MG细胞中的表达,为将来应用其研究TRPV1在利多卡因致细胞损伤中的作用奠定了基础。(本文来源于《当代医学》期刊2016年32期）
卢俊,琚幼婷,陈受琳,李昌,蔡俊赢[6]（2016）在《TRPV1基因过表达逆转录病毒载体的构建和鉴定》一文中研究指出目的 TRPV1基因过表达逆转录病毒载体的构建和鉴定研究。方法 PCR法扩增TRPV1基因的编码序列,克隆到pBaBe-puro载体上。对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析。用磷酸钙法制备pBaBe-puro-TRPV1逆转录病毒,将其感染到U87-MG细胞,经嘌呤酶素筛选阳性克隆后用荧光定量PCR和Western blot法检测TRPV1表达。结果经DNA测序和酶切鉴定表明,pBaBe-puro-TRPV1表达载体构建成功。pBaBe-puroTRPV1逆转录病毒感染U87-MG细胞后,细胞中TRPV1表达量明显增高。结论成功构建了人TRPV1基因的pBaBe-puro-TRPV1表达载体。pBaBe-puro-TRPV1能有效上调TRPV1基因在U87-MG细胞中的表达,为应用其研究TRPV1在利多卡因致细胞损伤中的作用奠定了基础。(本文来源于《现代医院》期刊2016年06期）
史柳芝,郑倩倩,贺立彩[7]（2016）在《IK4基因突变体与其逆转录病毒载体的构建及在白血病细胞中的表达》一文中研究指出对造血调控中发挥重要作用的IKAROS基因亚型IK4进行突变,并构建重组逆转录病毒表达载体及使其在白血病细胞中表达。采用重迭延伸PCR定点突变技术,成功构建了4个IK4单突变或多突变突变体。将这4个突变体克隆至Pmscvpuro逆转录病毒载体中,构建重组蛋白表达载体。基因测序验证突变序列正确后,将重组逆转录病毒载体与病毒包装质粒VSVG、Gag-Pol共同感染293T细胞,过滤收集病毒上清,将病毒上清转染白血病NB4细胞。用Puromycin对细胞进行筛选,并通过Western印迹法对突变体表达细胞系进行验证。通过重迭延伸PCR法成功构建了4个IK4的定点单突变和定点多突变体,利用逆转录病毒介导的转染方法使IK4的4个突变体在白血病细胞中成功稳定表达,为后续的功能和机制的研究奠定了基础。(本文来源于《中国科技论文》期刊2016年06期）
臧金林,李红梅,方建红,周东风[8]（2016）在《CD59 RNAi逆转录病毒载体转染卵巢癌细胞株A2780的构建》一文中研究指出目的获得携带针对人CD59基因p SUPER retro RNAi逆转录病毒载体的卵巢癌细胞株A2780。方法设计能转录产生靶向CD59小发夹RNA(sh RNA)转染逆转录病毒载体p SUPER retro neo+gfp质粒,构建p SUPER-si CD59重组质粒,将重组质粒导入卵巢癌细胞株A2780内。鉴定转染后细胞株能形成稳定的扩增。结果重组质粒经PCR凝胶电泳、核苷酸测序证实与设计序列一致;重组质粒转染卵巢癌细胞株A2780,可稳定表达绿色荧光蛋白。结论携带针对人CD59基因p SUPER retro RNAi逆转录病毒载体的卵巢癌细胞株A2780的建立为深入进行肿瘤细胞研究奠定了基础。(本文来源于《中国肿瘤外科杂志》期刊2016年01期）
张军峰,史利利,张力,杨蓬勃,张建水[9]（2016）在《缺氧调控表达的NT-3逆转录病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建与鉴定含有5个拷贝缺氧反应元件(five copies of hypoxia responsive elements,5HRE)的缺氧调控表达的神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的逆转录病毒载体。方法用PCR、酶切和连接等分子克隆技术将5HRE和人来源NT-3片段克隆入逆转录病毒载体pLNCX中,构建重组逆转录病毒穿梭质粒pLNCX-5HRE-SV40-NT3-IRES-EGFP。经PT67包装细胞包装、高速离心纯化和浓缩等方法,获得逆转录病毒RV-5HRE-NT3;用逆转录病毒感染NIH 3T3细胞48h后,流式细胞仪检测并计算出病毒滴度。结果成功构建了重组逆转录病毒载体质粒pLNCX-5HRE-SV40-NT3-IRES-EGFP,并获得相应的逆转录病毒RV-5HRE-NT3,经过高速离心纯化和浓缩后,其滴度可达9.1×10~6 cfu/mL。结论成功构建了缺氧调控表达的NT-3逆转录病毒载体,为研究外源基因的缺氧调控特异性表达奠定了工作基础。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2016年02期）
卢晶,陈锋,徐珍,张灵灵,徐鹏[10]（2015）在《逆转录病毒载体表达的膜型免疫球蛋白介导B细胞受体细胞信号传导》一文中研究指出B细胞的激活是通过B细胞受体与其特异性抗原的结合引起,并引发后续的信号级联反应.深入了解这一重要事件的分子机制是免疫学研究的重要目标.嵌合B细胞受体是B细胞信号功能研究的有效工具.然而,这一方法仅适用于工具细胞,不能被用于体内研究.本研究构建了能同时表达针对特异性抗原的膜型免疫球蛋白的重链和轻链的逆转录病毒载体,通过逆转录病毒载体将这一膜型免疫球蛋白表达在原始B淋巴细胞膜上.结果证实,通过逆转录病毒载体表达的膜型免疫球蛋白能引发B细胞受体的信号转导,可引发B细胞受体下游Syk和Erk1/2蛋白的磷酸化.本研究进一步表明,B淋巴细胞表达的膜型免疫球蛋白在体外和体内均能与特异性抗原结合并导致细胞增殖.因此,本研究提供了一个能在体外和体内快速方便地分析B细胞受体下游信号级联反应的方法,这一方法将有助于更深入地研究与B细胞功能相关的各种蛋白.(本文来源于《中国科学:生命科学》期刊2015年09期）
逆转录病毒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用。方法 30只兔建立左心耳内Dacron片植入血栓模型,随机分为PLEGFP-N1-tPA治疗组(n=10)、PLEGFP-N1空载体对照组(n=10)、空白对照组(n=10),局部基因转导,于术后2,30d各组1/2动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(confocal)观察所取左心耳组织增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达,体视镜和电视镜观察Dacron片表面血栓情况,免疫印迹(Western blot)、血浆平板和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测所取组织tPA表达、溶栓情况。结果术后2,30d取材,治疗组所取左心耳组织confocal均观察到多而强的EGFP表达,Plegfp-N1对照组也有EGFP表达,但空白对照组无EGFP表达。30个Dacron片加未植入组5个Dacron片共35个,在体视镜(×160)和电视镜(×500)下观察,未植入组和治疗组Dacron片表面均无血栓,对照组表面均有血栓。治疗组所取静脉Western blot检测均有外源tPA表达,对照组未检测到。血浆平板显示:治疗组均有大的溶解圈,有明显溶栓作用,对照组没有。结论 Plegfp-N1-tPA局部基因转导能有效阻止外源移植物表面血栓形成。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
逆转录病毒载体论文参考文献
[1].杜文敬,梁洋,朴善花,王春生,安铁洙.逆转录病毒载体介导的蜘蛛拖丝蛋白转基因小鼠的制备[J].黑龙江畜牧兽医.2018
[2].罗洪波,向道康,蔡鸿,冯超,向龙.组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体兔左心耳内靶向溶栓研究[J].贵州医药.2017
[3].农恬颖,杨小玲,崔佳瑜,杨素芳,朱鹏.水牛bFGF基因的克隆、逆转录病毒载体的构建和鉴定[J].中国科技论文.2017
[4].王丽芬.逆转录病毒载体构建过程中的“LTR”和“Ψ”——谈对南通市2014届高叁第一次调研测试第33题的补充[J].中学教学参考.2017
[5].琚幼婷,卢俊,胡衍辉,陈受琳,蔡俊赢.TRPV1基因的shRNA逆转录病毒载体的构建和鉴定[J].当代医学.2016
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[7].史柳芝,郑倩倩,贺立彩.IK4基因突变体与其逆转录病毒载体的构建及在白血病细胞中的表达[J].中国科技论文.2016
[8].臧金林,李红梅,方建红,周东风.CD59RNAi逆转录病毒载体转染卵巢癌细胞株A2780的构建[J].中国肿瘤外科杂志.2016
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[10].卢晶,陈锋,徐珍,张灵灵,徐鹏.逆转录病毒载体表达的膜型免疫球蛋白介导B细胞受体细胞信号传导[J].中国科学:生命科学.2015
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