炎症因子诱导间充质干细胞衰老的细胞核构象研究

论文摘要

炎症环境是一个高度动态的过程,MSCs在炎症环境中具有复杂的免疫调控功能。MSCs发挥免疫调控功能很大程度上依赖于其分泌的一系列因子对免疫微环境进行调控,而因子的分泌依赖于基因表达调控。MSCs在发挥免疫调节功能的同时也受到炎症微环境的影响从而改变MSCs的命运。异染色质是DNA高度折叠的紧密区域,一般被认为是转录不活跃的区域。炎症环境下MSCs转录谱发生剧烈的改变,大量低转录活性的基因变得高表达。核纤层作为核膜的主要组成成分不仅维持着细胞核形态的稳定,还可通过核纤层相关结构域调节异染色质分布进而调控基因表达。本课题主要是在体外利用TNF-α和IFN-γ两种炎症因子体外模拟炎症环境探讨炎症环境下MSCs核纤层调控机制和命运走向以及异染色质调控。我们发现炎症环境下MSCs增殖速度急剧下降,分细胞周期停滞在G0/G1,并产生衰老相关分泌表型。利用激光共聚焦显微镜观察到核纤层在炎症环境下变薄,导致细胞核扩张,并且伴随着异染色质水平的下降。通过siRNA敲低PML表达,我们发现PML-NB参与调节炎症环境下MSCs核纤层构象改变和异染色质水平下降;PML-NB还参与调控SASP的表达;敲低PML并未改变MSCs的细胞增殖下降。最后,我们通过siSTAT1验证了 PML-NB的形成不依赖于STAT1。综上所述,本课题阐明了 MSCs在TNF-α和IFN-γ模拟的炎症环境下产生大量的PML-NB改变核纤层构象及异染色质水平并最终导致MSCs走向衰老。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 前言
•   1.1 间充质干细胞与炎症
•   1.2 人早幼粒白血病蛋白的功能和研究现状
•   1.3 细胞衰老
•   1.4 核纤层与异染色质
• 第二章 材料方法
•   2.1 细胞系
•   2.2 试剂与仪器设备
•   2.3 实验方法
• 第三章 结果
•   3.1 人体脂肪来源MSCs的鉴定
•   3.2 IFN-γ与TNF-α诱导MSCs衰老
•   3.3 IFN-γ与TNF-α共刺激改变MSCs的细胞核构象
•   3.4 IFN-γ与TNF-α共刺激降低MSCs的异染色质水平
•   3.5 IFN-γ与TNF-α增加MSCs细胞核中PML表达
•   3.6 炎症因子诱导MSCs细胞核构象改变依赖于PML-NB
•   3.7 炎症因子诱导MSCs异染色质水平下降依赖于PML-NB
•   3.8 敲低PML表达对IFN-γ与TNF-α持续共刺激诱导MSCs衰老的影响
•   3.9 PML表达不依赖于STAT1
• 第四章 讨论
• 第五章 总结
• 参考文献
• 附录Ⅰ 中英文缩略词表
• 附录Ⅱ 引物序列表
• 科研成果
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 楚云鹏

导师: 时玉舫,邵常顺

关键词: 炎症,核纤层,异染色质,细胞衰老

来源: 苏州大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 苏州大学

分类号: R329.2

DOI: 10.27351/d.cnki.gszhu.2019.003147

总页数: 81

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