首页> 正文

牛蒡菊糖对衰老相关指标的影响

2020-12-08阅读(928)

牛蒡菊糖对衰老相关指标的影响

论文摘要

衰老是生理功能和代谢失调的全面表现。这是一个不可逆的过程,主要是受内部和外部因素。根据2015年普查结果,预计10年后,大于60岁的人口将达到3亿,进入老龄化国家队伍。多糖因天然、无毒等优点,影响抗氧化酶类活性和有害物质的生成,下调衰老相关基因等来达到延缓衰老目的,是潜在的抗衰老药物。牛蒡菊糖分子量范围在2000-5000Da,是通过β（2→1）糖苷键相连的果聚糖,末端是由葡萄糖α（1→2）糖苷键进行连接的,可以提高免疫力和和抗肿瘤活性。但该糖对延缓衰老是否有作用还不清楚。因此,本课题在细胞和动物水平上建立衰老模型,研究牛蒡菊糖对衰老相关指标的影响;并研究牛蒡菊糖在消化道行为,探讨其对肠道微生物影响。建立紫外线UVB诱导细胞光老化模型,研究BFO对UVB辐照HaCaT细胞的影响。实验结果发现,BFO可以通过以下方式保护HaCaT细胞:提高抗氧化酶的活性,下调促炎因子基因,凋亡基因Bax和MMP-9基因、蛋白的表达,上调抗凋亡基因Bcl-2表达。以上结果说明牛蒡菊糖抵抗外界不良环境,保护HaCaT细胞。建立D-半乳糖诱导的小鼠衰老模型,研究BFO对衰老相关指标的影响。在行为学,与正常组相比,模型组毛色干枯,活动减少,嗜眠,逐渐掉毛,最后脱毛,大便比较稀溏;与模型组相比,经过BFO治疗后发现,精神状态活跃,多动,毛色有亮泽,大便正常呈现黄色颗粒状。此外,衰老小鼠在免疫指数和脑指数显著性增加,肝脑抗氧化酶类提高,丙二醛降低。HE染色发现,经过与模型组相比,治疗BFO后,肝小叶的中央静脉是圆形的,该结构是完整的,排列整齐,肝细胞松动的程度小,并且嗜碱性物质消失;海马区神经元细胞数目清晰可见呈上升状态,排列整齐。在分子机制牛蒡菊糖下调小鼠肝脏和大脑衰老基因p16和p21表达量,达到延缓衰老的效果。通过16SrDNA扩增子测序技术检测BFO对D-gal诱导的衰老小鼠肠道微生物区系变化。结果表明在衰老模型组门水平中肠道微生物多样性下降,Firmicutes丰度增加,Bacteroidetes丰度降低,F/B的比值是增加的;在科水平上,Lachnospiraceae过度增加,Muribaculacea,Lactobacillaceae,Prevotellaceae丰度急剧下降。经过BFO的口服后在门水平,Firmicutes丰度下降,Bacteroidetes丰度增加,Firmicutes/Bacteroidetes的比值降低的,肠道微生物多样性是增加的。在科水平上,富含Lactobacillacea,Muribaculaceae,Rikenellaceae,Prevotellaceae,Akkermansiaceae,Ruminococcaceae;Lachnospiraceae的含量降低。体外人工胃液对BFO作用后,通过检测还原糖含量和该糖液相出峰时间发现牛蒡菊糖在消化前后,还原糖和出峰时间变化范围很小。因此可证明BFO抵抗胃液环境,进入肠道。体外模拟肠道微生物-枯草芽孢杆菌以BFO为唯一碳源,研究代谢物中多糖结构与活性。通过分离,鉴定,生物活性测定发现其BP多糖显著抑制人肺癌A549细胞的增殖和诱导ROS的产生。进一步研究发现,BP可以增强Caspase-9基因和酶的活性,上调Capsase-3mRNA和蛋白的表达,从而促进A549细胞发生凋亡。因此,根据以上结果我们推测牛蒡菊糖进入到肠道,会间接促进肠道微生物细菌合成其他有益的产物来调节机体状况。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  •   1.1 机体衰老的研究
  •   1.2 衰老分类
  •     1.2.1 皮肤老化研究进展及机制
  •     1.2.2 衰老机制研究
  •     1.2.3 衰老模型的建立
  •   1.3 多糖对衰老的影响
  •   1.4 牛蒡概述
  •     1.4.1 牛蒡古典记载及概述
  •     1.4.2 牛蒡的现代科学研究
  • 第二章 牛蒡菊糖对UVB辐射HaCaT氧化损伤中的保护作用
  •   2.1 实验试剂与仪器
  •     2.1.1 材料与试剂
  •     2.1.2 实验仪器
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 牛蒡菊糖的提取与纯化
  •     2.2.2 HaCaT细胞的培养及处理
  •     2.2.3 MTT检测细胞存活率
  •     2.2.4 细胞模型的建立
  •     2.2.5 AO/EB染色
  •     2.2.6 Hoechst 33258染色
  •     2.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡
  •     2.2.8 抗氧化酶的活性的测定
  •     2.2.9 细胞RNA的提取
  •     2.2.10 Western bloting
  •   2.3 数据分析
  •   2.4. 实验结果
  •     2.4.1 牛蒡菊糖分离纯化,理化性质和纯度鉴定
  •     2.4.2 牛蒡菊糖对HaCaT细胞毒性实验
  •     2.4.3 不同剂量的UVB对HaCaT细胞增殖率的影响
  •     2.4.4 BFO对紫外线照射后细胞增殖率的影响
  •     2.4.5 BFO对UVB辐照HaCaT细胞凋亡的影响
  •     2.4.6 BFO对UVB辐照HaCaT细胞抗氧化酶类的影响
  •     2.4.7 BFO对UVB辐照HaCaT细胞促炎因子基因表达的影响
  •     2.4.8 BFO对UVB辐照HaCaT基因Bax、Bcl-2基因表达影响
  •     2.4.9 BFO对UVB辐照HaCaT细胞MMP-9基因和蛋白的影响
  • 第三章 牛蒡菊糖延缓D-半乳糖致衰老小鼠的研究
  •   3.1 实验动物
  •   3.2 材料与试剂
  •   3.3 实验仪器
  •   3.4 实验方法
  •     3.4.1 动物分组及给药方法
  •     3.4.2 BCA法测定蛋白含量
  •     3.4.3 WST-8法测定SOD活力
  •     3.4.4 MDA含量的测定
  •     3.4.5 GSH-Px活力的测定
  •     3.4.6 组织的预处理
  •     3.4.7 小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的测定
  •     3.4.8 脑指数,脾脏指数,胸腺指数的测定
  •     3.4.9 小鼠肝脏及海马区组织HE染色病理分析
  •     3.4.10 qPCR分析BFO对小鼠肝脏和脑部组织衰老基因表达的影响
  •     3.4.11 BFO对衰老小鼠肠道微生物的影响
  •   3.5 统计方法
  •   3.6 实验结果
  •     3.6.1 衰老模型的建立
  •     3.6.2 BFO对D-gal致衰小鼠脏器指数的影响
  •     3.6.3 BFO对衰老小鼠血清中谷丙转氨酶,谷草转氨酶的影响
  •     3.6.4 BFO对衰老小鼠肝脏和脑部组织中SOD活力的影响
  •     3.6.5 BFO对衰老小鼠肝脏和脑部组织中GSH-Px活力的影响
  •     3.6.6 BFO对衰老小鼠组织中有害物质MDA生成的影响
  •     3.6.7 BFO对D-gal致衰小鼠肝脏组织病理形态影响
  •     3.6.8 BFO对D-gal致衰小鼠脑组织病理形态影响
  •     3.6.9 BFO对D-gal致衰小鼠肝脏p16和p21基因表达的影响
  •     3.6.10 BFO对D-gal致衰小鼠脑组织p16和p21基因表达的影响
  •     3.6.11 BFO对D-gal致衰小鼠肠道微生物菌群的影响
  • 第四章 一种以牛蒡根菊糖为碳源发酵枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis产生新的多糖
  •   4.1 实验材料与仪器
  •     4.1.1 菌株
  •     4.1.2 实验材料与试剂
  •     4.1.3 实验仪器
  •   4.2 实验方法
  •     4.2.1 人工胃液作用牛蒡菊糖分子量的变化体外研究
  •     4.2.2 枯草芽孢杆菌的培养
  •     4.2.3 以牛蒡根为碳源枯草芽孢杆菌发酵多糖的提取
  •     4.2.4 BP多糖的分离纯化
  •     4.2.5 紫外检测
  •     4.2.6 高效尺寸排阻色谱联合多角度激光光散射分析
  •     4.2.7 单糖组成分析
  •     4.2.8 甲基化分析
  •     4.2.9 核磁共振波谱分析
  •     4.2.10 细胞增殖活性检测
  •     4.2.11 AO/EB染色
  •     4.2.12 活性氧检测
  •     4.2.13 总RNA提取
  •     4.2.14 Western bloting
  •     4.2.15 Caspase-9酶活检测
  •     4.2.16 统计学处理
  •   4.3 实验结果
  •     4.3.1 人工胃液对牛蒡菊糖分子量的变化
  •     4.3.2 多糖的分子量测定
  •     4.3.3 BP多糖的理化性质分析
  •     4.3.4 BP多糖的高效尺寸排阻色谱-多角度激光散射分析
  •     4.3.5 BP多糖的单糖组成分析
  •     4.3.6 BP多糖的红外光谱测定结果
  •     4.3.7 BP多糖的甲基化分析
  •     4.3.8 BP多糖的核磁共振分析结果
  •     4.3.9 BP多糖对A549细胞增殖率的影响
  •     4.3.10 BP多糖诱导A549细胞凋亡
  •     4.3.11 BP多糖诱导A549细胞产生ROS
  •     4.3.12 BP多糖对A549细胞Caspase-3和Caspase-9的影响
  • 第五章 讨论
  • 总结与展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表的学术论文
  • 学位论文评阅及答辩情况表

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 徐磊

    导师: 陈靠山

    关键词: 衰老,牛蒡菊糖,衰老指标,肠道微生物,多糖结构

    来源: 山东大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 山东大学

    分类号: R339.38

    总页数: 95

    文件大小: 6451K

    下载量: 309

    相关论文文献

    • [1].牛蒡究竟有多牛[J]. 养生大世界 2016(12)
    • [2].牛蒡茶[J]. 新青年(珍情) 2017(01)
    • [3].用于益肾壮骨的药酒(下)[J]. 长寿 2017(04)
    • [4].药食两用话牛蒡[J]. 长寿 2017(06)
    • [5].牛蒡[J]. 开卷有益-求医问药 2017(10)
    • [6].牛蒡多酚的闪式提取工艺优化[J]. 农产品加工 2019(09)
    • [7].牛蒡根粉降血脂功效的实验研究[J]. 世界最新医学信息文摘 2015(48)
    • [8].舌尖好食材——牛蒡——江苏省徐州市沛县敬安镇刘庄牛蒡见闻[J]. 食品安全导刊 2019(17)
    • [9].牛蒡根水提物扩血管作用及机制研究[J]. 中国实验方剂学杂志 2013(23)
    • [10].牛蒡根粉减肥、降血脂功效实验研究[J]. 山西中医学院学报 2008(02)
    • [11].牛蒡的功效与作用[J]. 长江蔬菜 2019(15)
    • [12].牛蒡根中有效成分的含量测定[J]. 山西中医学院学报 2018(04)
    • [13].牛蒡根中绿原酸提取工艺的优化[J]. 山东农业科学 2012(02)
    • [14].牛蒡根总黄酮抗氧化活性研究[J]. 食品工业科技 2012(19)
    • [15].牛蒡根水提物对高尿酸血症小鼠的保护作用研究[J]. 中国药房 2011(43)
    • [16].牛蒡根中蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂筛选及降血糖活性评价[J]. 食品科技 2018(03)
    • [17].牛蒡根固体茶制剂中功能性成分含量测定[J]. 辽宁中医药大学学报 2019(02)
    • [18].牛蒡提取物对鸡皮明胶膜结构和性能的影响[J]. 现代食品科技 2019(03)
    • [19].牛蒡中有效成分对肝脏保护作用的研究进展[J]. 华西药学杂志 2017(06)
    • [20].灵芝在牛蒡固体培养基中发酵工艺优化及菌丝多糖的体外抗氧化活性[J]. 食品科学 2019(10)
    • [21].响应面法优化牛蒡根总黄酮超声波提取工艺[J]. 农产品加工 2019(10)
    • [22].牛蒡根中的功能成分及多酚类化合物提取方法研究进展[J]. 湖南文理学院学报(自然科学版) 2019(03)
    • [23].牛蒡根水提物对血管内皮细胞保护作用的研究[J]. 中华中医药杂志 2016(04)
    • [24].响应面法优化牛蒡根总黄酮提取工艺[J]. 食品工业科技 2013(12)
    • [25].基于牛蒡根的灵芝固体发酵菌质化学成分的初步分析[J]. 中国食用菌 2019(03)
    • [26].不同干燥方式对牛蒡片多酚含量及抗氧化能力的影响[J]. 江苏农业学报 2018(01)
    • [27].牛蒡不同部位绿原酸的提取与含量比较[J]. 云南化工 2018(12)
    • [28].牛蒡皮固体培养灵芝多糖对慢性炎性痛小鼠的影响[J]. 食品研究与开发 2019(12)
    • [29].牛蒡菊糖的提取工艺及生物活性的研究进展[J]. 江苏调味副食品 2019(03)
    • [30].响应面法优化牛蒡中绿原酸提取分离条件[J]. 食品研究与开发 2017(24)

    标签：;  ;  ;  ;  ;  

    牛蒡菊糖对衰老相关指标的影响
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2025 神降笔 版权所有 鄂ICP备12018319号-6