背角无齿蚌σ-GST基因克隆与五氯酚胁迫表达分析

论文摘要

谷胱甘肽S-转移酶（GST）在机体抗击氧化应激中发挥重要作用。我们前期研究表明,五氯苯酚（PCP）处理对背角无齿蚌（Anodonta woodiana）具有显著的氧化应激和急性毒性效应。为了探讨PCP慢性胁迫效应,本研究将背角无齿蚌随机分为对照组和PCP处理组,PCP处理组和对照组分别用13.9 mg/L和相同体积二甲亚砜处理;同时,克隆出σ型谷胱甘肽S-转移酶并命名为σ-GST,分析PCP对σ-GST表达的影响。σ-GST全长cDNA包括132 bp的5’端非编码区,80 bp的3’端非编码区,609bp的开放阅读框（ORF）。开放阅读由203个氨基酸组成的多肽链。σ-GST具有GST的标签序列和保守氨基酸,与其他物种σ类GST序列具有高度同源性。σ-GST广泛表达于斧足、外套膜、闭壳肌、心脏、肝胰腺、血淋巴和鳃。PCP处理后,肝胰腺、鳃和血淋巴中σ-GST表达水平显著增加。与对照组相比,PCP处理后肝胰腺σ-GST mRNA水平第1、3和第15天分别增加了28.73%、70.37%（P<0.05）和6.64倍（P<0.01）。与对照组相比,PCP处理后鳃中σ-GST mRNA水平在整个实验过程中增加了1.14倍。结果表明,背角无齿蚌ρ-GST表达水平上调有助于对抗PCP处理所产生的胁迫效应,提高动物环境耐受能力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 总RNA提取和cDNA第一链的合成
•     1.2.2 背角无齿蚌σ-GST核心片段的扩增
•     1.2.3 σ-GST mRNA水平定量检测
•     1.2.4 序列和系统发育分析
•     1.2.5 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 背角无齿蚌σ-GST分子结构
•   2.2 背角无齿蚌σ-GST的二级和三级结构分析
•   2.3 背角无齿蚌σ-GST系统进化
•   2.4 背角无齿蚌σ-GST组织分布
•   2.5 PCP对背角无齿蚌σ-GST表达的影响
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 夏西超,刘庆春,华春秀,张科,李冰洁,宋国英,薛士鹏,于瑞雪,王中晓,张庆远,刘丽

关键词: 背角无齿蚌,型谷胱甘肽转移酶,基因克隆,胁迫表达

来源: 生物技术通报 2019年05期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,环境科学与资源利用

单位: 平顶山学院医学院,南阳医学高等专科学校基础医学部

基金: 河南省联合基金项目(182300410123),中国博士后基金项目(2016M590143)

分类号: X171.5;Q78

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0871

页码: 93-101

总页数: 9

文件大小: 3331K

下载量: 60