导读:本文包含了细胞分离论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,干细胞,组织,生物学,北京鸭,树突,纤维。
细胞分离论文文献综述
李飞,潘妍,张建平[1]（2019）在《人外周血单个核细胞分离优化》一文中研究指出为研究人外周血单个核细胞(PBMC)分离优化的条件,提高细胞的分离率与收集率,在一定程度上减少分离时间和原料,提高细胞获得率与纯度,从而满足工艺化、市场化研发免疫产品的要求,本实验从分离离心方面和洗涤离心方面列出正交表探索实验找出最佳条件。分离离心时,转速为主要影响因素,600 g为最佳离心转速;洗涤离心时,分离液体积为主要影响因素,2倍分离液体积为最佳分离液体积。洗涤缓冲液的选材中,0.9%的生理盐水获得活细胞的浓度最高。基于实验结论,可通过调整优化来满足实验需求来适应实验室各条件,分离出更有活力、更多的PBMC。(本文来源于《生物化工》期刊2019年05期）
李婷婷,许龙,梁峻[2]（2019）在《北京鸭肝间充质干细胞分离、培养及分化潜能研究》一文中研究指出试验旨在研究北京鸭肝间充质干细胞(liver mesenchymal stem cells,LMSCs)的分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性。取孵化19日龄健康鸭胚通过酶消法分离出北京鸭LMSCs,进行体外培养,通过免疫荧光、RT-PCR和流式细胞术等技术对北京鸭LMSCs特异性标记物(CD29、CD44、CD71、CD73、CD90、CD105、CD133及CD166)进行检测,因北京鸭LMSCs分离过程中会存在少量造血干细胞,所以对造血干细胞特异性标记物CD31、CD34进行检测,同时对细胞进行成脂和成骨的分化诱导,检测其多向分化潜能。结果显示,通过酶消法获得的北京鸭LMSCs具有间充质干细胞特异性标记物,造血干细胞特异性标记物为阴性表达,证明其为肝间充质干细胞,且向成脂肪细胞和成骨细胞分化诱导。RT-PCR检测结果发现,成脂分化诱导中,过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、脂蛋白酶(lipoprotein lipase,LPL)呈阳性表达;成骨分化诱导中,Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Runt相关转录因子2 (Runt-related transcription factor 2,RUNX2)呈阳性表达。北京鸭LMSCs较强的自我增殖能力可使畜禽遗传资源有无限利用的可能性,多向分化潜能强则说明重编程的水平较低,对畜禽种质资源的复原有巨大的优势,为组织再生研究提供了一定的理论基础,对于畜禽资源的开发与利用打开了一个更为宽广的平台。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年10期）
陈世钻,俞富祥,陈俊予,唐银河[3]（2019）在《肝细胞、肝窦内皮细胞分离培养及肝细胞支架的制备》一文中研究指出目的:探究大鼠肝细胞、肝窦内皮细胞的分离培养方法及肝去细胞支架的制备方法。方法:用胶原酶IV消化肝脏组织后经洗涤、过滤、离心等步骤分离出大鼠肝细胞,然后置于培养基内进行纯化、培养后行细胞免疫组织化学检测;通过Percoll密度梯度离心法分离出肝窦内皮细胞置于培养基内纯化、培养后行免疫荧光检测;肝组织经循环灌注去细胞处理制备成大鼠肝细胞去细胞支架后经扫描电镜证实。结果:分离出的大鼠肝细胞在显微镜下呈光亮圆形,饱满,胞核清晰。肝细胞细胞角蛋白18免疫组织化学染色后见胞浆内存在棕黄色颗粒。肝窦内皮细胞呈梭形,细胞核位于中央。内皮素-1免疫荧光染色后细胞表面呈红色信号。制备成的大鼠肝脏去细胞支架在扫描电镜下显示细胞外基质保留,无细胞核及细胞质成分。结论:成功分离出了肝细胞和肝窦内皮细胞并成功制备了肝去细胞支架。(本文来源于《温州医科大学学报》期刊2019年09期）
李怡,王晓旭,冯玫[4]（2019）在《小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导分化为树突细胞的实验研究》一文中研究指出目的:探索小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导分化为树突细胞(dendriric cell,DC)的方法,为小鼠肺组织内造血干细胞的相关研究提供理论基础和实验方法。方法:4只雄性C57小鼠肺组织经I型胶原酶、I型DNA酶和淋巴细胞分离液消化、分离、纯化为单个核细胞,采用流式细胞仪鉴定和分选Lin~-Sca-1~+c-Kit~+细胞即造血干细胞(HSC)。向所获得的HSC加入干细胞因子(SCF)和白介素(IL)-3促进细胞增殖。停用SCF和IL-3后,加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4将HSC诱导分化为DC,加入脂多糖(LPS)促细胞成熟。倒置显微镜下观察DC形态,流式细胞术分析DC细胞表面分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表达,酶联免疫吸附技术(ELISA)检测IL-12表达水平。结果:从流式细胞仪分选鉴定的4只小鼠肺组织单个核细胞中,共收集HSC2419. 67±247. 59个,纯度7. 16%±0. 43%。HSC经SCF和IL-3诱导7 d后扩增62. 34±3. 23倍;诱导培养15 d后获得成熟的树突状细胞,细胞表面具有典型的树枝状突起,高表达树突状细胞特异性表面分子CDllc(92. 62±3. 68)%、MHC-II(75. 96±5. 13)%、CD80(72. 07±4. 38)%、CD86(83. 89±6. 28)%。ELISA检测IL-12的表达水平为136. 12±16. 59 pg/ml。结论:肺组织内存在HSC,可经细胞因子增殖诱导向DC转化。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年04期）
宋婉云,王惠宇,王明明,张弢[5]（2019）在《血液中稀有细胞分离和富集方法研究进展》一文中研究指出近年来,对血液中含量低于100个/mL的稀有细胞进行高效率、高纯度富集或捕获,并对捕获得到的靶细胞进行无损释放,是肿瘤精准治疗、早期疾病诊断等领域的研究热点。其中,对循环肿瘤细胞(CTCs)和胎儿有核红细胞(NRBCs)两类稀有细胞的富集研究最为广泛。针对这两类稀有细胞,从分离与富集原理、实验方法、分离效率等角度入手,综述该领域的研究进展,分析各类方法的优缺点。综合来看,稀有细胞的分离原理和方法大致可以分为物理分选法和免疫亲和法两类,前者利用稀有细胞的物理特性(如尺寸大小等)进行分选,后者利用细胞表面的特异性受体与抗体、核酸适配体进行的免疫亲和反应所产生的差异来分离和富集稀有细胞。此外,进一步介绍稀有细胞的物理学特性以及纳米技术、微流控技术、单细胞操作等新兴技术在分离富集领域的运用,并对各种分离方法进行简要的比较分析。(本文来源于《中国生物医学工程学报》期刊2019年04期）
郑梅,梁广忠,赵晓萌,孙雅娜,赵颖[6]（2019）在《倒置显微镜观察MDCK细胞分离流感病毒过程中的状态变化》一文中研究指出目的探讨倒置显微镜下观察狗肾上皮细胞(MDCK)分离流感病毒状态变化,为科学防控流感提供技术支持。方法选取天津市津南区疾病预防控制中心流感网络实验室于2018年10月11日～20日流感病毒检测阳性的咽拭子样本20例,接种到MDCK传代细胞中,于接种后使用倒置显微镜观察细胞形态变化,包括细胞肿胀、间隙增大、核固缩或破裂、细胞部分或全部脱落,用血凝实验方法测定MDCK细胞不同分离状态下的流感病毒滴度状况。结果倒置显微镜可以观察到MDCK细胞分离流感病毒状态的变化,阴性对照与未出现倒置显微镜镜下病变的MDCK细胞不能使人"O"型红细胞凝集;出现病变的MDCK细胞可以使人"O"型红细胞凝集,产生HA滴度。结论倒置显微镜在观察MDCK细胞分离流感病毒过程中起到重要作用,可提前判断病毒的滴度与活力,为科学防控流感提供技术支持。(本文来源于《医学信息》期刊2019年16期）
朱雨,郝建秀[7]（2019）在《围生期间充质干细胞分离及细胞库建设初步分析》一文中研究指出目的建立人围生期间充质干细胞分离培养体系,初步探索围生期干细胞库建设流程。方法我科于2017年10月开始了围生期间充质干细胞(perinatal mesenchymal stem cells,P-MSCs)存储工作,从我院第一中心妇产科收集女性产后脐带及胎盘组织,于标准化细胞处理车间分离、培养脐带间充质干细胞、羊膜间充质干细胞及母体面间充质干细胞等围生期间充质干细胞,经质检合格后入库存储,目前已有109份各类干细胞入库存储。结果已分离获得各类型围生期间充质干细胞,P-MSCs呈梭形生长,高表达CD44、CD73、CD90等间充质干细胞特异性标记蛋白,低表达HLA-DR、CD34蛋白。结论本研究建立了人胎盘间充质干细胞分离培养体系,为我院围生期干细胞库建设奠定基础。(本文来源于《解放军医学院学报》期刊2019年08期）
刘琴,陈芳,朱以良,张宜[8]（2019）在《一种新的佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞分离培养法》一文中研究指出目的采用悬浮组织块法建立一种新的、操作简单的佐剂性关节炎新西兰大白兔模型成纤维样滑膜细胞体外分离培养法。方法选择健康新西兰大白兔16只,随机分为2组:正常组和模型组,每组8只。对模型组多点多次注射弗氏完全佐剂制备佐剂性关节炎模型,取膝关节滑膜组织,分别采用悬浮组织块法、组织块贴壁法分离培养佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞,观察细胞生长状况及形态特征,用CCK-8法检测细胞活力,免疫荧光法鉴定波形蛋白的表达情况。结果模型组兔足跗关节及足趾部较正常组明显肿胀,解剖兔足趾部后肉眼可见模型组伴有明显的微血管增生和炎症。H-E染色结果显示,正常组兔膝关节滑膜细胞呈串珠样规则排列,而模型组滑膜细胞排列紊乱,提示佐剂性关节炎新西兰大白兔模型制备成功。悬浮组织块法和组织块贴壁法操作所需时间分别约为25 min、1 h,分离所得细胞的形态、活性相似,波形蛋白阳性率分别为98.01%、98.35%。结论悬浮组织块法可成功分离培养出佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞,操作简单,所需时间短。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2019年07期）
周小丹,罗金,漆倩荣,谢青贞,钟方圆[9]（2019）在《黄素化颗粒细胞分离提纯方法的比较研究》一文中研究指出目的比较不同人卵巢颗粒细胞分离提纯方法的效果。方法收集体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者取卵后的卵泡液,分别采用密度梯度离心法、红细胞裂解法、密度梯度离心法+红细胞裂解法分离、提取黄素化颗粒细胞,比较3种方法获取的细胞数量、存活率、纯度以及生长、贴壁情况。结果密度梯度离心法获取的颗粒细胞数量最低,但体外培养生长状态良好且细胞贴壁状态最佳;红细胞裂解法获取的颗粒细胞数量均多于其他两种方法(P<0.05),但细胞存活率低,体外培养生长状态欠佳、细胞贴壁差;卵泡刺激素受体(FSHR)细胞免疫组化及荧光鉴定显示3种方法获取的颗粒细胞纯度均>90%。结论密度梯度离心法获取的细胞数目少,但生长状态及贴壁情况最佳,是分离提纯颗粒细胞较为理想的选择方法。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2019年06期）
陈瑞平,吴楚漫,周文怡,姜浩东,吴越[10]（2019）在《Hartley豚鼠耳朵成纤维细胞分离培养与鉴定分析》一文中研究指出本文旨在建立快速获取豚鼠耳朵成纤维细胞的方法,为豚鼠体细胞重编程技术提供起始细胞。首先采用0. 05%Trypsin-EDTA和Collagenase IV两种消化酶对脱毛后的耳朵组织碎块进行消化;然后对获取的细胞进行体外培养和形态学观察,支原体检测,Vimentin蛋白免疫荧光鉴定,测定细胞生长曲线计算细胞倍增时间;用绿色荧光蛋白的逆转录病毒感染后用流式细胞仪检测感染效率,核型鉴定检测病毒对核型的影响。分离的豚鼠耳朵成纤维细胞为贴壁生长细胞,消化后2～3 h即大部分贴壁并基本完全伸展,细胞呈梭形或多角形,胞浆饱满,立体感强,细胞核清晰形态良好,支原体检测阴性。细胞表达成纤维细胞特异性蛋白Vimentin。生长曲线为S形,符合体外培养细胞正常生长增殖规律,细胞倍增时间为24. 85 h。逆转录病毒感染效率达75. 6%,病毒感染后染色体2n=64的细胞占90%,遗传稳定核型正常。本研究提供的体细胞获取方法操作简单,效率高,获取的细胞状态良好,细胞增殖速度快,细胞感染率高,是一种非常合适的豚鼠耳朵成纤维细胞分离手段,为后续进一步研究豚鼠体细胞重编程提供了技术基础。(本文来源于《激光生物学报》期刊2019年03期）
细胞分离论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
试验旨在研究北京鸭肝间充质干细胞(liver mesenchymal stem cells,LMSCs)的分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性。取孵化19日龄健康鸭胚通过酶消法分离出北京鸭LMSCs,进行体外培养,通过免疫荧光、RT-PCR和流式细胞术等技术对北京鸭LMSCs特异性标记物(CD29、CD44、CD71、CD73、CD90、CD105、CD133及CD166)进行检测,因北京鸭LMSCs分离过程中会存在少量造血干细胞,所以对造血干细胞特异性标记物CD31、CD34进行检测,同时对细胞进行成脂和成骨的分化诱导,检测其多向分化潜能。结果显示,通过酶消法获得的北京鸭LMSCs具有间充质干细胞特异性标记物,造血干细胞特异性标记物为阴性表达,证明其为肝间充质干细胞,且向成脂肪细胞和成骨细胞分化诱导。RT-PCR检测结果发现,成脂分化诱导中,过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、脂蛋白酶(lipoprotein lipase,LPL)呈阳性表达;成骨分化诱导中,Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Runt相关转录因子2 (Runt-related transcription factor 2,RUNX2)呈阳性表达。北京鸭LMSCs较强的自我增殖能力可使畜禽遗传资源有无限利用的可能性,多向分化潜能强则说明重编程的水平较低,对畜禽种质资源的复原有巨大的优势,为组织再生研究提供了一定的理论基础,对于畜禽资源的开发与利用打开了一个更为宽广的平台。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞分离论文参考文献
[1].李飞,潘妍,张建平.人外周血单个核细胞分离优化[J].生物化工.2019
[2].李婷婷,许龙,梁峻.北京鸭肝间充质干细胞分离、培养及分化潜能研究[J].中国畜牧兽医.2019
[3].陈世钻,俞富祥,陈俊予,唐银河.肝细胞、肝窦内皮细胞分离培养及肝细胞支架的制备[J].温州医科大学学报.2019
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[8].刘琴,陈芳,朱以良,张宜.一种新的佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞分离培养法[J].第二军医大学学报.2019
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[10].陈瑞平,吴楚漫,周文怡,姜浩东,吴越.Hartley豚鼠耳朵成纤维细胞分离培养与鉴定分析[J].激光生物学报.2019
论文知识图
