溶纤酶论文_文浩平

导读:本文包含了溶纤酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:芽孢,枯草,杆菌,菌株,液态,高产,枯草杆菌。

溶纤酶论文文献综述

文浩平[1](2011)在《一种新型菌株—粪肠球菌EF608菌株(Enterococcus faecalis EF608)的筛选和鉴定及其溶纤酶的分离纯化和性质研究》一文中研究指出近年来,越来越多的人病于和死于血栓类心血管疾病。在临床上,利用溶纤酶溶解血栓而疏通血管的疗法,是目前治疗血栓类疾病的重要方法之一。自然界中存在许多溶纤酶供体,如,在人体、动物、植物和微生物中都有天然的溶栓活性物质存在。其中,因为微生物有其种类繁多、易于培养和繁殖较快等优点,所以,人们从微生物中提取溶纤活性物质,进而研发生产溶栓药物。该研发溶栓药物的方法具有很多优势,如微生物来源丰富、生产成本低、生产周期短、不受地域限制等优点。在本研究中,从空气中富集培养细菌后,采用琼脂糖-纤维蛋白平板方法,经过初筛及复筛,最终分离得到一株新的溶纤活性物质的菌株。采用传统的细菌分类方法(包括形态特征观察和生理生化特征测定)与现代生物信息学技术方法(包括16S rDNA的序列分析和分子系统发育树的构建),对该菌株进行分析鉴定,所有的结果提示该菌株为粪肠球菌(Ent.faecalis)的一种新型菌株,我们将其命名为Ent. faecalis EF608。通过对该菌株在不同条件下产酶活力的强弱进行研究,初步优化了该菌株的产酶条件,确定了实验条件下的改良CM培养基配方。通过不同硫酸铵饱和度的分级沉淀实验,确定了对EF608菌株发酵液进行蛋白质初步提取的最佳硫酸铵饱和度为65%。再以65%的硫酸铵饱和度对EF608菌株发酵液进行硫酸铵沉淀。在完成发酵蛋白的粗提后,结合叁步柱层析法(①苯基琼脂糖凝胶FF疏水层析;②DEAE-Sephadex A-25交换层析;③Heparin-Sepharose亲和层析)分离纯化得到一种具有溶纤活性的单一组分,命名为:EF608菌株溶纤酶。在还原与非还原条件下,对该组分进行SDS-PAGE分析测试,其结果提示,该组分可能是一种由单一肽链构成的蛋白质。对该组分进行的HPLC分析表明,该组分只有一个主峰。采用SDS-PAGE法测定出EF608菌株溶纤酶的相对分子量为37.1KDa,对其酶学性质进行的研究表明:该酶的最适pH值为7.5;最适反应温度35℃;Ba2+对该酶的酶活力有较明显的促进作用,Na+和Ca2+对该酶的酶活力有轻微的促进作用,高浓度的Fe2+、Cu2+和Zn2+对此酶有明显的抑制作用;丝氨酸蛋白酶专一抑制剂PMSF对该酶的抑制作用相对较弱,β-巯基乙醇对该酶的抑制作用相对不明显,金属蛋白酶专一抑制剂金属离子螯合剂EDTA则可以完全抑制该酶的酶活性,这些结果提示该酶可能为金属蛋白酶类;该酶可以降解纤维蛋白原的Aα链与Bβ链,但不能作用于纤维蛋白原的γ链,且其溶纤活性的强弱具有时间效应。综上所述,本研究分离筛选到一种产溶纤酶的新型粪肠球菌(Enterococcus faecalis)EF608菌株,对该菌株产酶条件的进行了初步研究,分离纯化出该菌株所产的EF608菌株溶纤酶,并对该酶性质进行了初步的研究。这些为进一步研发溶栓药物奠定了基础。(本文来源于《重庆师范大学》期刊2011-04-01)

陶素芬,韩延磊,杨丽萍,刘建军,赵祥颖[2](2010)在《微生物溶纤酶的研究概况与进展》一文中研究指出溶纤酶是治疗血栓性疾病药物的主要成分,越来越受到人们的关注。微生物是溶纤酶的重要来源。本文先是介绍了溶纤酶的种类和各自的特点,生产溶纤酶产品的企业,溶纤酶产生菌的筛选及种类,然后叙述了该类酶的分离提纯方法、酶活测定方法以及微生物溶纤酶的分子生物学研究情况,最后展望了微生物产溶纤酶的发展前景。(本文来源于《山东食品发酵》期刊2010年03期)

史丰坤[3](2009)在《一株枯草芽孢杆菌产溶纤酶的研究》一文中研究指出溶纤酶是指能溶解血液中纤维蛋白的一类酶的总称。微生物是溶纤酶最重要的来源之一,微生物溶纤酶具有分子量小、无免疫原性、安全无毒、酶活性高、不易引起出血、半衰期长和可经消化道直接吸收等优点,被认为是安全、廉价、最具开发潜力的溶栓剂之一。本课题从诱变选育溶纤酶高产突变株开始,主要完成了以下研究内容:从实验室保藏菌种B2(溶纤酶活470IU/mL)出发,采用紫外线、硫酸二乙酯单独及复合诱变处理方式进行诱变,经过平板初筛和摇瓶发酵初筛、复筛选育到一株产酶水平较高且性状稳定的溶纤酶高产突变株SFF-B2,产酶活力达790IU/mL,比出发菌株活力提高了68.2%;对菌株SFF-B2进行了菌落、菌体形态特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析,初步鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(GenBank登录号:FJ612600)。对溶纤酶高产突变株SFF-B2的发酵产酶培养基和培养条件进行了优化。确定的最佳培养基为(g/L):可溶性淀粉60,豆粕粉18,玉米浆2,CaCl2 0.5,MgSO4 0.5,K2HPO4 2,NaCl 0.4;确定的最佳发酵条件为:种龄14h,接种量5%,初始pH值7.0,装液量30mL/250mL叁角瓶,摇床转速180 r/min,培养温度37℃。在最佳培养基和最佳发酵条件下,突变株SFF-B2产酶活力达到1218 IU/mL,比优化前提高了54%。采用硫酸铵分级盐析、透析袋脱盐、Sephadex G-25凝胶过滤层析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析分离技术,从发酵液中分离纯化出溶纤酶,酶活回收率达到48%,纯化倍数为28;纯化后的溶纤酶经SDS-PAGE鉴定为单一组分,其相对分子量为29.8 kDa。溶纤酶在常温下稳定,50℃以上容易失活;酶最适反应温度40℃;在KH2PO4-NaOH缓冲体系和磷酸盐缓冲体系中酶活较稳定,最适pH为7.0;Cu2+、Ag+、Al3+对酶有比较明显的抑制作用,且离子强度越大时,抑制作用越明显;Ca2+、Mg2+对酶有比较明显的激活作用。综上所述,突变株SFF-B2所产溶纤酶具有较好的温度和pH稳定性,是一株具有开发潜力的溶纤酶生产菌株。(本文来源于《山东轻工业学院》期刊2009-06-08)

史丰坤,赵祥颖,刘建军,冯芳[4](2008)在《溶纤酶高产菌株液体发酵条件的优化》一文中研究指出以突变株B2为出发菌株,对其液态发酵生产溶纤酶的培养基及培养条件进行了优化。实验确定最优产酶培养基组成为:可溶性淀粉60g/L,豆粕粉18g/L,玉米浆2g/L,CaCl20.3g/L,K2HPO42g/L,MgSO40.5g/L,NaCl0.5g/L,初始pH值10.0。在此基础上,设计培养条件的优化实验,实验结果表明,在种龄14h,接种量5%,装液量为30mL/250mL叁角瓶,180r/min的条件下,37℃培养64h达到产酶高峰,产酶活力可达1215IU/mL。(本文来源于《山东食品发酵》期刊2008年04期)

郭德军,邓景致,王欣[5](2006)在《高产溶纤酶菌株的筛选鉴定及特性研究》一文中研究指出从多个大豆细菌发酵食品中,分离纯化得到9株高溶纤酶活性的芽孢杆菌,并对筛选得到菌株的菌落形态和菌株形态、生理生化特性进行了鉴定,确认所筛选得到的9株高产菌株均属枯草芽孢杆菌属,其中3株菌的发酵液还可强烈抑制金黄色葡萄球菌的生长。另外,对BS1菌株的其他特性作了相应的研究。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学学报》期刊2006年05期)

鲁艳莉,宁喜斌[6](2006)在《高产溶纤酶菌株的选育》一文中研究指出以枯草芽孢杆菌 YL-P2、YL-F2作为出发菌株,分别采用紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变以及紫外线和硫酸二乙酯复合诱变,以脱脂牛奶平板法为初筛方法结合纤维蛋白平板复筛的方法选育出溶纤酶活力高的菌株, 获得了高产溶纤酶菌株 UV-8。UV-8溶纤酶活力达到2 314 IU/mL,与出发菌株相比,酶活力提高了2倍。结果表明,经多次传代后菌株 UV-8的溶纤酶酶活达到稳定,具有很好的潜在开发前景。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2006年02期)

鲁艳莉,宁喜斌[7](2005)在《发酵豆制品中产溶纤酶菌株的筛选》一文中研究指出血栓性疾病是严重危害人类健康的疾病,临床上应用的许多溶栓药物大多都存在着缺陷,溶纤酶作为一种新型的溶栓药物克服了许多溶栓药物的缺点正被广泛的研究与利用。本实验目的是从豆豉、腐乳等发酵豆制品中筛选出产溶纤酶活力高的菌株,为开发高溶纤酶活性的溶栓药物奠定基础。(本文来源于《中国调味品》期刊2005年08期)

梁思宇,陆兆新,邹晓葵,张晓东[8](2001)在《高溶纤酶活性枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定》一文中研究指出从多个枯草样品中分离纯化得到 2 0株芽孢杆菌 ,并进行了鉴定。通过对固体发酵所产生的溶纤酶的研究 ,发现均能不同程度地产生溶纤酶 ,其中菌株FM S1、FM S2、FM S8、FM S6、FM S1 1产生的溶纤酶活性均高于日本的纳豆杆菌。同时对筛选的菌株的形态和菌落形态、生理生化特性进行鉴定 ,确认所筛选到产酶菌株均属于枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。另外 ,对FM S2作固体发酵确定在熟大豆上枯草杆菌溶纤酶生物合成的模式为同步合成型(本文来源于《微生物学通报》期刊2001年05期)

陆兆新[9](2001)在《枯草杆菌溶纤酶的研究进展》一文中研究指出血栓性疾病是涉及到血液和循环系统的疾病,其病残率和病死率均比较高。常见的有冠状动脉形成血栓引起心肌梗塞或心绞痛,脑血管血栓成为脑中风,肺动脉栓塞引起肺梗塞或急性肺原心脏病等,因此血栓是许多疾病之源。心脑血管血栓病已跃居人类死因的第一位。(本文来源于《新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)》期刊2001-09-13)

[10](2001)在《组织型溶纤酶元激活剂治疗急性缺血性脑中风》一文中研究指出静脉内注射组织型溶纤酶元激活剂 (t pA)治疗急性缺血性脑中风的疗效尚未肯定。本文研究 3948名急性缺血性脑中风 (ICH)中 70名 (1.8% )接受t pA的效果 ,住院病死率为15 .7%。未用t pA组为 5 .1%。结论 :用t pA治疗(本文来源于《高血压杂志》期刊2001年01期)

溶纤酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

溶纤酶是治疗血栓性疾病药物的主要成分,越来越受到人们的关注。微生物是溶纤酶的重要来源。本文先是介绍了溶纤酶的种类和各自的特点,生产溶纤酶产品的企业,溶纤酶产生菌的筛选及种类,然后叙述了该类酶的分离提纯方法、酶活测定方法以及微生物溶纤酶的分子生物学研究情况,最后展望了微生物产溶纤酶的发展前景。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

溶纤酶论文参考文献

[1].文浩平.一种新型菌株—粪肠球菌EF608菌株(EnterococcusfaecalisEF608)的筛选和鉴定及其溶纤酶的分离纯化和性质研究[D].重庆师范大学.2011

[2].陶素芬,韩延磊,杨丽萍,刘建军,赵祥颖.微生物溶纤酶的研究概况与进展[J].山东食品发酵.2010

[3].史丰坤.一株枯草芽孢杆菌产溶纤酶的研究[D].山东轻工业学院.2009

[4].史丰坤,赵祥颖,刘建军,冯芳.溶纤酶高产菌株液体发酵条件的优化[J].山东食品发酵.2008

[5].郭德军,邓景致,王欣.高产溶纤酶菌株的筛选鉴定及特性研究[J].黑龙江八一农垦大学学报.2006

[6].鲁艳莉,宁喜斌.高产溶纤酶菌株的选育[J].食品与发酵工业.2006

[7].鲁艳莉,宁喜斌.发酵豆制品中产溶纤酶菌株的筛选[J].中国调味品.2005

[8].梁思宇,陆兆新,邹晓葵,张晓东.高溶纤酶活性枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定[J].微生物学通报.2001

[9].陆兆新.枯草杆菌溶纤酶的研究进展[C].新世纪新机遇新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册).2001

[10]..组织型溶纤酶元激活剂治疗急性缺血性脑中风[J].高血压杂志.2001

论文知识图

溶纤酶样品的溶纤效果溶纤酶的SDS-PAGE电泳图(M-标...!"各菌株溶纤酶活力比较(下转第 ...高产溶纤酶突变株SFF-B2的选育...温度对纤溶活性酶的影响凝结芽孢杆菌发酵上清的纤溶活性

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溶纤酶论文_文浩平
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