交联聚异丁烯对小鼠巨噬细胞的细胞相容性和免疫相容性

论文摘要

目的探究交联聚异丁烯（xPIB）-人工晶状体材料的细胞相容性和免疫相容性。方法用阴性对照丙烯酸酯（100%浸提液）、阳性对照苯酚214 mg·L-1及xPIB（25%,50%,75%和100%浸提液）分别处理RAW264.7细胞24～120 h,用MTT法检测细胞存活率;用阴性对照丙烯酸酯（100%浸提液）、阳性对照脂多糖（LPS）10μg·L-1和xPIB（100%浸提液）分别处理RAW264.7细胞24和48 h,用Griess法检测细胞培养液中一氧化氮（NO）水平,中性红摄取实验检测细胞吞噬能力,用实时定量PCR检测细胞内白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、IL-12b、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、CD80、CD86和一氧化氮合酶（iNOS）mRNA水平,并用ELISA检测细胞上清中IL-1β,IL-6,IL-12p70及TNF-α蛋白水平。最后,RAW264.7细胞分别与丙烯酸酯和xPIB晶状体共孵育24和48 h,并用阳性对照LPS 10μg·L-1刺激丙烯酸酯表面的RAW264.7细胞24和48 h,用显微镜观察黏附在晶状体表面的细胞形态并统计其数目。结果 xPIB 25%,50%,75%和100%浸提液处理RAW264.7细胞24～120 h,与细胞对照组相比,细胞存活率无显著差异;xPIB（100%浸提液）刺激RAW264.7细胞24和48 h后,与细胞对照组相比,RAW264.7细胞上清NO含量,吞噬中性红颗粒的能力,IL-1β、IL-6、IL-12b、TNF-α、CD80、CD86和iNOS mRNA水平及IL-1β,IL-6,IL-12p70和TNF-α蛋白水平均无显著差异。RAW264.7细胞分别与丙烯酸酯和x PIB晶状体共孵育24和48 h,在丙烯酸酯表面黏附的RAW264.7细胞处于静息状态,细胞呈圆形,无伪足结构;在x PIB表面黏附的RAW264.7细胞也处于静息状态,但细胞数目明显少于丙烯酸酯表面（P<0.01）;而阳性对照LPS 10μg·L-1处理RAW264.7细胞24和48 h后,细胞处于活化状态,胞浆中出现空泡,边缘伸出伪足。结论与丙烯酸酯晶状体材料相比,x PIB晶状体材料对RAW264.7细胞的存活率和吞噬能力无影响,亦未诱发炎症反应,提示x PIB具有较好的细胞相容性和免疫相容性。

论文目录

• 1材料与方法
•   1.1细胞、材料、试剂和主要仪器
•   1.2 MTT法检测细胞存活率
•   1.3 Griess法检测细胞上清中NO水平
•   1.4中性红摄取实验检测巨噬细胞吞噬能力
•   1.5实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测细胞因子m RNA水平
•   1.6 ELISA法检测细胞上清中的炎症相关细胞因子的水平
•   1.7观察材料表面黏附细胞的形态和数目
•   1.8统计学分析
• 2 结果
•   2.1 x PIB浸提液对RAW264.7细胞存活率的影响
•   2.2 x PIB浸提液对NO水平的影响
•   2.3 x PIB浸提液对RAW264.7细胞吞噬能力的影响
•   2.4 x PIB浸提液对细胞因子、CD80、CD86和i NOS m RNA水平的影响
•   2.5 x PIB浸提液对细胞因子水平的影响
•   2.6 x PIB表面黏附的RAW264.7细胞数目和形态
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 潘邦伦,章华颖,姜丽丽,林翰超,方小娟,姜力,李伟

关键词: 交联聚异丁烯,细胞相容性,免疫相容性,巨噬细胞,细胞因子

来源: 中国药理学与毒理学杂志 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 生物医学工程

单位: 温州医科大学检验医学院生命科学学院,检验医学教育部重点实验室

基金: 国家重点研发计划(2017YFC1104502)~~

分类号: R318.08

页码: 970-976

总页数: 7

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